弓形虫RH株膜蛋白P30的原核表达与鉴定

目的在E.coli中表达弓形虫RH株膜蛋白P30。方法将P30基因定向克隆到pET28b,构建含目的基因的pET28b-P30重组质粒,转化E.coliBL21(DE3),接种含pET28b-P30的BL21(DE3)单菌落于LB培养基,1∶100稀释后用0.2mmol/L的IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Westernblot鉴定诱导表达产物。结果1构建了重组质粒pET28b-P30,2在E.coli中表达了一分子量约为30kDa的融合蛋白,经Westernblot鉴定正确。结论在E.coli中高效表达了弓形虫RH株膜蛋白P30,并以包涵体形式存在。     

脊源性腹痛——8例报告

本文总结了我院1985年～1990年诊治的8例脊源性腹痛及其误诊分析。脊源性腹痛的特点是:①腹痛部位不确切,夜间疼痛尤甚,与体位改变有关。②常有神经根激惹征。③腰背肌紧张比腹肌紧张明显。④伴有其它神经症状和体征。本文所见引起脊源性腹痛的疾病有多发性硬化、脊髓炎、脊髓蛛网膜下腔出血、脊髓蛛网膜炎、多发性神经炎及脊椎骨折。本病易误诊为阑尾炎、泌尿系结石、胆囊炎、胰腺炎、消化性溃疡、神经官能症等。     

哮喘急性发作的病例分析及药物治疗

目的:为提高临床医生对支气管哮喘及其急性发作的认识,做出及时正确诊断并给予规范化治疗,以减少误诊和医疗资源的浪费。方法:分析2例哮喘急性发作的病例并进行总结。结果:患儿均属于哮喘的急性发作,在明确的诊断和正确治疗下病情好转,并给予长期规范化管理。结论:哮喘急性发作治疗的关键是缓解气道痉挛、消除气道炎症。尽早明确诊断并给予正确规范化治疗对哮喘的愈后有积极的影响。     

经颅磁刺激后脑梗死大鼠学习记忆与海马c-Fos的表达

目的:研究经颅磁刺激对脑梗死后大鼠学习记忆功能和脑海马区c-Fos表达的影响。方法:实验于2004-09/12在华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科实验室完成。48只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、经颅磁刺激组,每组16只。模型组和经颅磁刺激组大鼠采用线栓法制作一侧大脑中动脉闭塞的脑梗死模型。经颅磁刺激组在制模后第2天给予每天2次、每次30个脉冲的经颅磁刺激治疗,疗程4周。每组中的8只大鼠分别于4周后检测Y-迷宫中的学习记忆成绩和梗死侧海马c-Fos的表达。结果:经颅磁刺激组大鼠学习记忆功能明显改善(学习尝试次数:18.36±4.87;记忆再现次数:6.05±1.34),与模型组比较(学习尝试次数:26.40±5.45;记忆再现次数:3.72±1.18),差异均有显著性意义(t=3.65,3.28;P均<0.01);经颅磁刺激组大鼠海马各区c-Fos阳性表达细胞数显著增加(CA1:28.55±3.62,CA2:25.27±3.09,CA3:27.65±3.53,齿状回:34.92±6.56),与模型组比较(CA1:9.42±1.28,CA2:7.58±1.18,CA3:8.63±1.24,齿状回:11.36±2.04),差异均有显著性意义(t=17.22,19.32,17.57,11.87;P均<0.01)。结论:应用转基因技术获得的c-fos基因突变的小鼠,表现出明显的空间学习记忆障碍,提示c-fos等即早基因的激活可能是学习记忆形成的必要条件。经颅磁刺激     

葡萄球菌生物膜的形成及影响因素

目的了解临床标本中葡萄球菌形成生物膜的状况，及葡萄糖、乙醇、氯化钠对生物膜形成的影响。方法采用刚果红、微量平板法检测生物膜形成及葡萄糖、乙醇、氯化钠对生物膜形成的影响。结果刚果红法检测金黄色葡萄球菌(金葡菌)、凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)生物膜阳性率分别为26．2％和12．7％；生物膜半定量法，金葡菌：普通肉汤、0．25％葡萄糖、2％、4％乙醇、2％、4％氯化钠阳性率分别为14．7％、29．6％、32．7％、19．6％、13．1％和14．6％；CNS分别为13．9％、27．8％、26．5％、18．5％和21．5％。结论临床标本葡萄球菌相当一部分能产生生物膜，葡萄糖、乙醇能促进生物膜形成。     

