无锡地区流感病毒病原学监测及H3亚型血凝素基因变异研究

目的 监测无锡地区2005年至2008年季节性流感型与亚型分布并了解2008年部分A/H3N2分离株血凝素(8A)基因变异状况.方法 无锡地区医院门诊流感样患者及集体单位聚集性流感样暴发患者采集鼻咽拭标本,接种MDCK细胞,采用标准抗血清鉴定阳性分离株型与亚型,并对2008年部分H3亚型流感病毒进行HA全基因测序,分析HA基因变异状况.结果 2005年至2008年9月,在无锡地区流感样患者中共分离到435株流感病毒,其中164株为A/H1N1亚型,80株为MH3N2亚型,B型191株.型与亚型有明显季节性分布强弱特征.H3亚型HA序列分析,无锡地区9株分离株与上海地区同期分离株接近,有很多序列相互穿插归属于进化树的同一分支,与WHO 2008-2009年疫苗推荐株相近.结论 近年无锡地区散发和局部暴发流感病毒感染仍主要为A/H1N1、A/H3N2和B型,A/H3N2 HA基因与上海地区同期分离株接近,与WHO 2008-2009年疫苗推荐株相近.     

巨细胞病毒感染与粘附分子-1基因转录水平的实验研究

目的研宄人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung,HEL)后粘附分子-1(ICAM-1)在基因转录水平的表达,探讨HCMV感染的发病机制.方法采用RT-PCR技术研究细胞ICAM-1-1在基因转录水平的表达.结果感染巨细胞病毒后ICAM-1的表达上调,而UV灭活的CMV不能诱导ICAM-1的上调,中药金叶败毒制荆与更昔洛韦(Ganciclovir,GCv)不能阻止病毒诱导的ICAM-1的上调.MEK特异性抑制子PD98059可加强ICAM-1的上调作用.结论细胞ICAM-1-1在转录水平的上调可能是感染病毒的直接作用,MEK特异性抑制子PD98059加强ICAM-1上调作用.     

无锡地区流感病毒病原学监测及H3亚型血凝素基因变异研究

目的 监测无锡地区2005年至2008年季节性流感型与亚型分布并了解2008年部分A/H3N2分离株血凝素(8A)基因变异状况.方法 无锡地区医院门诊流感样患者及集体单位聚集性流感样暴发患者采集鼻咽拭标本,接种MDCK细胞,采用标准抗血清鉴定阳性分离株型与亚型,并对2008年部分H3亚型流感病毒进行HA全基因测序,分析HA基因变异状况.结果 2005年至2008年9月,在无锡地区流感样患者中共分离到435株流感病毒,其中164株为A/H1N1亚型,80株为MH3N2亚型,B型191株.型与亚型有明显季节性分布强弱特征.H3亚型HA序列分析,无锡地区9株分离株与上海地区同期分离株接近,有很多序列相互穿插归属于进化树的同一分支,与WHO 2008-2009年疫苗推荐株相近.结论 近年无锡地区散发和局部暴发流感病毒感染仍主要为A/H1N1、A/H3N2和B型,A/H3N2 HA基因与上海地区同期分离株接近,与WHO 2008-2009年疫苗推荐株相近.     

NF-κB在人巨细胞病毒感染诱导宿主细胞增殖、凋亡中的作用

目的:探讨人巨细胞病毒(HCMV)是否通过激活核转录因子(NF-κB)调控宿主细胞增殖与凋亡。方法:用HCMVAD169株感染人胚肺成纤维细胞(HEL),采用免疫组化和Westernblot方法检测宿主细胞NF-κB和Bcl-2蛋白的表达与I-κBα的变化,应用MTT方法观察细胞的增殖活性,同时用流式细胞术检测细胞凋亡指数。结果:HCMV感染后48h细胞核表达NF-κB蛋白最多,24hI-κBα降到最低,120hNF-κB失活,bcl-2的表达与NF-κB的活性改变一致。HCMV感染在72h前抑制宿主细胞凋亡,促进细胞增殖,在120h可诱导宿主细胞凋亡。结论:NF-κB在HCMV感染诱导宿主细胞增殖与凋亡中起作用,与HCMV疾病的发生发展有关。     

多重PCR和单重PCR在流感病毒快速检测中的比较与应用

[目的]建立快速检测H1、H3亚型和乙型流感病毒的多重PCR技术,并与单熏PCR技术进行比较与应用. [方法]根据H1、H3亚型和乙型流感病毒设计引物,进行多重PCR扩增及电泳检测,在快速检测中与单重PCR进行比较与应用. [结果]该多重PCR技术能在4 h内同时检测3种型别的流感病毒,时间短于单重PCR技术,特异性和灵敏度相似.[结论]本研究建立多重PCR技术可以准确检测流感病毒,不仅灵敏度高、特异性好,而且可以得到快速的检测结果.     

