软骨修复组织蛋白多糖代谢与一氧化氮合酶抑制剂的影响

目的:应用一氧化氮合酶抑制剂可改善骨性关节炎和风湿性关节炎软骨的代谢,作者前期的实验也证明一氧化氮合酶抑制剂能提高软骨修复组织的质量。实验进一步观察一氧化氮合酶抑制剂对软骨修复组织蛋白多糖代谢的影响。方法:实验于1999-06/2002-02在南方医科大学完成。①实验分组:取雄性新西兰兔24只,8月龄,体质量(2.5±0.2)kg。随机抽签法分为对照组、骨形态发生蛋白组和S-甲基异硫脲组,每组8只。②实验方法:将大白兔双侧股骨髁间关节面造成全层软骨缺损,对照组:软骨缺损不充填任何物质;骨形态发生蛋白组:缺损用骨形态发生蛋白纤维蛋白凝胶复合物充填;S-甲基异硫脲组:缺损应用胶原复合骨形态发生蛋白充填,术后按5mg/(kg·12h)皮下注射S-甲基异硫脲。术后1年麻醉后处死动物。③实验评估:应用组织切片番红O-快绿染色和图像分析技术,按照染色百分率、平均灰度(平均染色程度)和染色厚度(软骨厚度)指标来检测糖胺聚糖含量;应用Na235SO4掺入法检测软骨修复组织蛋白多糖合成。结果:纳入新西兰兔24只,均进入结果分析。①术后1年,对照组几乎无红色染色区域;骨形态发生蛋白组可见到少量的不均匀红色区域;S-甲基异硫脲组可见到较多均匀一致的红色染色区域。②S-甲基异硫脲组软骨修复组织番红O染色百分率为89.28%,明显高于骨形态发生蛋白组36.54%和对照组13.4%,S-甲基异硫脲组修复组织番红O-快绿染色平均灰度值134.5,分别为骨形态发生蛋白组平均灰度值56.8的2.5倍,为对照组26.4的7倍。软骨平均厚度S-甲基异硫脲组1.75cm分别为骨形态发生蛋白组0.76cm和对照组0.25cm的2倍和6倍。③Na235SO4掺入法结果显示,S-甲基异硫脲组[35S]摄入量明显高于骨形态发生蛋白组和对照组(P<0.01)。结论:诱导型一氧化氮合酶抑制剂S-甲基异硫脲的应用能明显增加软骨修复组织糖胺聚糖含量和蛋白多糖合成,对于软骨修复质量的提高有积极意义。     

尿酸对认知功能的影响

正随着人口老龄化问题越来越明显,老年人认知功能障碍问题也越来越突出,其给家庭和社会造成极大的负担。阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)及血管性认知功能障碍(vascular cognitive impairment,VCI)是造成老年人认知功能障碍的两大主要原因,帕金森病(Parkinson’s disease,PD)早期亦可出现认知功能障碍~[1,2]。一些研究发现氧化应激~[3~5]     

异基因外周血干细胞移植供受者嵌合体形成的动态检测

目的：建立荧光标记的多重扩增短串联重复序列（STR）结合毛细管电泳定量检测异基因外周血干细胞移植（allo-PBSCT）供受者嵌合体的方法,并探讨嵌合体形成与免疫耐受及临床预后的关系。方法：采用PE9700扩增仪扩增15个STR位点：D8S1179、D21S11、D7S820、D3S1358、CSFIPO、TH01、D13S317、D16S539、D2S1338、D19S433、VwA、TPOX、D18S51、D5s818、FGA位点和1个性别位点Amelogenin,应用3130XL型DNA测序仪对35例异基因外周血干细胞移植患者上述位点进行基因型分析,并比较供受者移植前后的基因型,确定嵌合体的形成类型,以作为异基因造血干细胞移植中的植活证据,同时用无关个体的DNA混合实验进行可行性和准确性研究。结果：（1）其中32例在15个STR位点中均至少有两个可以区分供受者的有信息位点（有3例无移植前受者标本）,35例患者均在移植后1个月时STR位点及性别位点转为供者型,形成了完全供者嵌合体（CC）,且HLA单倍体相合的15例患者也达到了100％的供者植入,并在随访过程中持久不变。（2）扩增产物中供受者DNA含量的百分比同扩增前混合样本的比例呈显著直线相关（P〈0．01）,最小检出DNA百分比为5％。结论：（1）用基因分析仪对STR位点进行基因型检测具有快速、无污染和自动化高、可定量及灵敏度高等优点,用于检测allo—PBSCT植活状态是可靠的。（2）诱导免疫耐受的方法可以成功地诱导CC的形成。     

他克莫司治疗局灶节段性肾小球硬化一例

患者：男性,23岁,因“反复浮肿10个月,复发1个月”于2009年4月1日入院。10个月前患者无诱因出现四肢水肿,活动后明显。尿量减少。外院查尿常规：尿蛋白（＋＋＋＋）,诊断为肾病综合征,予泼尼松60mg／d”,利尿等治疗,8周后病情无好转。     

重组人脑利钠肽改善大鼠急性心肌梗死后心功能的实验研究

目的观察重组人脑利钠肽能否改善大鼠急性心肌梗死后的心功能。方法应用开胸结扎的方法制备大鼠急性心肌梗死模型,将制备成功的模型随机分为二组,I组为重组人脑利钠肽组（n=20）,每只大鼠按0．01μg／kg·min^-1持续泵人重组人脑利钠肽24h,Ⅱ组为对照组（n=20）,每只大鼠泵入同等剂量的生理盐水持续24h,而后正常饲养大鼠。在急性心肌梗死6周后采用超声心动图检查各组大鼠的心脏功能,记录结果并进行统计分析以观察两组间是否有差异。结果重组人脑利钠肽组大鼠的各项超声指标均优于对照组。结论重组人脑利钠肽可改善大鼠急性心肌梗死后的心脏功能。     

