PS341对他莫昔芬诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡影响及其机制的探讨

目的:研究蛋白酶体抑制剂PS341是否可增强他莫昔芬(TAM)诱导的乳腺癌细胞凋亡,并探讨可能的机制。方法:采用MTT方法测定细胞活力,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,采用蛋白质印迹法检测Caspase-8的活化,PARP的裂解及死亡受体Fas蛋白的表达。结果:TAM以时间及浓度依赖的方式抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖,24及48h的IC50分别为25和6μmol/L,25μmol/L的TAM处理24h可诱导21.9%的MCF-7细胞发生凋亡,10nmol/L的PS341预处理后给予25μmol/L的TAM处理24h细胞凋亡增至34.6%,PS341与TAM均可轻微上调Fas的表达水平,两药联合应用后可显著上调Fas的表达水平,并明显增强线粒体外凋亡通路的活性。结论:PS341与TAM联合应用可通过上调Fas的表达水平,增强TAM诱导的乳腺癌MCF-7细胞凋亡。     

携带靶向沉默LSD1基因表达shRNA慢病毒载体的构建与鉴定

目的:构建慢病毒干扰LSD1表达的载体并鉴定。方法:设计并合成3对针对LSD1基因的shRNA链,退火形成双链,与酶切的质粒连接,转化DH5a菌株,提取质粒,进行酶切鉴定和测序分析。脂质体法转染人胃癌MKN-28细胞,通过荧光倒置显微镜判定转染效率,并通过real time-PCR法检测细胞中LSD1基因的表达水平。结果:经酶切鉴定筛选出的重组质粒测序结果与目的序列相同,重组质粒构建成功;转染胃癌MKN-28细胞后,LSD1基因在mRNA水平的表达降低。结论:成功构建了靶向LSD1基因的shRNA慢病毒载体,并筛选出1种对LSD1基因有显著抑制作用的shRNA。     

三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞白血病过程中高白细胞血症和维甲酸综合征的特点

目的:为明确三氧化二砷(亚砷酸,ATO)在初治和全反式维甲酸(all trans retinoicacid,AT RA)治疗后复发的急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocyticleukemia,APL)的诱导缓解时,引起高白细胞血症(leukocytosis)和维甲酸综合征(reti noicacidsyndrome,RAS)的发生规律。方法:初治和复发的APL共30例,ATO10mg/d进行诱导缓解治疗。结果:30例患者中23例(77%)达到完全缓解,达到缓解平均时间37.1d。发生高白细胞血症有14例(47%),出现高白细胞血症平均时间为12.9d,发生高白细胞血症患者的白细胞平均基础值为3.1×109L-1,未发生高白细胞血症患者的白细胞平均基础值为2.6×109L-1,两者差异有统计学意义,z=-2.635,P=0.008,所有患者均未采用细胞毒药物治疗,白细胞均恢复至正常水平。RAS有9例(30%),发生RAS的平均时间为13.9d,发生RAS患者的白细胞平均基础值为3.6×109L-1,未发生RAS患者的白细胞平均基础值为2.6×109L-1,z=-1.909,P=0.046,无1例因RAS死亡。结论:ATO对初治和复发的APL诱导缓解安全有效,ATO诱导APL缓解时引起的高白细胞血症及RAS与白细胞基础水平有关,在诱导缓解过程中发生的RAS与高白细胞血症有一定相关性。高白细胞血症可以通过继续应用ATO逐渐恢复。     

急性白血病患者骨髓中GST-pi的表达与活性

目的:检测GST-pi在急性白血病(acuteleukemia,AL)患者骨髓中的表达及活性,分析其临床意义。方法:采用免疫组化方法检测160例急性白血病患者骨髓GST-pi的表达,同时采用Habig的实验方法测定其中25例标本的GST-pi活性。结果:GST-pi在复发/难治组中的表达显著高于初治/敏感组,χ2=21·910,P=0·000;AML组与ALL组GST-pi表达差异无统计学意义,P>0·05;GST-pi表达阳性组的完全缓解率明显低于GST-pi表达阴性组,χ2=46·166,P=0·000。白血病组GST-pi活性明显高于正常对照组,t=7·512,P=0·002;GST-pi表达与活性高度正相关,r=0·71,P=0·004,其中有2例患者GST-pi高表达低活性。结论:GST-pi的表达及活性与AL的发生发展密切相关,GST-pi可作为判断AL预后的重要指标。     

CMAB009联合伊立替康或伊立替康单药二线治疗氟嘧啶和奥沙利铂治疗失败的KRAS野生型转移性结直肠癌患者的研究：一项前瞻性、开放、随机、Ⅲ期试验

背景与目的 5-氟尿嘧啶/左亚叶酸钙联合奥沙利铂(5-fluorouracil/leucovorin plus oxaliplatin,FOLFOX)方案是转移性结直肠癌(metastatic colorectal cancer,mCRC)的标准一线治疗方案,但KRAS野生型mCRC患者的最佳二线治疗方案仍在研究中。在本研究中,我们旨在探索CMAB009联合伊立替康二线治疗KRAS野生型mCRC患者的临床疗效和安全性。方法将FOLFOX治疗失败的KRAS野生型mCRC患者按照2∶1比例随机分组,接受CMAB009联合伊立替康或伊立替康单药治疗。伊立替康单药治疗的患者在疾病进展时可转为CMAB009治疗,分为CMAB009序贯治疗组。主要终点为总缓解率(overall response rate,ORR)和中位无进展生存期(progression-free survival,PFS)。次要终点为中位总生存期(overall survival,OS)、疾病控制率(disease control rate,DCR)、临床获益率(clinical benefit rate,CBR)和缓解持续时...     

