AD7C-NTP基因的染色体定位及其产物的跨膜区预测

目的 :对AD7C NTP基因进行染色体定位 ,预测其编码产物的跨膜区。方法 :用Blat服务器进行AD7C NTPmRNA序列与基因组DNA序列的比对。借助PHDhtm、TMHMM2 .0、HMM TOP2 .0、SMART和PSORT等服务器 ,预测AD7C NTP基因编码产物的跨膜特征及其亚细胞定位。结果 :AD7C NTP基因定位于 1p36 .11负链 ,无内含子序列。AD7C NTP基因编码产物具有 3个跨膜区 ,可能定位于过氧化物酶体。结论 :对AD7C NTP基因及其产物的生物信息学分析为后续的基因克隆及功能研究提供了有益的线索     

加味补阳还五颗粒对脑梗死大鼠HMGB1/RAGE信号通路的影响

目的观察加味补阳还五颗粒对脑梗死大鼠HMGB1/RAGE信号通路的影响。方法将健康雄性SD大鼠90只,按体质量用数字表法随机分为正常组、假手术组、模型组、加味补阳还五颗粒低剂量组、加味补阳还五颗粒中剂量组、加味补阳还五颗粒高剂量组、HMGB1抑制剂组、RAGE阻断剂组、阳性药物组各10只。分别取大鼠梗死区脑组织和血清。ELASA法检测血清中HMGB1和RAGE水平;Western blotting法分析脑组织中HMGB1表达水平。结果中等剂量的加味补阳还五颗粒可降低梗死区脑组织中HMGB1表达水平,可降低脑梗死大鼠血清中HMGB1和RAGE的含量。结论加味补阳还五颗粒可能通过影响脑梗死大鼠HMGB1/RAGE信号通路而发挥脑保护作用。中等剂量的加味补阳还五颗粒,折合人体剂量后每味药剂量如下:黄芪30 g,当归10 g,川芎6 g,赤芍10 g,丹参10 g,地龙10 g,茯苓10 g,陈皮6 g,杜仲10 g,天麻10 g。成人每日1剂,分两次服用。     

MALDI-TOF MS在鲍曼不动杆菌同源性分析中的临床应用评估

目的 评估基质辅助激光解析电离飞行质谱(MALDI-TOF MS)分析鲍曼不动杆菌(AB)同源性的临床应用价值。 方法 剔除同一患者或环境多次送检标本中的重复菌株, 收集某三甲综合医院2020年5月—2021年2月神经内科重症监护病房(ICU)住院患者痰标本及环境标本分离的46株AB, 使用VITEK-MS质谱仪检测菌株, 应用SARAMIS Premium软件进行聚类分析, 并采用多位点序列分型(MLST)的方法进行验证。 结果 通过MALDI-TOF MS和MLST聚类分析和比较, 46株AB中, 39株为MALDI-TOF MS的MS-a型, 其中, 22株为MLST的MT-A簇, 包括ST208型3株, ST540型3株, ST195型8株, ST369型5株, 以及ST136、ST436、ST1893型各1株; 16株为MT-B簇, 包括ST381型4株、ST469型11株和ST938型1株; 1株为MT-C簇(ST1821);MS-b型1株为ST381;MS-c型2株为ST369;MS-d型1株为ST195;MS-e型2株分别为ST540、ST369;MS-f型1株为STN1。 结论 作为AB同源性分析工具, MALDI-TOF MS具有一定的局限性, 其菌株同源性分析结果与MLST结果一致性低, 分辨特异性低, 不可取代MLST技术。     

RNAi抑制Survivin基因表达对乳腺癌SKBr-3细胞放射敏感性影响的研究

目的:研究利用RNA干扰抑制Survivin基因的表达对人乳腺癌SKBr-3细胞放射敏感性的影响。方法:构建针对Sur-vivin基因的RNA干扰真核表达载体pSU-PER-S1并转染SKBr-3细胞,分别用RT-PCR和蛋白质印迹法检测Survivin mR-NA和蛋白表达水平的变化;流式细胞仪检测细胞周期;平板克隆形成实验计算细胞存活率,用单击多靶数学模型进行曲线拟合做图,求曲线参数D0、Dq和N值,比较细胞放射敏感性变化。结果:RT-PCR和蛋白质印迹法检测结果表明,pSUPER-S1转染后的SKBr-3细胞中Survivin mRNA和蛋白水平显著下降;流式细胞仪检测结果显示,转染后的SKBr-3细胞G1期阻滞明显〔(74.03±8.91)%〕,高于对照组〔(44.21±12.03)%〕,S期细胞数减少〔(17.11±4.96)%〕,低于对照组〔(43.12±8.64)%〕,P<0.05;经不同剂量γ射线照射后的细胞存活曲线拟合作图后发现,转染后的细胞D0、N和Dq值均下降(D0=1.29,N=4.9,Dq=2.6),与对照组相比(D0=1.56,N=14.85,Dq=5.21)差异有统计学意义(P<0.05),提示细胞放射增敏感性增加。结论:利用RNA干扰技术抑制Survivin基因在乳腺癌SKBr-3细胞中的表达可以增加其对放疗的敏感性。     

