射频消融治疗BCLC分期A期合并门静脉高压脾功能亢进的肝细胞癌(≤3.0cm)较长期疗效分析

目的探讨采用射频消融术治疗巴塞罗那临床肝癌分期(Barcelona Clinic Liver Cancer,BCLC)A期合并门静脉高压脾功能亢进肝细胞癌(≤3 cm)的安全性及较长期疗效分析。方法选取2008年1月至2011年1月期间武汉大学中南医院符合下列条件病人进行回顾性总结:①初次诊断肝细胞癌(≤3 cm)伴门静脉高压脾功能亢进;②初次治疗是采用射频消融术;③至2016年1月获得完整随访的临床资料。结果共39例符合纳入标准,术后无死亡。随访时间平均53个月(10~95个月)。1、3、5、7年总生存率分别是94.8%(37/39)、51.5%(20/39)、25.6%(10/39)、17.9%(7/39);无瘤生存率分别是84.1%(34/39)、33.3%(10/39)、17.9%(7/39)、5.1%(2/39)。共32例死亡,其中21例(53.8%)死于肝癌复发转移,7例(17.9%)死于上消化道出血和肝衰竭,2例(6.2%)死于脑血管意外,1例(3.1%)死于心血管意外,1例(3.1%)死于车祸。影响预后的主要因素有肝功能B或C级,多发肿瘤或肿瘤位于特殊部位以及消融后肿瘤是否残留。结论对于合并门静脉高压脾功能亢进的小肝癌,射频消融是一种安全有效的治疗方法,部分可获得较长期的生存效果。     

细胞内稳态S-腺苷甲硫氨酸浓度对人肝细胞生长因子促肝癌细胞增殖效应中的影响

目的 观察细胞内稳态S-腺苷甲硫氨酸(SAM)水平的变化对人肝细胞生长因子(HGF)促肝癌细胞增殖效应的影响.方法 采用pGCSIL-GFP-MAT2AsiRNA重组质粒转染HepG2细胞升高细胞内SAM浓度,SAM竞争抑制剂C3-Ado降低SAM浓度,用RP-HPLC验证不同SAM浓度的细胞体系,并用噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞术(FCM)检测各细胞体系中的HGF促增殖效应.结果 HGF处理的HepG2细胞转染重组质粒后细胞内SAM浓度升高至(1.35±0.06)nmol/mg蛋白质,细胞增殖活性降低,G0/G1期细胞增加23.42%,G2/M期细胞减少40.61%,细胞凋亡率34.58%;当加入C3-Ado,细胞内SAM浓度下降至(0.37±0.03)nmol/mg蛋白质,细胞增殖活性升高,G0/G1期细胞减少7.73%,G2/M期细胞增加18.18%,细胞凋亡率5.17%.结论 HGF在肝癌细胞中发挥促有丝分裂效应的必要条件是肝癌细胞内稳态SAM浓度处于较低水平.     

缺氧应激对HepG2细胞中甲硫氨酸腺苷转移酶2A基因表达的影响

目的 观察体外缺氧条件下肝癌细胞株HepG2中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和甲硫氨酸腺苷转移酶2A(MAT2A)的表达,探讨HIF-1α在低氧条件下对MAT2A基因表达的调控作用.方法 构建人MAT2A启动子真核表达载体质粒,CoCl2化学模拟肿瘤缺氧环境,检测缺氧条件下MAT2A启动子活性,HIF-1α和MAT2A在HepG细胞中的共定位、mRNA和蛋白水平的表达.以及小干扰RNA(siRNA)沉默HIF-1α后对MAT2A基因表达的影响.结果　缺氧24 h能使HepG2细胞活性增加到高峰(41.26±2.34),同时MAT2A基因的表达也较常氧时显著升高(P＜0.01),siRNA转染HepG2细胞后能显著下调HIF-1α蛋白表达(抑制率90%),并导致MAT2A基因的表达也受到明显抑制.结论　缺氧促使HepG2细胞中HIF-1α在蛋白水平表达升高,缺氧时HIF-1α能上调MAT2A基因的表达水平.

