二氧化碳灌注在内镜黏膜下剥离术治疗结直肠肿物中的临床应用

目的 探讨CO2作为灌注气体在内镜黏膜下剥离术(ESD)治疗结直肠肿物中的有效性和安全性.方法 选取在东莞市人民医院住院并行ESD治疗结直肠肿物的患者42例,采用随机数字法分为空气组(21例)和CO2组(21例),灌注气体分别采用空气和CO2,记录每组患者ESD成功率、操作时间、出血和穿孔等并发症发生情况;记录术前、术...     

IFITM1克隆测序及生物信息学分析

目的 研究干扰素诱导的跨膜蛋白-1基因(interferon induced transmembrane protein 1.IFITM1)克隆、测序,对序列进行分析,并获取生物学信息.方法 以IFITM1的cDNA为模板,用Pfu酶做PCR扩增,在EcoRⅠ和Hind Ⅲ双酶切后,将IFITM1的cDNA片段克隆到pUCm-T质粒,对重组的pUCm-T-IFITM1测序后,采用All GenBank+EMBL+DDBJ+PDB Sequences Database 和 Simple Modular Architecture Research Tool (SMART)对IFITM1的cDNA进行生物信息学分析. 结果扩增后,含有IFITM1基因cDNA的PCR产物约1000 bp,IFITM1的 cDNA成功克隆到pUCm-T质粒并进行测序.序列分析结果显示,IFITM1结构cDNA全长683bp, 有2个外显子.IFITM1的 mRNA编码的氨基酸在37～57和87～107有2个跨膜区,编码125个氨基酸的多肽,其蛋白相对分子质量为14kDa.结论 IFITM1基因的成功扩增、克隆、测序,获取了IFITM1基因的cDNA、mRNA以及编码蛋白质氨基酸的生物学信息,有利于研究IFITM1基因与大肠癌的关系.     

阻抑eIF-4E对大肠腺癌细胞乙酰肝素酶mRNA水平及其表达的影响

目的确定阻抑大肠腺癌LS-174T细胞中过量表达的真核细胞起始因子-4E(eIF-4E)是否促进乙酰肝素酶mRNA的降解,并改变其翻译表达水平。方法应用脂质体包裹与eIF-4E mRNA翻译起始点互补的反义寡聚核苷酸,转染处理人大肠腺癌细胞LS-174T。Western blotting和RT-PCR方法分别检测eIF-4E被阻抑后转录和翻译水平的改变。采用Northern blotting定量检测乙酰肝素酶mRNA的细胞内水平,Western blotting检测其蛋白表达水平的改变。结果反义寡聚核苷酸经脂质体转染LS-174T细胞后,eIF-4E基因表达明显受到抑制,其蛋白表达产物也显著下降。伴随eIF-4E被阻抑表达,Northern blotting结果显示乙酰肝素酶mRNA水平下降,且其蛋白翻译表达量也降低。结论阻抑eIF-4E影响LS-174T细胞乙酰肝素酶mRNA的稳定表达,促使其降解,并降低乙酰肝素酶表达。     

应用SEREX技术筛选肿瘤抗原的研究进展

SEREX (serologicalidentificationofantigenbyrecombi nantcDNAexpressionlibraries)技术 ,即重组克隆表达抗原的血清学鉴定技术 ,是由德国血清学家Sahin等[1] 建立的从分子水平鉴定肿瘤抗原的方法。其理论基础是肿瘤能刺激机体产生免疫反应 ,人体B淋巴细胞可以识别自身肿瘤抗原 ,产生高价抗体 ,引起强烈的IgG反应。SEREX技术不需要特异CTL和瘤细胞的体外建株 ,而是应用cDNA表达文库使抗原浓度成百倍的增高 ,解决了既往肿瘤抗原抗体反应中的关键问题 ,新发现了大量肿瘤抗原。1　SEREX技术SEREX技术的基本步骤[1,2 ] :①患者…     