老年股骨颈骨折人工髋关节置换术的护理体会

我国已步入老龄化社会,老年人因跌倒等原因而致股骨颈骨折的发生率呈上升趋势,为避免患者长期卧床,提高患者的生存质量,常行人工髋关节置换术。2009年1月—2011年5月,我院收治老年股骨颈骨折行人工髋关节置换术患者34例,经过精心护理,在术后并发症的预防、患肢功能恢复以及患者生活质量的提高方面均取得了良好的效果,现将护理体会总结如     

伯泰血培养瓶对细菌培养生长能力和敏感性分析

目的用已知细菌检测伯泰血培养瓶细菌培养生长能力。方法将已知细菌稀释成不同浓度,定量加入伯泰血培养瓶,观察细菌生长情况。结果需氧瓶对需氧菌的阳性检测率为100％,检测敏感性为10CFU／ml;厌氧瓶对厌氧菌的阳性检测率为100％,对黑色消化球菌、厌氧消化链球菌和脆弱类杆菌的检测敏感性分别为10CFU／ml、100CFU／ml和1000CFU／ml;厌氧瓶对兼性厌氧菌的阳性检测率为100％,检测敏感性为10CFU／ml。结论伯泰血培养瓶对需氧菌、厌氧菌及兼性厌氧菌的检测能力可以满足临床要求。     

结核分枝杆菌Rv0867c基因的克隆表达及其纯化

目的构建结核分枝杆菌Rv0867c基因的原核表达质粒,获得结核分枝杆菌Rv0867c基因的表达蛋白。方法制备结核分枝杆菌基因组DNA,采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增目的基因片段;通过克隆载体pUC19构建质粒载体pUC19-Rv0867c,经序列测定证实正确,双酶切后连接于表达载体pPRO-EXHT,转化入大肠杆菌DH5α中,再经IPTG诱导表达带His标签的Rv0867c融合蛋白;用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白的相对分子质量大小及表达形式。结果成功扩增出了结核分枝杆菌Rv0867c基因,构建了具有正确基因序列的表达载体pPRO-EXHT-Rv0867c,转化入大肠杆菌DH5α中,经诱导产生高水平的表达产物。经SDS分析,在80 kD处出现新生蛋白带,凝胶薄层扫描检测表达量约占菌体蛋白的23.7%。该融合蛋白以包涵体的形式存在,用Ni²⁺-NTA纯化柱在变性条件下进行纯化。结论成功克隆了结核分枝杆菌Rv0867c基因并得到了其大肠杆菌表达产物,为进一步研究Rv0867c基因蛋白的活性及其功能,以及结核分枝杆菌快速促生长作用奠定了基础。     

结核性脑膜炎临床分离株基因型和耐药表型的特征分析

目的 了解导致结核性脑膜炎(TBM)的致病菌在基因型和耐药表型方面的特征。 方法 利用间隔区寡核苷酸分型法(Spoligotyping)和数目可变串联重复序列 (VNTR)分型法对25株TBM临床分离菌株进行基因分型;采用MGIT（mycobacteria growth indicator tube）960液体和比例法固体药敏试验分别对所选15种药物：异烟肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)、吡嗪酰胺(PZA)、链霉素（S）、卡那霉素(Km)、阿米卡星(Am)、卷曲霉素(Cm)、莫西沙星(Mfx)、氧氟沙星（Ofx）、左氧氟沙星(Lfx)、对氨基水杨酸(PAS)、乙硫异烟胺（Eto）、丙硫异烟胺(Pto)、环丝氨酸(Cs)进行药敏实验。 结果Spoligotyping分型法确定了在25株TBM临床分离株中有20株为北京基因型,占80.0%（20/25）,２株为T1基因型,另外3株分别为T2型、LAM6型及未知型;VNTR有2株成一簇,基因型一样;25株TBM分离株中耐多药结核性脑膜炎（MDR-TBM）占12.0%（3/25）,广泛耐药结核性脑膜炎（XDR-TBM）占4.0%(1/25),耐氟喹诺酮类的菌株占8.0%(2/25),都属于北京基因型;任意耐药的菌株占48.0%(12/25),其中83.3%（10/12）为北京基因型;全敏感者占52.0%(13/25),其中76.9%(10/13)为北京基因型。 结论北京基因型在耐药TBM中所占比例很高,尤其是MDR-TBM,较其他基因型更易引起脑脊液生化的改变;耐氟喹诺酮类的菌株所占比例最少,提示临床上氟喹诺酮类药物对治疗TBM会有很好的疗效。     

A20在前列腺癌细胞中的表达

目的:探讨A20(肿瘤坏死因子可诱导的初级应答基因)在前列腺癌各细胞系中的表达及意义。方法:RT-PCR检测体外培养的前列腺癌细胞PC-3,PC-3M,Du145,LNcap和22RV1中A20 mRNA的表达,Western blot检测A20蛋白质(锌指蛋白A20)的表达。结果:RT-PCR和Western blot检测显示A20在前列腺癌5种细胞系中均表达,但表达水平有差别,在PC-3和PC-3M细胞中A20在mRNA和蛋白质表达水平均显著高于其余3种细胞系(P<0.01)。结论:A20在各前列腺癌细胞系中的表达不尽相同,对A20表达的研究对于下一步研究该基因在前列腺癌发生发展中的作用有重要意义。     

羧肽酶A1全酶及其肽段的分泌表达及活性测定

抗体导向酶一前体药物疗法(antibody-directed enzyme prodrug therapy,ADEPT)自1987年由Bagshawe等提出以来,其研究受到广泛关注[1-2].