无创通气治疗COPD并Ⅱ型呼吸衰竭的效果观察

目的探讨Bi PAP呼吸机在COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭中的临床效果。方法将50例COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者随机分为对照组和治疗组,对照组给予持续低流量吸氧及常规治疗,治疗组在常规治疗基础上加用BiPAP无创呼吸机治疗,观察两组治疗后血气分析结果、呼吸频率及心率。结果治疗组治疗后的Pa O2、Pa CO2、心率、呼吸频率与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);两组p H值比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论无创通气具有无创、安全、治疗COPD并Ⅱ型呼吸衰竭疗效确切等优点。     

1,2,3,4,6-O-五没食子酰基葡萄糖对MPP+诱导PC12细胞凋亡的保护作用

目的 考察1,2,3,4,6-O-五没食子酰基葡萄糖(1,2,3,4,6-penta-O-galloyl-β-D-glucose,β-PGG)对MPP⁺诱导的帕金森病细胞模型中PC12细胞凋亡的保护作用及其机制研究。方法 PC12细胞孵育于高糖DMEM培养基中,在药物处理前1周,将神经生长因子(NGF)加入培养基中,使培养基中NGF的终质量浓度为50 ng/mL。将细胞分为对照组、MPP⁺组以及50 μmol/L β-PGG预处理7、12、20、30 h组,观察预处理不同时间对MPP⁺中PC12细胞存活影响。采用台盼蓝染色法检测细胞死亡情况,MTT法检测细胞活力,免疫印迹法检测Bcl-2、Bax、Fas、FasL、procaspase-3、procaspase-8、procaspase-9蛋白表达情况,并检测caspase-3、caspase-8、caspase-9活力。结果 对照组PC12细胞死亡率最低,MPP⁺组PC12细胞死亡率最高,从β-PGG预处理12 h起PC12细胞死亡率较MPP⁺组均明显降低(P< 0.01)。MPP⁺组PC12细胞活力最低,50 μmol/L β-PGG预处理12 h时PC12细胞活力进一步增高,预处理20 h时细胞活力最高。β-PGG预处理5 h后即可见Bcl-2、procaspase-3、procaspase-8、procaspase-9蛋白含量增加,至15 h时增加达到高峰;与之相反的是,β-PGG预处理5 h后即可见Bax、Fas、FasL蛋白含量减少,至30 h时达最少。50 μmol/L β-PGG预处理PC12细胞15 h后caspase-3、caspase-8、caspase-9的活力分别为MPP⁺组的36.5%、40.2%、42.2%。结论 β-PGG对MPP⁺诱导PC12细胞凋亡具有保护作用,其机制是通过增强Bcl-2的表达、抑制Bax、Fas、FasL的表达以及降低caspase-3、caspase-8、caspase-9的活力实现了抑制MPP⁺引起的PC12细胞凋亡,促进PC12细胞的存活。     

奥马哈问题分类表在脑卒中住院患者评估中的应用

目的 探讨奥马哈问题分类表在脑卒中住院患者评估中的应用效果.方法 以奥马哈问题分类表为护理评估、诊断框架,对77例脑卒中住院患者进行评估、诊断,找出患者存在的主要护理问题并进行分析、归类.结果 77例患者共存在护理问题621个,平均每例患者存在8.06个;存在的护理问题65.21％属于生理领域,24.96％属于健康相关行为领域,8.70％属于心理社会领域,1.13％属于环境领域;发生率超过50％的护理问题是循环、神经-肌肉-骨骼功能、个人照顾、消化-水合和精神健康.结论 奥马哈问题分类表能全面评估脑卒中住院患者健康状况,发现患者的护理问题.进行适当的修改后,奥马哈问题分类表可用于脑卒中患者的临床护理评估.     

短暂性脑缺血发作病人的脑缺血耐受作用及血清MMP-9水平的变化

目的 评价短暂脑缺血发作(TIA)是否具有脑保护作用并探讨其机制.方法 选择2000～2004年142例脑梗死病人.脑梗死前有TIA病史者分为3组,A组30例,TIA持续时间10 min;B组30例,TIA持续时间10～20min;C组30例,TIA持续时间20 min;52例无TIA病史者列为D组.采用欧洲脑卒中神经功能缺损评分标准(ESS),对各组患者入院后24 h、21 d及发病后3个月进行神经功能评分;应用Pullicino等公式对各组病人发病21 d时进行脑梗死体积计算;应用酶联免疫吸附法测定各组病人发病12、24、48、72、96 h时血清MMP-9的水平.结果 A、B、C 3组病人神经功能评分明显高于D组,B组病人明显高于A、C两组;发病21 d时,A、B、C 3组病人梗死体积明显小于D组,B组最明显;每组患者血清MMP-9的水平呈动态变化即发病12 h开始增高,48 h达到高峰,96 h时恢复到正常水平.B组病人在不同时间点血清MMP-9的含量明显低于A、C两组,且明显低于D组.结论 缺血耐受在脑梗死前合并TIA的患者可能发挥作用.其作用可以与MMP-9的表达减少有关.