16SrRNA序列分析技术对临床标本中疑难细菌的鉴定

目的：应用16S rRNA序列分析技术鉴定临床少见或疑难细菌,提高细菌鉴定的准确性。方法收集临床少见或疑难细菌44株,提取DNA,采用通用引物进行PCR扩增及目的片段基因测序,并将测序结果在核酸数据库中比对分析以确定菌种。结果44株临床少见或疑难细菌均扩增到16S rRNA目的基因片段并成功测序,40株(90．9%)鉴定到“种”,4株(9．1%)鉴定到“属”;其中常规方法与测序方法在“属”水平一致的有34株(77．3%),不一致的有10株(22．7%)。结论16S rRNA序列分析技术可以准确、快速地鉴定临床少见或疑难细菌,可以作为临床细菌鉴定的重要方法之一。     

产吲哚金黄杆菌金属β-内酰胺酶及其基因型检测

目的了解产吲哚金黄杆菌(Chryseobacteriumindologenes)耐药特性和金属β-内酰胺酶(MBL)的产酶率及其基因型。方法琼脂稀释法检测25株产吲哚金黄杆菌的最低抑菌浓度(MIC),增效法、改良三维试验法进行MBL表型检测,聚合酶链反应(PCR)筛查MBL和整合酶基因,全编码基因检测以及序列分析以确定IND型MBL的基因型;接合试验监测耐药基因是否具有可转移性,等电聚焦电泳(IEF)测定β-内酰胺酶等电点(pI)。结果产吲哚金黄杆菌对亚胺培南、美罗培南的耐药率为88.0%,但利福平、加替沙星、左氧氟沙星的耐药率均<12.0%;表型检测19株细菌产MBL,PCR初筛检测仅IND-like通用引物扩增出20株阳性,全编码基因分析,blaIND-1型9株,blaIND-2型10株,IND-like型MBL基因1株,其中5株blaIND碱基序列和演绎的氨基酸序列均发生改变;接合试验均为阴性,19株检测到1(17株)或2个(2株)pI值,携带blaIND-1的菌株(CI-5)经IEF和MBL表型检测均为阴性。结论产吲哚金黄杆菌具有很高的MBL检出率,本地区的产吲哚金黄杆菌以产IND-1、IND-2型MBL为主,blaIND可能存在蛋白质的不表达或低水平表达。     

金黄杆菌临床分离株β-内酰胺酶及耐药性分析

目的了解临床分离的金黄杆菌耐药特性和β-内酰胺酶产生情况。方法琼脂稀释法检测50株金黄杆菌对18种抗生素的MIC,改良的三纸片增效法和四槽、五槽三维试验法检测金黄杆菌金属β-内酰胺酶(MBL)、超广谱β-内酰胺酶(ES-BL)和AmpC酶。结果50株金黄杆菌对亚胺培南、美罗培南的耐药率为92%、88%,氨曲南为92%,阿米卡星和β-内酰胺抗生素的耐药率均大于40%,显示具有高度耐药性。加替沙星、左氧氟沙星和利福平的MIC90分别为4、8、8μg/ml,表现出很强的抗菌活性。环丙沙星、万古霉素、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦也具有良好的抗菌活性。50株金黄杆菌MBL、ES-BL、AmpC酶产酶率分别为68.0%、26.0%、0.0%。脑膜败血性金黄杆菌中产MBL73.7%,同时产MBL和ESBL42.1%,单产ESBL5.3%。产吲哚金黄杆菌MBL产酶率80.0%。结论金黄杆菌具有高度的多重耐药现象和MBL、ESBL高检出率,应该合理使用抗生素,保护易感人群,准确、及时地做好病原学诊断和耐药性监测并给予正确的治疗。     