Abstract：

Objective To observe the expression of hypoixa inducible factor-1α (HIF-α) and methionine adenosyltransferase-2A (MAT2A) gene in HepG2 cells under hypoxia in vitro, and explore the regulation of MAT2A gene expression by HIF-1α. Methods Human MAT2A promoter eukaryotic expression vector was constructed. CoCl2 was used as a chemical hypoxia-inducible reagent to mimic tumor bypoxic microenvironment. MAT2A promoter activity, and mRNA and protein expression of HIF-α were detected in the HepG2 cells transfected with RNA interference (RNAi) originated by small interfering RNA (siRNA). The change of MAT2A gene expression was observed after HIF-1α gene silencing. Results Under hypoxia for 24 h, HepG2 cell activity was increased to (41.26 ± 2. 34 ), and the mRNA and protein expression levels of MAT2A were up-regulated (P ＜0. 01 ). After siRNA targeting, the HIF-1α was downregulated efficiently in HepG2 cells (inhibition ratio: 90% ), and MAT2A gene was down-regulated as well. Conclusion Hypoxia can increase protein level of HIF-1α in HepG2 cells, and HIF-1α up-regulates the gene expression of MAT2A.     

波形蛋白、E-钙黏蛋白在原发性肝癌上皮间质转化过程中的表达及其意义

目的 探讨波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)在原发性肝癌(HCC)的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学的方法(SP法)分别检测55例HCC癌组织、癌旁组织和20例非肿瘤性正常肝组织中Vimentin及E-cadherin的表达情况,分析它们与HCC临床病理学特征的关系及对患者预后的影响.结果 Vimentin在癌组织中阳性表达率为69.1％,较癌旁组织及正常肝组织表达明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.05).E-cadherin在癌组织中阳性表达率为27.3％,较癌旁组织及正常肝组织表达明显下降,差异具有统计学意义(P＜0.05).Vimentin、E-cadherin二者表达呈负相关关系(r=-0.653,P＜0.05).Vimentin在TNMⅢ～Ⅳ期组、低分化组、肿瘤结节多个组、转移复发组的表达分别高于TNM Ⅰ～Ⅱ期组(x2=7.267,P＜0.05)、中高分化组(x2=4.045,P＜0.05)、肿瘤结节单个组(x2=12.143,P＜0.05)、无转移复发组(x2=7.267,P＜0.05).E-cadherin的表达在肿瘤结节单个组高于肿瘤结节多个组,差异具有统计学意义(x2=6.878,P＜0.05).随访患者表明,Vimenfin阳性表达组患者无病生存率明显低于Vimentin阴性表达组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 Vimentin、E-cadherin参与HCC上皮间质转化过程,Vimentin的高表达、E-cadherin的低表达与HCC的发生、发展密切相关.检测HCC患者Vimentin及E-cadherin的表达水平可协助HCC的诊断及判断预后.     

乙肝病毒X蛋白对肝细胞癌甲硫氨酸腺苷转移酶1A表达的影响

目的 观察乙肝病毒X蛋白(HBx)对甲硫氨酸腺苷转移酶1A(MAT1A)、甲硫氨酸腺苷转移酶2A(MAT2A)表达的影响.方法 应用免疫组织化学法检测78例乙肝病毒(HBV)阳性肝细胞癌(HCC)组织及其癌旁组织中HBx和MAT1A、MAT2A的表达,分析其阳性表达,并分析它们对HCC临床病理参数的影响.结果在78例HCC组织中,HBx、MAT1A、MAT2A阳性表达分别为59例(75.64%)、17例(21.79%)和66例(84.62%);HBx表达和MAT1A表达呈负相关(P<0.05),和MAT2A表达呈正相关(P<0.05);MAT1A和MAT2A表达呈负相关(P<0.05).HBx阳性表达和TNM分期、病理分级、血清甲胎蛋白(AFP)正相关;MAT1A阳性表达和肝硬化程度、血清AFP含量呈负相关;MAT2A阳性表达和肝硬化程度、肿瘤大小、TNM分期呈正相关.结论 肝癌组织中HBx蛋白和MAT1A、MAT2A的表达明显相关,在HCC发生、发展过程中它可能通过影响MAT1A、MAT2A而实现MATs表达的转变.     