1份半固体培养基保存的模拟肛拭样品鉴定结果分析

[目的]提高实验室微生物检验能力. [方法]依据感染性腹泻的诊断标准及处理原则GB17012-1997、食品卫生微生物检验GB/T4789.8.9-2003、2008年苏、浙、沪实验室间比对试验作业指导书(微生物部分),对上海市疾病预防控制中心发送的实验室间比对质控标本进行病原菌检测. [结果]WO16号模拟肛拭样品中除检出小肠结肠炎耶尔森菌O3血清型外,还检出类志贺邻单胞菌. [结论]参加微生物检验实验室间比对试验考核时,要利用已知知识进行检验,并要留意样品是纯菌株还是混合菌株.     

孕期干预减少宫内感染所致出生缺陷的临床意义

目的　探讨孕期干预减少人巨细胞病毒 (HCMV)和弓形虫 (TO)宫内感染所致出生缺陷的效果。方法　采用前瞻性随机对照临床研究方法 ,检测 3 0 95例有异常孕产史的孕妇外周血中的 HCMV和 TO特异性抗体 Ig G和 Ig M,对 HCMV Ig M阳性者再检测 HCMV晚期 m RNA。对 119例 HCMV Ig M和 HCMV m RNA均阳性者服用中药金叶败毒颗粒 ,12 9例作为对照 ;给 13 1例 TO Ig M阳性者服用西药螺旋霉素 ,13 9例作为对照。结果　中药金叶败毒颗粒可使孕妇 HCMV Ig M和 HCMV m RNA转阴率从自然状态下的 42 .64 % (5 5 / 12 9)提高到 71.43 % (85 / 119) (χ2=2 0 .87,P=0 .0 0 1) ,宫内传播率从自然状态下的 47.5 0 % (19/ 40 )下降到 2 0 .0 0 % (15 / 75 ) (χ2 =9.47,P=0 .0 0 1) ,并大大减少了流产、死胎、先天畸形等子代生长发育异常。西药螺旋霉素可使孕妇 TO Ig M转阴率从 3 5 .2 5 % (49/13 9)提高到 72 .5 2 % (95 / 13 1) (χ2 =3 7.63 ,P=0 .0 0 1) ,宫内传播率从自然状态下的 2 4.2 4% (8/ 3 3 )下降到 7.3 5 %(5 / 68) (χ2 =5 .65 ,P=0 .0 0 2 )。结论　筛选孕期 HCMV Ig M和 HCMV m RNA阳性以及 TO Ig M阳性的妇女 ,分别给予金叶败毒颗粒和螺旋霉素可减少因因宫内感染所致的出生缺陷     

ICP-OES法测定水中12种金属元素含量的不确定度分析

目的分析和计算ICP-OES法测定水中12种金属元素含量的不确定度。方法依据JJF 1059-1999《测量不确定度评定与表示》,建立数学模型,分析不确定度的来源,计算待测量元素在一定浓度范围内的不确定度。结果对水中12种金属元素进行测定,得出了其不确定度。结论通过测量不确定度的评定,可以掌握ICP-OES法测定水中12种金属元素含量结果的准确性,保证检测工作的质量。     

室内空气中总挥发性有机物的热解吸-毛细管柱气相色谱测定法

目的:建立热解吸-毛细管柱气相色谱法测定室内空气中总挥发性有机物(TVOC)的方法。方法:用活性炭管吸附,热解吸进样,FFAP大口径毛细管气相色谱法对室内空气中24种挥发性有机物进行分离和测定。结果:24种挥发性有机物的线性方程相关系数为0.9963～0.9999,相对标准偏差为0.3%～7.8%,其中苯、甲苯、二甲苯的检出限为(0.5～1)×10-3μg/ml。结论:该方法操作简便,对仪器设备要求不高,准确灵敏,适用于空气中总挥发性有机物和低浓度组分有机物的测定。     

饮用水中壬基酚的同位素稀释超高效液相色谱-串联质谱联用测定法

目的建立生活饮用水中壬基酚(nonylphenol,NP)的同位素稀释超高效液相色谱-串联质谱联用(UHPLC-MS-MS)测定方法。方法 NP浓度高于1μg/L的水样经滤膜过滤或高速离心后直接进行UHPLC-MS-MS分析;NP浓度低于1μg/L的水样经固相萃取小柱富集后进行UHPLC-MS/MS分析。结果当NP浓度高于1μg/L时,在1.0～100.0μg/L线性范围内,所得回归方程为y=0.116 3x+0.037 6,相关系数为0.999 8,检出限为0.15μg/L,定量下限为0.5μg/L;当NP浓度低于1μg/L时,在0.005～1.0μg/L线性范围内,所得回归方程为y=1.119 5x-0.001 6,相关系数为0.999 4,检出限为0.001 5μg/L,定量下限为0.005μg/L。该方法的平均加标回收率为92.5%～102.3%,RSD为0.9%～5.6%。结论该方法具有准确快速,灵敏度和准确度均较高,线性范围宽等优点,适用于生活饮用水中NP的检测。