SYBR%GreenⅠ实时荧光PCR 在染色体常见非整倍体诊断中的应用

目的探讨SYBRGreenⅠ实时荧光PCR技术用于非整倍体诊断的可行性。方法选择13号染色体上的ABCC4基因、18号染色体上的TYMS基因、21号染色体上的DSCR3基因、X染色体上的HPRT2基因和Y染色体上的SRY基因为目的基因,以12号染色体上的管家基因GAPDH为参照基因,选取SYBRGreenⅠ作为荧光染料,采用双标准曲线相对定量PCR法进行检测,并与核型分析结果进行比对。结果检测13号染色体时,计算目的基因与参照基因比值,正常标本组(0.90±0.31)与三体标本组(1.39±0.12)的差别有显著意义(P=0.003);检测18号染色体时,正常标本组(1.07±0.44)与三体标本组(1.66±0.12)的差别有显著意义(P=0.000);检测21号染色体时,正常标本组(0.84±0.27)与三体标本组(1.73±0.54)的差别有显著意义(P=0.000);检测X染色体时,45,X组(0.62±0.12)与46,XY组(0.63±0.25)比值无差别(P=0.965),46,XX组(1.32±0.37)与47,XXY组(1.20±0.35)比值无差别(P=0.326),单个拷贝X(包括45,...     

B超引导微创经皮肾穿刺治疗上尿路结石

目的 探讨B超引导微创经皮肾穿刺输尿管镜取石术（mPCNL）治疗上尿路结石疗效.方法 回顾分析31例上尿路结石采用mPCNL的临床资料.结果 本组31例一次碎石成功29例,成功率为95.49%,取净结石为22例,70.96%,一期取石28例,二期取石3例,手术平均时间140min,出血量约20～350mL,平均90mL,术中输血2例,留置肾造瘘管5～7 d,留置D-J管4周.结论 mPCNL具有创伤小,出血少,恢复快,并发症少,结石清除率高的优点,是微创治疗上尿路结石的首选治疗方法,值得推广.     

耐甲氧西林葡萄球菌荧光定量PCR检测方法的实验研究

目的建立一种简便、特异的mecA基因荧光定量PCR检测方法，用于耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的快速鉴定。方法以煮沸法快速制备DNA模板，采用SYBRGreenI随机参入法，建立mecA基因的实时荧光定量PCR检测体系。并对检测体系的敏感性、特异性和灵敏度进行评价。结果本法对纯菌落的检测敏感性和特异性分别为98．5％和96．9％，检测灵敏度可达10^1CFU／ml，最小检菌量约为3个菌／反应体系。结论本实验所设计的荧光定量PCR方法用于MRS的检测具有快捷、高敏感性、高特异性和高灵敏度的特点。适用于MRS的快速检测。     

彩色多普勒超声联合X线引导下经皮肾穿刺取石术治疗无积水鹿角形结石

目的 探讨彩色多普勒超声(彩超)联合X线引导经皮肾穿刺取石术治疗代偿肾无积水鹿角形结石的临床应用价值.方法 64例代偿肾无积水鹿角形结石患者在彩超联合X线引导下建立经皮肾穿刺通道,行微创经皮肾镜碎石取石术,并对其疗效进行分析.结果 64例均穿刺成功,54例无结石残留,总净石率为84.4%.由于64例患者彩超和X线配合使用,避免了出血和毗邻脏器损伤等并发症,患者肾功能保护良好,同时减少了放射性损伤.结论 在微创经皮肾穿刺取石术治疗代偿肾无积水鹿角形结石时,彩超联合X线引导进行经皮肾穿刺点的定位和通道的建立,可明显减少放射性损伤,穿刺成功率高,安全性高,疗效满意,有很高的临床应用价值.     

广州地区非综合征性耳聋患者耳聋相关基因突变分析

目的分析广州地区非综合性耳聋患者相关耳聋基因突变,初步了解广州地区耳聋患者发病的分子机制。方法详细询问病史和临床检查后,收集广州地区52例非综合性耳聋患者的外周血,提取基因组DNA,用遗传性耳聋基因芯片对4个常见耳聋相关基因(GJB2、SLC26A4、线粒体12SrRNA及GJB3基因)的9个位点进行检测。结果 52例耳聋患者中共检出18例带有耳聋基因突变,检出阳性率为34.6%,其中GJB2基因235delC纯合突变6例,杂合突变2例,299delAT纯合突变1例;SLC26A4基因IVS7-2A>G纯合突变4例,杂合突变1例;线粒体12SrRNA A1555G均质突变4例。结论广州地区非综合性耳聋患者的耳聋相关基因检出阳性率、GJB2基因及SLC26A4基因的携带率均低于全国平均水平,而线粒体基因突变的携带率明显高于全国平均水平。     