DAC－树脂血液灌流对肝血管输注阿霉素心肌脂质过氧化的影响

ＤＡＣ－树脂ＤＨＰ与肝血管持续输注ＡＤＲ联合应用结果显示，体内心肌丙二醛（ＭＤＡ）含量与ＡＤＲ投入量呈正相关（ｒ＝０．８９７７），ＤＡＣ－树脂ＤＨＰ较对照灌流组能明显降低ＡＤＲ（５ｍｇ／ｋｇ和１０ｍｇ／ｋｇ）急性期心肌ＭＤＡ含量，分别为０．４０５４±０．０４９７对０．７１２９±０．０１６３１ｎｍｏｌ／ｍｇＣｐｒｏｔ（Ｐ＜０．００５）和０．６８９２±０．０９６８对０．９９２２±０．２０７０ｎｍｏｌ／ｍｇＣｐｒｏｔ（Ｐ＜０．０１）；也能显著降低ＡＤＲ（５ｍｇ／ｋｇ）亚急性期（第８天）心肌ＭＤＡ含量（０．５５０４±０．０６２８对０．７４５２±０．０６１２ｎｍｏｌ／ｍｇＣｐｒｏｔ；Ｐ＜０．００５）。表明ＡＤＲ心肌脂质过氧化具有剂量和时间依赖性，ＤＡＣ－树脂ＤＨＰ能明显降低急性期和亚急性期ＡＤＲ刺激产生自由基导致心肌膜结构脂质过氧化的程度，可认为能减轻ＡＤＲ所致心肌急性期和亚急性期的损害程度。     

不同途径给表阿霉素及联用血液灌流的临床意义

目的探讨不同途径给表阿霉素(EPI)的优劣和血液灌流(DHP)对EPI的吸附能力.方法观察肝癌患者肝动脉和外周静脉持续输注EPI后外周血浆EPI浓度的改变,并应用DAC-resin DHP吸附EPI的临床研究.结果肝动脉给药能明显降低外周血浆EPI浓度(15,35min EPI浓度分别为373μg/L±113μg/L vs 766μg/L±264μg/L, P＜0.01, 339μg/L±97μg/L vs 521μg/L±106μg/L,P＜0.05),显著降低血浆高峰浓度(μg/L, 515±163 vs 900±84,P＜0.01);而两组浓度曲线下面积(AUC)的差别不明显(1:1.05). DAC-resin DHP对EPI有明显吸附性能,吸附率达67%.结论局部给抗癌药优于全身给药,DAC-resin DHP对EPI有明显吸附性能.     

人源性大肠癌cDNA噬菌体表达文库的构建及鉴定

目的　构建人源性大肠癌cDNA噬菌体表达文库。方法　从人大肠癌组织中提取总RNA ,RT PCR反转录合成cDNA第 1链 ,用长距离PCR技术合成cDNA第 2链 ,除去小于 5 0 0bp的小片段后与λTriplEx2噬菌体连接 ,体外包装 ,构建成cDNA噬菌体表达文库。转染E .coliXL1 Blue大肠杆菌 ,滴定文库的滴度 ,确定文库容量大小 ,测定重组率。用EXTagTM酶做PCR和SfiⅠ酶切鉴定插入的cDNA片段大小。结果　构建成含 2 .39× 10 6pfu/ml重组子的人大肠癌cDNA噬菌体表达文库 ,重组率为 97.5 %。插入的外源cDNA片段大小为 5 0 0bp～ 4kb ,平均长约 1.4kb。 结论　成功构建高质量人源性大肠癌cDNA噬菌体表达文库 ,适合于免疫筛选cDNA克隆的人大肠癌相关抗原基因。     

超细胃镜在经皮内镜下胃造瘘术中的应用研究

目的：研究超细胃镜在经皮内镜下胃造瘘术中的应用价值。方法将2012年3月～2013年5月期间在广东省东莞市人民医院接受经皮内镜下胃造瘘术的56例患者纳入研究，随机均分为给予经皮超细胃镜下胃造瘘术的观察组和经皮常规胃镜下胃造瘘术的对照组（n=28），观察2组患者的手术相关指标、术中应激指标以及术后生存质量。结果观察组患者手术时间（28.4±5.2）min、术后胃管起饲时间（18.9±3.4）h、卧床时间（3.6±0.8）d，均明显短于对照组，差异具有统计学意义（P〈0.05）；应激指标肾上腺素（85.3±9.1）ng/mL、去甲肾上腺素（104.7±14.2）ng/mL、肾素（2.5±0.5）pg/mL以及血管紧张素Ⅱ水平（25.4±5.5）pg/mL均明显低于对照组，差异具有统计学意义（P〈0.05）；2组自我实现、健康责任、运动、营养、人际关系、应对压力评分比较，差异无统计学意义。结论经皮超细胃镜下胃造瘘术有助于缩短手术时间、缓解术中应激、促进术后恢复、改善生存质量，具有积极的临床应用价值。