负载肺癌全抗原的自体树突状细胞诱导T细胞反应的体外研究

目的在体外研究负载肺癌全抗原的自体树突状细胞(DCs)诱导的T细胞增殖及细胞毒作用。方法肺癌组织、正常肺组织和外周血新鲜标本均取自肺鳞状细胞癌并行手术治疗的7例患者,肺癌组织和正常肺组织制备为单细胞悬液。自外周血分离单核细胞并诱导DCs,尼龙毛柱法分离T细胞。冻融法制备自体肺癌细胞裂解液,并刺激DCs,制备负载自体肺癌全抗原的DCs。MTS法检测负载肺癌全抗原的DCs对T细胞增殖的影响;流式细胞术测定DCs表型及负载肺癌全抗原的DCs对T细胞细胞毒作用的影响。结果外周血单核细胞经GM-CSF、IL-4和TNF-α诱导培养后,在细胞膜上出现大量的树突状突起,表面分子CD14表达显著降低(t=20.157,P<0.01),CD1a、CD11c、CD80、CD83和HLA-DR表达明显增加(t=8.927,3.042,14.311,18.537,5.612,P<0.05,P<0.01),获得负载肺癌全抗原的成熟DCs;其能刺激自体T细胞增殖,不同患者刺激指数不同为6.98~39.15(21.56±4.38),而且DC/T比率越高,刺激指数越高,T细胞增殖反应能力越强(t=31.203,19.550,P<0.01);负载肺癌细胞全抗原的DCs能诱导自体T细胞的细胞毒作用,且T细胞对自体肿瘤细胞的杀伤率为(56.52±2.75)%;对正常细胞的杀伤率平均为(5.31±1.37)%,明显低于对自体肿瘤细胞杀伤率(t=16.429,P<0.01)。对K562细胞杀伤率为(9.71±2.46)%,明显低于对自体肿瘤细胞杀伤率(t=25.010,P<0.01)。结论负载肺癌全抗原的DCs能诱导肺癌患者自体T细胞增殖及细胞毒作用,且体外可有力的杀伤肿瘤细胞,而几乎不杀伤正常细胞。     

探讨延伸护理可改善老年高血压患者治疗的依从性

目的：探讨延伸护理对改善老年高血压患者治疗依从性的效果。方法选取118例老年高血压患者作为研究对象,按照随机分配的方式将其分为对照组和观察组,各59例。对照组患者在出院后不进行护理干预,观察组患者在出院后进行为期6个月的延伸护理。在患者出院时、出院后的第6个月对患者的血压情况进行监测,观察对照组患者和观察组患者出院后第3个月和第6个月的治疗依从性。结果与对照组相比,观察组患者遵医嘱的情况较好,患者的治疗依从性明显高于对照组（P<0.05）。观察组患者的舒张压和收缩压均明显低于对照组（P<0.05）,血压控制情况明显优于对照组（P<0.05）。结论对老年高血压患者出院后进行延伸护理,能够提高患者的治疗依从性,使患者血压控制稳定水平。     

空肠弯曲菌在小鼠体内的粘附和定居

空肠弯曲菌(Campylobactcr jcjuni)是引起人类,特别是婴幼儿腹泻的重要病原菌,其发病机制尚不明了。我们用体内菌落形成单位(体内CFU法)研究了空肠弯曲菌在小鼠体内的粘附和定居,并应用扫描电镜对空肠弯曲菌在小鼠体内的粘附和定居进行了深入的形态学研究。体内CFU法结果提示:空肠弯曲菌CJ-S131有粘附于小鼠肠粘膜上皮细胞并在肠道定居繁殖的能力。扫描电镜观察证实这一结果。哺乳组各肠段和断乳组有相似的粘附曲线和粘附梯度。粘附指数(AI)在感染后24小时最高,结肠AI>回肠AI>空肠AI。哺乳组AI高于断乳组AI,两组AI值的主要     

血管化组织工程骨修复猕猴胫骨缺损模型的建立及初步观察

目的通过对猕猴的解剖和实验,初步建立一种可行的利用血管化组织工程骨修复猕猴胫骨段性缺损的动物模型。方法对一只自然死亡的猕猴进行新鲜解剖,观察其胫骨的形态及周围知名血管束的解剖路径;将10只猕猴双侧胫骨(共20处)制成中段20mm骨-骨膜缺损模型,随机平均分成2组,实验组在缺损处填塞由骨髓基质干细胞(BMSCs)和具有特殊外型(侧槽和中空管)的β-磷酸三钙(β-TCP)支架体外构建的复合物,在中空管内移入隐动、静脉的一段,组织工程骨外被带蒂深筋膜;对照组只填塞组织工程骨。另取2只猕猴的无填充物胫骨缺损作对照。钢板螺钉固定。在4、8、12周时间点分别行放射线检测,墨汁灌注标本,组织学检测及标本大体观察。结果各时间点上,实验组在成骨、血管化程度及材料吸收方面明显优于对照组。未填充任何材料的缺损无愈合。各组猕猴术后一般表现无差异;术前、术后表现无明显变化。结论本组实验所建立的猕猴胫骨段性缺损修复模型及组织工程骨血管化方法是有效的、可行的,为组织工程骨的临床应用提供参考。