中药汤剂配合碎石术、西药辅助治疗泌尿结石对照观察

[目的]观察中药汤剂配合碎石术、西药辅助治疗泌尿结石的临床疗效。[方法]选取2010年至2012年3月我院收治的泌尿结石患者40例,随机分成两组,治疗组(n=20)和对照组(n=20),治疗组采用中西药物配合体外震波碎石术治疗,对照组仅采用西药配合体外震波碎石术治疗,观察两组患者治疗效果,术后并发症改善情况。[结果]治疗组总有效率(95.00%)明显高于对照组(65.00%),χ2=16.154,P<0.01,差异有显著统计学意义。[结论]中药汤剂配合碎石术、西药辅助治疗泌尿结石的临床疗效明显,中西药配合使用能有效改善碎石后的并发症,是值得临床大力推广应用的。     

腹腔镜下膀胱全切除术后回肠代膀胱术的临床应用

目的探讨腹腔镜下膀胱全切除术后回肠代膀胱术的临床价值。方法回顾性分析我院2007年6月—2012年2月腹腔镜下行膀胱全切除术后回肠代膀胱术40例患者临床资料,分析该术式的临床疗效并随访1个月和6个月,观察其对患者排尿功能的影响。结果平均手术时间为(5.27±1.05)h,平均出血量(552.8±74.3)ml;术后1个月,所有患者代膀胱充盈良好,早期均有尿失禁;6个月后患者日间控尿良好率92.5%(37/40),夜间控尿良好率为80%(32/40),3例仍有尿失禁,平均残尿量(48.3±5.1)ml,另1例出现膀胱结石和出血。结论腹腔镜下膀胱全切除术后回肠代膀胱术的临床疗效满意,手术创伤小、术后患者控尿良好,显著改善了患者的生活质量。     

钬激光前列腺剜除术与前列腺汽化电切术治疗良性前列腺增生的疗效比较

目的 比较经尿道前列腺汽化电切术与经尿道钬激光前列腺剜除术治疗前列腺增生症 的疗效。 方法 将160例前列腺增生症( benign prostatic hyperplasia,BPH)患者随机分为两组,每组80例,分别用 TUVP 及HoLEP 治疗 。比较两种术式 的手术时间、手术出血量、 膀胱冲洗时间 、住院时间、并发症及近期疗效等指标 。结果 两组患者术后国际前列腺症状评分 （IPSS）、生活质量评分（ QOL）、最大尿流率和残余尿量均较术前明显改善,但两组上述指标间比较差异无显著性差异 。HoLEP组术中出血量、术后膀胱冲洗时间、住院时间明显短于TUVP组;并发症发 生率低于TUVP组。 结论 TUVP 及HoLEP 治疗前列腺增生症均有效;HoLEP的手术安全性优于TUVP。     

龙葵素通过诱导细胞周期G1/S阻滞抑制裸鼠前列腺癌细胞Du145移植瘤生长

目的探讨龙葵素对前列腺癌细胞Du145 裸鼠移植瘤生长的影响及分子机制。方法采用高度恶性的转移前列腺癌 细胞株Du145 作为动物体内实验的模型,裸鼠皮下接种Du145 细胞建立裸鼠皮下瘤模型。1 周后将接种的裸鼠随机分为2 组：龙葵素实验组和生理盐水空白对照组,每3 d 分别向实体瘤中间部位注射0.2 mL龙葵素（50 μg/mL）和生理盐水,观察裸 鼠体内肿瘤生长,3 周后颈椎脱臼处死裸鼠,剥离肿瘤组织,测量肿瘤的重量并根据肿瘤重量计算抑瘤率。实时荧光定量 PCR和Western blotting 技术检测各组裸鼠瘤体细胞周期相关基因mRNA和蛋白表达。Tunel 原位检测各组裸鼠瘤体组织凋 亡情况。结果龙葵素治疗组裸鼠肿瘤成瘤率明显下降,裸鼠瘤体生长速度明显低于对照组（P<0.01）。龙葵素能抑制瘤体 细胞CyclinD1、CyclinE1、CDK2、CDK4 和CDK6 基因mRNA和蛋白的表达,显著升高p21 基因mRNA和蛋白的表达,龙葵素 干预后裸鼠瘤体组织凋亡显著增加（P<0.01）。结论龙葵素可通过调控细胞周期G1/S 关卡促进组织细胞凋亡抑制前列腺 癌细胞裸鼠移植瘤生长。