人白介素24单克隆抗体的制备与鉴定

目的:制备抗白细胞介素24(Interleukin 24,IL-24)的单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法:应用分子生物学技术,构建含人IL-24编码序列的原核表达载体,表达并纯化了人IL-24融合蛋白。用纯化人IL-24融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞,有限稀释法进行亚克隆,采用免疫印迹及免疫组化染色对抗体的特异性进行了鉴定。结果:获得3株能稳定分泌抗IL-24单抗的杂交瘤细胞,分别命名为1G2,3F4,4A6。通过免疫印迹及免疫组化染色检测显示,这3株单抗均能够与IL-24特异性结合。结论:成功制备抗IL-24单克隆抗体,为进一步探索IL-24在抗肿瘤中的作用机制奠定了基础。     

突变型与野生型c—myc在非p53依赖性通路中对Bim基因表达的影响

目的探讨突变型与野生型c-myc基因在非p53依赖性通路中对Bim基因表达调控及细胞凋亡的诱导功能。方法分别用携带突变型与野生型c-myc基因慢病毒载体感染p53缺失型乳癌HCCl937细胞,并得到二者过表达的稳定细胞株,以未感染组及感染不携带cmyc基因的慢病毒细胞做空白对照和感染对照,RT-PCR检测突变型与野生型c-myc及Bim基因mRNA表达,MTT、TUNEL检测突变型与野生型c-myc基因过表达乳癌HCCl937细胞增殖与凋亡情况。结果RT-PCR结果显示,突变型组与野生型组cmyc基因mRNA过表达,野生型组Bim基因mRNA表达量与突变型组比较,差异有显著性（F=125．191、157．974,P％0．05）。突变型组细胞增殖活性显著高于野生型组（F=769,64,P％0．05）。突变型组与两对照组细胞凋亡率较低,三者相比差异无显著性,野生型组细胞凋亡率显著高于突变型组与两对照组（F=61．57,P％0．05）。结论非p53依赖性通路中,野生型c-myc基因过表达能明显上调Bim基因表达,通过Bim诱导细胞凋亡,而突蛮后此作用丧失,致瘤件增高。     

盲肠粪石误诊肿瘤三例教训分析

我们遇到3例盲肠粪石,均曾误诊为肿瘤,2例行手术治疗,为总结经验教训,现报告如下。例1.男,65岁。于1984年11月8日因阵发性腹痛入院。患者半年前出现阵发性腹痛,以中下腹为著,持续30分钟,大便后常能缓解,无腹泻及脓血便,食欲尚好,曾服多付中药无明显效果。有高血压及左侧偏瘫史。体检:体温36.8℃,脉搏60次/分,呼吸16次/分,血压25.3/12.7kPa(190/95mmHg)。腹部叩诊呈鼓音,右下腹轻压痛,触诊似有包块,肠鸣音活跃,无     

棉产区和稻产区有机氯农药环境暴露与不良妊娠结局关系的研究

有机氯农药是一类高残留农药,在环境中性质稳定,残留期长,并容易通过食物链在生物体内富集。有关这类农药对人类胎儿影响的研究较少。为此,我们以有机氯农药的使用和鸡蛋有机氯残留量为环境有机氯暴露的指标,进一步分析了它们与不良妊娠结局的关系。研究对象在湖北农村选择1个棉产区和1个稻产区作为研究地区。以研究地区户口在册、1989年1月1日～12月31日期间出现的任何妊娠结局的妇女作为研究对象。妊娠结局终点指标的分类及定义参考文献,农药销售及使用情况是从当地生产资料销售部门和农民家中调查所得,两地区鸡蛋     

硒对氟致肾损害的影响

给SD大鼠饮用含氟、硒、及氟加硒的水溶液8周,观察硒对氟致肾损害的影响。结果表明氟可使肾脏脂质过氧化物含量明显增加,肾近曲小管上皮细胞变性、坏死,线粒体数目增多,线粒体嵴减少,基底膜局部增厚,并可使肾近曲小管上皮细胞的琥珀酸脱氢酶（SDH）和碱性磷酸酶（ALP）活性明显降低,乳酸脱氢酶（LDH）和酸性磷酸酶（ACP）活性明显增高。补硒后则可促进肾脏的氟排泄,降低肾脏脂质过氧化物含量,肾脏的组织病理学和超微结构改变明显减轻,SDH活性增加,ACP活性降低。结果提示,硒对氟导致的肾损害具有明显的拮抗作用。     

帕瑞昔布钠超前镇痛对大肠癌切除术患者C-反应蛋白及细胞免疫功能的影响

目的研究帕瑞昔布钠超前镇痛对大肠癌切除术患者的炎性因子C-反应蛋白及细胞免疫功能影响。方法择期行大肠癌切除术的患者40例,年龄41-67岁,体质量53～82kg,ASA分级I或II级。采用随机数字表法,将患者随机分为二组（n=20）：P组麻醉诱导前30min静脉给予帕瑞昔布钠40mg（稀释为5mL）,N组给予生理盐水5mL。测定二组患者麻醉诱导前30min（T0）、切皮后2h（T1）、术毕（T2）和术后24h（T3）时,采外周静脉血样,测定血浆CRP及T淋巴亚群CD3＋、CD4＋、CD8＋和自然杀伤细胞的水平,计算CD4＋／CD8＋。结果与T0比较,P组及N组T2时CRP水平升高（P〈0．05）;P组T2、T3时IL-6降低（P〈0．05）;N组T2时CD3＋、CD4＋、CD4＋／CD8＋、NKcell降低（P〈0．05）。与N组比较,P组T2、T3时CRP水平升高（P〈0．05）,T2时CD3＋、CD4＋、CD4＋／CD8＋、NKcell升高（P〈0．05）。结论帕瑞昔布钠超前镇痛对腹腔镜大肠癌切除术患者CRP的释放起降低作用,对其细胞免疫功能影响小,是值得临床推荐的方法。     