肺炎克雷伯菌Ⅱ类整合子的分布及结构分析

目的 研究肺炎克雷伯菌中Ⅱ类整合子携带率,分析Ⅱ类整合子基因盒结构.方法 采用PCR法检测98株临床分离肺炎克雷伯菌中的Ⅱ类整合酶基因,检测Ⅱ类整合酶基因阳性菌株中的intI1、sat、ereA、aadA1、orfX、dfrA1、tnsE、tnsD、tnsC、tnsB、tnsA基因.结果 在1株肺炎克雷伯菌中检出Ⅱ类整合酶基因,阳性率为1%;该菌株同时携带intI1、sat、aadA1、orfX、dfrA1、tnsE、tnsD、tnsC、tnsB、tnsA基因;Ⅱ类整合子的结构与公布的AY639870.1、DQ176869.1、DQ275532.1、DQ268533.1序列中的Ⅱ类整合子结构完全相同.结论 肺炎克雷伯菌中Ⅱ类整合子的携带率较低,Ⅱ类整合子结构无新的变化.     

下呼吸道感染患者临床分离病原菌的分析

目的了解医院下呼吸道感染患者临床分离病原菌的分布情况。方法采用前瞻性研究和回顾性调查相结合的方法,对2000年~2003年临床下呼吸道感染患者痰培养阳性结果进行分析。结果下呼吸道感染以60 y以上患者为主,达到69.1%,病原菌前五位分别是真菌(27.5%)、葡萄球菌属(19.6%)、假单胞菌属(15.9%)、克雷伯菌属(6.8%)、不动杆菌属(5.4%),真菌感染由2000年的15.2%上升到2003年的32.5%。结论在对下呼吸道感染患者的治疗中,临床应加强对真菌、非发酵菌等机会致病菌感染的控制。     

浅谈数学建模与医学的关系

论述医学应用数学的必要性及数学在医学上的广泛应用。     

耐药柠檬酸杆菌属β-内酰胺酶检测

目的了解安徽医科大学第一附属医院临床分离的耐药柠檬酸杆菌属产β-内酰胺酶的情况。方法采用琼脂稀释法测定17种抗菌药物对临床分离的52株柠檬酸杆菌最低抑菌浓度（MIC）,用改良三维试验检测31株柠檬酸杆菌ESBLs、AmpC、MBL的产酶情况,再用聚合酶链反应（PCR）法扩增β-内酰胺酶基因。结果31株柠檬酸杆菌对多种抗菌药物耐药,三维试验检出24株菌产ESBLs,3株菌产AmpC酶,2株同时高产AmpC酶和ESBLs,未检出MBL;PCR检出20株菌携带blaTEM基因,1株菌携带blaSHV基因,8株菌携带blaCTX-M-1基因,15株菌携带blaCTX-M-13基因,5株菌携带blaCIT基因。结论31株多重耐药的柠檬酸杆菌同时产〉1种的ESBLs及高产AmpC酶,是其对β-内酰胺类药物耐药的重要原因。     

口服抗癫痫药物治疗对儿童血脂水平的影响

目的探讨口服抗癫痫药物对癫痫儿童血脂水平的影响。方法采用酶法和免疫透射比浊法测定25例口服抗癫痫药物治疗前后患儿血脂水平并与无内分泌、神经系统疾病37例儿童(对照组)进行比较。结果癫痫患儿服用抗癫痫药物后血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白、载脂蛋白B和脂蛋白(a)水平均高于对照组,血清高密度脂蛋白、载脂蛋白A水平低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论长期接受抗癫痫药物治疗的癫痫儿童服药后应动态监测血脂水平,若发现有升高趋势者应及时调节饮食或给予必要的药物降脂,以降低儿童成年后发生动脉粥样硬化及心、脑血管疾病的概率。     

血氨检测的临床适应证及其价值探讨

目的探讨血氨检测的一些临床适应病症并对其临床价值作一分析。方法采用干化学法检测血氨浓度。结果各型病毒性肝炎、肝门胆管癌、肝癌和健康对照组相比,血氨的检测结果明显偏高,差异有统计学意义(P0.05)。结论血氨检测可作为一些肝病、癌变、消化道出血等患者的主要检测指标,有助于病情的监测。