大鼠胸部撞击伤肺损伤模型的建立

目的 建立大鼠胸部撞击伤肺损伤模型。方法 采用小型多功能生物撞击机,以250kPa、350kPa、400kPa、500kPa驱动压力使撞击弹头对大鼠右侧胸部致伤,形成肺损伤。结果 肺损伤程度与驱动压力大小明显相关,其中400kPa驱动压力可以造成重度肺损伤,并在对侧形成继发性肺部损伤,而500kPa组早期死亡率高达80％。结论 用小型多功能生物撞击机以400kPa驱动压力可以复制出较标准 的大鼠重度肺损伤模型,且操作比较简便,模型可靠,重复性好, 适合研究选用。     

重庆主城区346例颅脑交通伤流行病学特点及临床救治分析

目的探讨重庆主城区颅脑交通伤的流行病学特点。方法回顾性分析我院近4年来收治的主城区颅脑交通伤346例的临床资料。结果本组青壮年构成了伤员的主体,职业以农民工为主;约半数事故为汽车撞行人（46．53％）;颅脑伤以颅骨骨折、颅内血肿和脑挫裂伤为主,重度伤多见于汽车驾驶员、摩托车手和行人;伤后1小时内得到救治者的死亡率1．97％（3／152）,伤后〉1小时得到救治者死亡率9．28％（18／194）,两者相比差异显著。结论汽车撞行人是重庆主城区交通事故的主要致伤方式,行人伤员多,1／3为颅脑重度伤,其原因与主城区人口密集、公路窄、弯道多、交通拥挤、行人违章乱穿马路等有关。     

缺血缺氧及再灌注后海马神经元损伤的时间窗特性

目的：探讨缺血缺氧及再灌注损伤后大鼠海马神经元在伤后不同时间的凋亡及死亡特性，阐明神经元损伤发生的时间窗特征。方法：实验于2004—05／06在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所进行。体外培养胚胎大鼠海马神经元，模拟临床缺血过程致神经元缺氧损伤，采用Annexin V联合PI标记和流式细胞检测技术观察伤后不同时间点的凋亡与死亡情况。结果：海马神经元缺氧损伤后，其细胞损伤的形式为凋亡和坏死同时存在；模拟缺血15，30min，1．0，1．5，2．0，2．5和3．0h，其坏死率分别为(1．37&;#177;0．12)％，(3．71&;#177;0．34)％，(16．47&;#177;1．27)％，(18．73&;#177;2．02)％，(19．77&;#177;2．32)％，(22．13&;#177;2．12)％和(28．78&;#177;2．69)％，相互间差异有显著性意义(P&;lt;0．05)，各时间点的凋亡率分别为(6．23&;#177;1．67)％，(6．56&;#177;2．38)％，(6．73&;#177;2．42)％，(6．95&;#177;1．89)％，(7．16&;#177;2．82)％，(6．93&;#177;2．56)％和(7．23&;#177;2．89)％，凋亡率无明显变化(P&;gt;0．05)。各时间点再恢复糖和氧供应后至24h，海马神经元存活率进一步明显下降，坏死率进一步增多，各时间点神经元坏死率分别为(6．98&;#177;1．23)％，(8．46&;#177;1．37)％，(17．68&;#177;2．97)％，(20．79&;#177;3．16)％，(21．67&;#177;3．05)％，(35．53&;#177;3．33)％和(50．22&;#177;4．19)％，差异亦有显著性意义(P&;lt;0．05)；凋亡率亦逐渐增多，模拟缺血15，30min，1．0，1．5和2．0h时间点的再灌注24h，其神经元凋亡率分别为(11．89&;#177;2．06)％，(14．92&;#177;2．64)％，(28．67&;#177;3．05)％，(44．67&;#177;3．78)％和(61．67&;#177;4．89)％，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)，但模拟缺血2．5h和3．0h时间点再灌注24h的神经元凋亡率为(27．76&;#177;3．15)％和(12．67&;#177;2．27)％，其凋亡率反而显示明显下降。结论：凋亡是延迟性神经元死亡的重要通路，脑缺血缺氧的干预治疗时间窗可以提前至2h内。     

实验性冲击波负压暴露后豚鼠耳蜗基底膜AChE和SDH活性的变化

目的 探讨冲击波负压（BUP）暴露对豚鼠耳蜗基底膜乙酰胆碱酯酶（AChE）和琥珀酸脱氢酶（SDH）活性的影响。方法 中等强度BUP重复暴露3次后2h～3d检测豚鼠听性脑干反应（ABR）阈值，然后处死并应用酶组织化学技术观察其耳蜗基底膜两种酶的活性产物的变化。结果 负压峰值为-44．5kPa～-48．8kPa的BUP暴露后2h，耳蜗基底膜外毛细胞下神经末梢区域AChE活性产物明显减少，在负压暴露后24h和3d时有所恢复，但仍低于正常对照组。基底膜SDH活性下降主要发生于外毛细胞，且以第二转第三排最为明显；BUP暴露后2h活性下降幅度最大，至24h和3d时有所恢复。上述两种酶活性产物的变化，与动物的ABR阈移幅度变化是一致的。结论 BUP暴露后豚鼠耳蜗基底膜的AChE和SDH活性有不同程度的下降，这可能是造成BUP暴露后听力损失的一个主要原因。     

The dynamic response of heart and its injury involving chest impact

ＣＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＳｕｒｇｅｒｙ，ＤａｐｉｎｇＨｏｓｐｉｔａｌ，ＴｈｉｒｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０００４２，Ｃｈｉｎａ（ＬｉｕＢＳ，ＷａｎｇＺＧ，ＷｅｎｇＧＷ，ＹａｎｇＺＨ，Ｌ...     