人同源盒基因HOXB4慢病毒载体的构建及其在人脐带间充质干细胞中的表达(英文)

本研究构建人同源盒基因(homeobox gene)HOXB4的慢病毒载体,探讨慢病毒介导的HOXB4感染人脐带间充质干细胞后的变化。利用PCR扩增获得HOXB4,并克隆入慢病毒穿梭载体lenti-shuttle;运用4质粒慢病毒包装系统转染HEK293T细胞,48 h收获慢病毒lenti-HOXB4,并测定慢病毒滴度;将lenti-HOXB4感染人脐带间充质干细胞,在倒置荧光显微镜下观察细胞感染效果,确定最佳的病毒感染复数(MOI);同时,利用RT-PCR、免疫荧光染色、CCK-8、流式细胞术检测HOXB4的表达情况及对细胞生长的影响。结果表明:利用四质粒共转染293T细胞,成功获得lenti-HOXB4,测定的病毒滴度为3×108TU/ml;当MOI为20时,lenti-HOXB4对人脐带间充质干细胞具有较高的转染效率,达80%以上;感染lenti-HOXB4的人脐带间充质干细胞,在mRNA和蛋白水平上均检测到了目的基因的表达,其能促进脐带间充质干细胞的增殖;流式细胞术检测结果显示,HOXB4基因并未明显影响间充质干细胞的表面标志。结论:成功获得带有HOXB4基因的慢病毒并实现在脐带间充质干细胞中表达,HOXB4基因能促进脐带间充质干细胞的大量增殖,并未明显影响脐带间充质干细胞表面标志的表达。     

△ψm和Caspase 3在As2O3诱导腺样囊性癌ACC-2细胞凋亡过程中的作用

目的：探讨线粒体膜电位(△ψm)、Caspase 3在As₂O₃诱导ACC-2细胞凋亡中的作用。

方法：进行ACC-2细胞培养,将As₂O₃建立不同药物浓度梯度(0,1.0,2.0,4.0,8.0μmol/L)分别作用于ACC-2细胞,用Rh123染色,流式细胞仪检测8.0μmol/L As₂O₃作用前、后(24h),ACC-2细胞的线粒体膜电位(△ψm)变化; 用多功能酶标仪进行Caspase 3活性检测。

结果：空白对照组ACC-2细胞内Rh123荧光强度最强,8.0μmol/L As₂O₃处理组ACC-2细胞内Rh123荧光强度减弱,其差异有显著性(P<0.05); 随着As₂O₃药物浓度的增高(0, 1, 2, 4, 8μmol/L),ACC-2细胞的Caspase 3酶活力单位逐渐增加。

结论：As₂O₃作用于ACC-2细胞,可通过降低线粒体膜电位从而引起细胞凋亡。随着As₂O₃药物浓度的增高,ACC-2细胞的Caspase 3酶活力单位逐渐增加,Caspase 3被激活,细胞可发生不可逆转的凋亡过程。     

高糖介导入牙周膜细胞凋亡中bcl-2、bax的作用及机制（英文）

背景：高糖环境下人牙周膜细胞会发生凋亡,其中bcl-2,bax是否启动？如何发挥作用？此方面尚未见有文献报道。目的：应用不同浓度葡萄糖影响人牙周膜细胞,观察细胞凋亡及bcl-2、bax基因表达的变化。方法：原代培养并鉴定人牙周膜细胞,取5-8代细胞用于实验。采用5.5 mmol/L葡萄糖（生理对照组）和25 mmol/L葡萄糖（高糖组）作用细胞24 h和48 h;以Hoechst 33258免疫荧光染色观察人牙周膜细胞凋亡;以Real-time PCR检测bcl-2、bax表达。结果与结论：25 mmol/L葡萄糖促进人牙周膜细胞凋亡,bcl-2、bax表达显著高于对照组（P〈0.05）;bcl-2/bax比值显著低于对照组（P〈0.05）。结果说明高糖可增加人牙周膜细胞凋亡,Bcl-2家族发挥了重要作用。     

突变型与野生型c-myc在非p53依赖性通路中对Bim基因表达的影响

目的探讨突变型与野生型c-myc基因在非p53依赖性通路中对Bim基因表达调控及细胞凋亡的诱导功能。方法分别用携带突变型与野生型c-myc基因慢病毒载体感染p53缺失型乳癌HCC1937细胞,并得到二者过表达的稳定细胞株,以未感染组及感染不携带c-myc基因的慢病毒细胞做空白对照和感染对照,RT-PCR检测突变型与野生型c-myc及Bim基因mRNA表达,MTT、TUNEL检测突变型与野生型c-myc基因过表达乳癌HCC1937细胞增殖与凋亡情况。结果 RT-PCR结果显示,突变型组与野生型组c-myc基因mRNA过表达,野生型组Bim基因mRNA表达量与突变型组比较,差异有显著性(F=125.191、157.974,P<0.05)。突变型组细胞增殖活性显著高于野生型组(F=769.64,P<0.05)。突变型组与两对照组细胞凋亡率较低,三者相比差异无显著性,野生型组细胞凋亡率显著高于突变型组与两对照组(F=61.57,P<0.05)。结论非p53依赖性通路中,野生型c-myc基因过表达能明显上调Bim基因表达,通过Bim诱导细胞凋亡,而突变后此作用丧失,致瘤性增高。