中药萃取超导透入治疗兔膝骨关节炎疗效的实验研究

目的:研究中药组方补肾通络方萃取物经超导透入治疗膝骨性关节炎的疗效,探讨其防治骨性关节炎的可行性。方法:24只新西兰大白兔随机分为模型组(8只)、中药组(8只)、治疗组(8只)。右膝关节内注射木瓜蛋白酶建立兔膝骨性关节炎模型,左膝为正常对照组。成模后中药组患膝外涂中药组方萃取物,治疗组将中药萃取物经超导透入患膝,8周后镜下观察各组动物模型关节软骨、滑膜组织形态学变化及硝酸还原酶法测NO浓度。结果:中药组滑膜及软骨组织形态学改变略轻于模型组,治疗组关节改变较模型组明显减轻,且滑膜组织NO浓度明显降低(P<0.01);结论中药萃取物超导透入较传统外敷用药更能够减轻兔膝骨性关节炎的软骨退行性变和滑膜炎症。     

基于数据分析的NFASC与胃癌预后的关系及相关机制

目的:探讨NFASC在胃癌中的预后意义及相关机制。方法:从人类肿瘤相关基因表达汇编（Gene Expression Omibus,GEO）数据库中下载GSE62254胃癌数据集,分析NFASC表达与胃癌临床病理学参数的相关性及对预后的影响;利用Cox模型分析影响胃癌患者总生存期的因素并建立预后预测列线图模型;采用基因集富集分析(GSEA)方法预测NFASC参与的信号通路。结果: NFASC高表达的胃癌患者总生存时间（overall survival,OS）更短（P<0.05）,NFASC表达与患者年龄、T分期及Lauren分型相关（P均<0.05）。NFASC高表达富集了TGF-β信号通路、mTOR信号通路、MAPK信号通路和Wnt信号通路等与肿瘤细胞增殖密切相关的通路（P<0.05,FDR<0.25）。结论: NFASC是胃癌的不良预后因素,其表达可能成为胃癌预后预测生物标志物。     

Grb2-相关蛋白2参与RANKL诱导的乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移的机制研究

目的探讨Grb2-相关蛋白2(Gab2)在核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的乳腺癌细胞MDA-MB-213迁移中的作用。方法流式细胞术检测MDA-MB-231细胞表面RANK的表达。Transwell法测定RANKL刺激后细胞迁移能力的改变。免疫沉降及Western-blot检测RANKL刺激后p-Tyr-Gab2和Gab2的表达。结果 MDA-MB-231细胞表达RANK蛋白,RANKL诱导MDA-MB-231细胞迁移能力增强。RANKL刺激后MDA-MB-231细胞p-Tyr-Gab2表达一过性升高。结论 Gab2参与RANKL诱导的乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移。     

非小细胞肺癌组织GST-π表达及其临床意义的研究

目的:检测谷胱甘肽S-转移酶(GST-π)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中的表达,分析其与预后的关系.方法:将109例NSCLC患者的手术标本及11例正常肺组织标本制成组织芯片,采用SP免疫组化方法检测GST-π的表达,并与病理特征及生存时间进行分析.结果:109例NSCLC患者中,GST-π表达阳性为68例(62.4%),正常肺组织为1例(9.1%),差异有统计学意义,x2=9.535,P=0.002.GST-π的表达与年龄、分化程度、TNM分期及淋巴结转移无关,P均>0.05,但与性别,病理类型和吸烟有关,x2值分别为0.749、3.879和4.898,P值分别为0.005、0.049和0.027.Cox多因素分析显示,TNM分期是影响预后的独立危险因素(95%CI:1.625～3.893),P=0.000,GST-π的表达与生存期无关,P=0.940.结论:GST-π的表达可能与预后无关.     

PI3K/Akt抑制剂LY294002对胃癌细胞化疗增敏作用的探讨

目的 探讨PI3K/Akt特异性抑制剂LY294002与化疗药物5-Fu及奥沙利铂联合使用对3种胃癌细胞系(MGC803、BGC823和SGC7901)化疗效果的影响.方法 将PI3K/Akt特异性抑制剂LY294002联合化疗药物5-Fu及奥沙利铂作用于3种胃癌细胞系,MTT法检测单独使用5-Fu、奥沙利铂及联合LY294002对体外培养的3种胃癌细胞系的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 联合LY294002作用后,5-Fu、奥沙利铂对3种胃癌细胞系的增殖抑制作用明显增强(P<0.05),且凋亡率显著提高(P<0.05).结论结果 LY294002能有效提高化疗药物5-Fu、奥沙利铂体外对胃癌细胞的增殖抑制作用,抑制PI3K/Akt信号转导通路可显著提高胃癌的化疗疗效.