下调PTEN基因对缺氧损伤后海马神经元NR2B受体调控机制研究

目的:探讨用RNAi干扰技术下调第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(Phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)对缺氧损伤引起的神经元NR2B受体表达调控机制.方法:建立海马神经元培养缺氧缺糖(Oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤模型,转染shRNAspten-GFP质粒,采用细胞比色分析(Colorimetric assay)法观察神经元膜表面NR2B含量,RT-PCR测定NR2B受体的mRNA的表达,采用Fura 2-AM法测定胞内Ca2+浓度,AlamarBlue进行神经元活力分析.结果:shRNAspten-GFP能成功转染到神经元中;细胞比色法显示神经元膜表面有大量NR2B表达,与PshGFP对照组相比shRNAspten治疗组NR2B含量明显降低(P＞0.05),RT-PCR测定结果与细胞比色法结果基本一致;OGD损伤组比正常组胞内Ca2+浓度显著升高(P＜0.05),转染PTEN基因后胞内Ca2+浓度比PshGFP对照组明显降低(P＜0.05);无关对照PshGFP组神经元活力较正常对照组和治疗组均有显著下降(P＜0.05) o结论:下调PTEN基因可降低NR2B的表达,阻断Ca2+内流,增加细胞活力,从而保护神经元损伤.     

PTEN表达下调对神经元胞内游离钙离子和神经元凋亡的研究

目的：探讨神经元缺血缺氧损伤再灌后，下调PTEN在阻断Ca^2＋内流及凋亡调控方面的保护机制。方法：建立神经元缺糖缺氧（oxygen-glucose deprivation，OGD）损伤模型，转染shRNAspten-GFP质粒，用Western blotting检测PTEN水平，Fura 2-AM法测定胞内Ca^2＋浓度，流式细胞术和AO／EB检测神经元凋亡。结果：与正常组相比OGD后细胞凋亡率和胞内Ca^2＋浓度显著升高（P〈0．05）；与对照组相比经shRNAspten干预后胞内Ca^2＋浓度和细胞凋亡率明显降低（P〈0．05）。结论：shRNAspten-GFP能成功转染到神经元中，PTEN表达下调可阻断Ca^2＋内流并对缺糖缺氧诱导的细胞凋亡有拮抗作用，从而达到神经元保护的目的。     

噪声来源及解决在膜片钳实验中的作用

膜片钳实验将电生理实验推向了分子水平,其记录的信号是皮安级的通道电流,因此,排除噪声在膜片钳实验中极其重要.结合工作实践,分析膜片钳实验中噪声的原因及种类,介绍常用的解决措施.     

生物撞击机的研制及撞击伤发生机制的研究

目的对１０年来有关生物撞击机的研制及撞击伤发生机制的研究作一回顾和系统总结。方法系统整理以往的研究资料,就一些主要问题进行分析总结。结果（１）研制了ＢＩＭ－Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ型生物撞击机,可以不同方式、不同速度对不同动物进行撞击实验。（２）建立光弹性模型,探讨了撞击后颅内应力分布过程,证明应力集中区与损伤部位一致。（３）证明循环内皮细胞计数和肌酸磷酸激酶（ＣＫ－ＢＢ）活性测定在脑损伤早期有诊断意义。（４）脑创伤后脑内出现炎症反应,多形核粒细胞（ＰＭＮ）浸入和聚集可能在脑继发损伤中起重要作用。（５）脑创伤后Ｃａ２＋内流增加,尼莫地平可阻止Ｃａ２＋内流,减轻神经细胞损伤。（６）丙酸睾丸酮能促进伤后面神经核内生长相关蛋白（ＧＡＰ４３）的合成,有助于面神经损伤后的修复与再生。（７）胸部撞击伤研究证明,胸部的黏性标准与胸部伤情的相关性最好,变形速度是影响伤情的主要因素。结论撞击伤是交通事故中最常见的伤类,原发损伤是应力传至体内和应力集中于损伤部位的结果。继发性损伤的机制十分复杂,如出现炎症反应,ＣＫ－ＢＢ等许多酶活性增强,细胞内Ｃａ２＋超载等,采取相应的拮抗剂可不同程度地减轻损伤。     

大鼠肺撞击组织细胞凋亡的变化及其意义

目的 :探讨肺撞击伤的特点 ,比较左、右肺组织中细胞凋亡的变化 ,提示细胞凋亡在肺撞击伤和继发性肺损伤中的作用。方法 :撞击大鼠右侧胸部建立重度肺撞击伤模型 ,应用流式细胞仪配合ＰＩ和ＦＩＴＣ双染法检测伤前及伤后 6、2 4、48、72ｈ和 1周时大鼠左、右肺组织的细胞凋亡率。结果 :大体观察可见 ,右肺受撞击区域出血、充血、水肿 ,左肺除稍饱满外 ,未见出血或充血等损伤。光镜观察 ,右肺受撞击区域组织结构严重破坏 ,出血及水肿明显 ,可见较多浸润的中性粒细胞 ,左肺组织结构清晰 ,仅见小血管袖套状操作及中性粒细胞浸润 ,伤后 2 4ｈ肺…