新辅助治疗联合盆腔脏器切除术治疗复发直肠癌

目的 探讨新辅助治疗联合盆腔脏器切除术对复发直肠癌的临床治疗价值。方法 对35例复发直肠癌患者,采用新辅助治疗方案。常规分次放疗,放疗总剂量（DT）46Gy,每周5次,每次2Gy。全身化疗2个疗程,每次予以奥沙利铂130mg／m^2,第1天静脉点滴;甲酰四氢叶酸钙（CF）200mg／m^2,第1～3天静脉点滴;氟脲嘧啶（5-Fu）500mg／m^2,第1～3天静脉点滴。治疗结束后4～6周进行盆腔脏器切除手术。结果 经新辅助治疗后,病理完全缓解6例,肿瘤平均缩小38．4％,65．7％的病例T期下降。全组无手术死亡,R0切除率为88．5％,手术并发症发生率为13．3％。本组总的3年生存率为82．8％;5年生存率为48．5％;其中获得R。切除的患者,3年生存率为90．3％,5年生存率为54．6%。结论 新辅助治疗联合盆腔脏器切除术是治疗复发直肠癌的有效方法。通过降低肿瘤病期,提高手术切除率,从而提高患者生存率。     

结构脂肪乳对消化道肿瘤患者术后蛋白质代谢和免疫功能的影响

目的:探讨结构脂肪乳对消化道肿瘤患者术后蛋白质代谢和免疫功能的影响。方法:将消化道肿瘤患者80例双盲、随机分为结构脂肪乳(ST)组和物理混合的中/长链脂肪乳(MCT/LCT)组。于术后第1-6天接受等氮等热量肠外营养。对比观察术后两组患者一般情况、血浆蛋白质水平、氮平衡、免疫功能状况。结果:在进行6 d的肠外营养以后,两组患者生命体征、血常规、肝肾功能、血脂和全身副反应均无显著性差异;术后第5天,ST组蛋白质水平恢复至术前水平,IgG、IgA、IgM和CD3、CD4下降不明显(P>0.05);MCT/LCT组术后第7天蛋白质水平才恢复至术前水平,IgG、IgM、CD3和CD4下降明显(P<0.05);术后第5天、第7天,MCT/LCT组前清蛋白、转铁蛋白、纤维连接蛋白浓度、IgG、IgM、CD3和CD4均显著低于受试组;ST组氮平衡明显优于MCT/LCT组。结论:结构脂肪乳由于具有很好的节氮效果,能有效地改善手术创伤病人的蛋白质代谢,将有利于消化道肿瘤患者术后免疫功能的恢复。     

激活的T细胞核因子家族在肝癌与癌旁组织中的差异表达

目的 观察30例患者肝癌与邻近癌旁组织中激活的T细胞核因子(NFAT)家族基因mRNA表达的差异,探讨NFAT基因在肝癌发生发展中的作用.方法 常规抽提30例患者肝癌组织与癌旁组织中的RNA,去除基因组DNA后反转录成cDNA,应用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测标本中NFAT家族基因mRNA表达.结果 NFAT1 mRNA ratio癌组织为0.003 034±0.002 162,癌旁组织为0.010 140±0.009 742;NFAT2 mRNA ratio癌组织为0.000 336±0.000 272,癌旁组织0.002 173±0.003 380;NFAT3 mRNA ratio癌组织为0.002 907±0.002 436,癌旁组织为0.006 427±0.004 502;NFAT4 mRNA ratio癌组织为0.004 198±0.004 787,癌旁组织为0.012 370±0.010 890;NFAT5 mRNA ratio癌组织为0.079 060±0.247 600,癌旁组织为0.282 100±0.686 900;5种NFAT家族基因mRNA水平癌组织均较癌旁组织低(P＜0.01).结论 NFAT家族5种基因的mRNA水平癌组织较癌旁组织中均降低,可能与肝癌的发生发展有关.