3.0 T MRI在直肠癌术前分期和评估中的应用价值

目的　探讨3.0 T MRI在直肠癌术前分期和评估中的应用价值。方法　收集经肠镜及病理确诊的76例直肠癌患者资料,通过术前MRI影像判断T分期、N分期并测量肿瘤下缘至肛缘距离,将MRI分期和评估结果与术后病理进行对照分析。结果　MRI诊断T1期9例,T2期19例,T3期32例,T4a期14例,T4b期2例。病理诊断T1期9例,T2期22例,T3期28例,T4a期15例,T4b期2例。MRI T1、T2、T3、T4a、T4b期诊断敏感度和特异度分别为67%和100%、68.2%和92.6%、89.3%和85.4%、80.0%和96.7%、100%和100%,两者一致性较好（Kappa=0.708,P＜0.05）。MRI诊断肠旁淋巴结转移36例,术后病理诊断肠旁淋巴结转移33例, MRI诊断肠旁淋巴结转移敏感度、特异度分别为85.2%和83.3%（Kappa=0.701,P＜0.05）。76例患者中有12例患者行Miles术,术前均通过MRI曲线测量技术测量肿瘤下缘至肛缘距离,与术后病理标本数据进行对比,差值≤7 mm,差异无统计学意义（t=0.480,P＞0.05）。结论　3.0 T MRI可准确地对直肠癌患者进行术前分期和评估,为临床诊疗提供帮助。     

3D高清全腹腔镜残胃癌切除术的临床疗效分析

探讨因良性疾病而行胃大部切除术后发生的残胃癌患者,应用3D全腹腔镜残胃癌切除术的临床疗效。　方法　收集2015年5月至2018年6月大连医科大学附属第二医院收治的19例行3D高清全腹腔镜残胃癌手术患者资料,所有患者既往因胃良性疾病而行胃大部切除术,本次入院术前均经胃镜和病理活检确诊为胃癌。采用回顾性横断面研究方法,对患者手术及术后恢复情况、病理情况、住院费用等进行统计学分析,并随访其生存及复发情况。　结果　（1）手术情况：19例残胃癌患者中,行3D高清全腹腔镜根治性残胃切除术18例,行3D高清全腹腔镜姑息性残胃切除术1例。19例行3D高清全腹腔镜残胃切除术患者,手术时间为（223.63±53.47）min,术中出血量为（136.32±82.95）mL,淋巴结清扫数目为（26.05±6.84）枚。（2）术后情况：术后离床活动时间（1.39±0.46）d,术后肛门首次排气时间（2.08±0.92）d,术后进流食时间（4.45±2.39）d,拔除引流管时间（9.95±5.28）d,术后住院时间为（13.74±9.69）d。总费用（80271.69±22536.91）元。患者术后出现食管空肠吻合口漏1例,十二指肠残端漏1例,切口感染1例,肺部感染2例,无围手术期死亡。（3）随访情况：对19例行3D高清全腹腔镜残胃切除术患者随访,随访时间3~40个月,中位随访时间17个月;随访期间死亡7例,存活12例。　结论　对于因良性疾病而行胃大部切除术后发生的残胃癌,应用3D全腹腔镜行残胃切除术是安全、有效的。     

成肌分化因子和5-氮杂胞苷联合诱导骨髓间充质干细胞向骨骼肌细胞分化的实验研究

目的研究大鼠骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）在体外定向分化为骨骼肌细胞的干预条件。方法取健康4周龄Wistar大鼠MSCs制成细胞悬液接种于培养瓶中，置于37C、5％CO2恒温培养箱中培养，倒置相差显微镜下观察，细胞布满瓶底即为1代，取第3代MSCs，以5-氮杂胞苷10μmol／L、成肌分化因子0．1ng／ml、转化生长因子β1 0.1ng／ml、胰岛素样生长因子12ng／ml进行联合诱导，使之分化。诱导后第9天，收集细胞，行MTT比色法、流式细胞仪和免疫组织化学检测鉴定细胞。结果原代培养的MSCs呈贴壁生长，3～5d呈集落样生长，5～7d后有体积不等的多突成纤维细胞、较大的扁平多角形细胞、中等的多角形细胞和较小的三角形细胞。培养12d后，细胞融合，铺满瓶底，MSCs形态变化不明显。联合诱导后，部分细胞死亡，生长缓慢；7d后见细胞明显增殖，体积逐渐增大，呈椭圆形、梭形或不规则形状；14d后，大量增殖的长梭形细胞开始增多；18～22d后，肌管数量增多，体积增大，核数亦明显增多，初生肌管与长梭形成肌细胞呈平行排列，间隔分布。MSCs免疫组织化学法测定CD44反应阳性，胞质呈棕褐颗粒，核周明显，CD34呈阴性反应；诱导后MSCs结蛋白、骨骼肌特异肌球蛋白均为阳性表达。流式细胞仪测定MSCs和诱导后MSCs大部分处于G0／G1期，分别占79．4％、62．9％，而G2／S／M期仅占20．6％、36．1％。根据MTT绘制生长曲线，可见MSCs生长速度明显高于诱导后的MSCs。两种细胞并未达到平台期，都有继续增殖的趋势。结论在体外，MyoD、5-氮杂胞苷可以诱导MSCs向骨骼肌细胞定向分化，并伴有结蛋白和骨骼肌肌球蛋白阳性表达；定向诱导后MSCs增殖期比例大，向骨骼肌细胞分化纯度更高。     

γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物的制备及其生物活性

目的研究一种低毒性的顺铂复合物:γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物(γ-PGAasp-CDDP),考察其体外性质和体内毒性,并探讨可能的作用机制。方法γ-聚谷氨酸与天冬氨酸发生酰胺化反应制备γ-聚谷氨酸-天冬氨酸复合物,核磁共振对其结构进行表征;化学法制备γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物;常规方法检测该复合物稳定性;透析法研究药物缓释效果;MTT法检测复合物体外抗肿瘤细胞活性;流式细胞仪检测其对细胞凋亡的作用;小鼠体内实验检测其体内毒性。结果成功制备γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物,顺铂的有效结合率达30%;该复合物在常温中性环境下稳定;30h时顺铂的累计释放率达到30%;细胞实验表明复合物对Bcap-37(人乳腺癌细胞)和BEL7404(人肝癌细胞)具有显著的杀伤作用,小鼠体内实验表明该复合物的毒性比游离顺铂低。结论γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物仍然保留了游离顺铂的生物活性,在杀伤肿瘤细胞、引起细胞凋亡的同时,大大降低了体内毒副作用,其作用机制可能与实体瘤组织的高通透性、滞留效应(EPR效应)以及药物缓释作用有关,因此该复合物具有潜在的临床应用价值。     

骨髓间充质干细胞培养并向骨骼肌诱导分化的实验研究

目的 研究大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）的定向分化及其在体内的形态发育情况。方法 Wistar大鼠24只，向其左胫前肌处注射0．2ml无水乙醇，致其无菌坏死，右胫前肌注射等渗盐水0．2ml作为对照，制成动物模型后备用；取大鼠第3代BMSCs，5-氮杂胞苷、成肌调节因子（MyoD）、转化生长因子-β1（TGF-β1）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）联合进行诱导分化。诱导后第9天，收集BMSCs，用BrdU标记并诱导后注射到大鼠双下肢胫前肌处，分别在3，6，9和12d取材进行形态观察和免疫组织化学检查。结果 注射诱导后3d，实验组的成活率明显高于注射单纯注射BMSCs的对照组，BrdU标记细胞向骨骼肌分化，结蛋白、骨骼肌特异肌球蛋白均为弱阳性表达，6，9d可见BrdU标记细胞向骨骼肌分化，结蛋白、骨骼肌特异肌球蛋白阳性表达，第9天更为明显，注射后12d后可见新生骨骼肌细胞形成肌小管，细胞核结蛋白、骨骼肌特异肌球蛋白强阳性表达。结论 大鼠损伤肌肉的微环境中，BMSCs可向骨骼肌定向分化，并伴有结蛋白和骨骼肌肌球蛋白阳性表达；定向诱导后BMSCs在体内成活率高，增殖速率快，向骨骼肌分化纯度更高。     

吸入类药物临床前研究中鼻组织脱钙技术优化：用于大鼠鼻黏膜组织病理学检查

目的 研究不同脱钙液对大鼠鼻组织的脱钙作用及其病理切片染色效果。方法 选择10%乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA）、10%甲酸、5%硝酸脱钙液3种不同脱钙液,在室温静置及微波条件下,对大鼠鼻组织的脱钙时间和脱钙效果进行比较分析,综合评估骨组织经不同脱钙方法后制成病理切片质量。结果 常温条件下鼻组织经过EDTA脱钙液所需脱钙时间最长,微波条件下鼻组织经硝酸脱钙液所需脱钙时间最短,经EDTA脱钙液的鼻组织切片质量、HE染色、MASSON染色和免疫组化染色中质量最佳,硝酸脱钙液的鼻组织的切片质量最差,甲酸脱钙液的鼻组织HE染色效果较佳,MASSON和免疫组化染色质量略差。结论 EDTA脱钙液配合微波进行的鼻组织脱钙,脱钙效率明显提升,且切片和染色效果俱佳。     

组织与脱落细胞中的microRNA表达量检测指示miR-203在口腔扁平苔藓中的潜在作用

口腔扁平苔藓（OLP）是一种癌前病变和慢性炎症,其损伤具有组织学异质性,多种类型的细胞参与其发生与恶性转化,而其分子机制尚不明确。本研究检测了来自于OLP患者和健康志愿者口腔组织和脱落细胞中miR。96／182／183簇、miR-203、miR-375、miR-769—5p的表达水平,并通过双标图法评价了显著差异表达的miRNA与OLP的相关性。研究发现。相对于志愿者正常组织,miR．203在患者病损区组织中显著高表达,其变化程度明显高于其它miRNA。与此相反,miR-203及miR-96／182／183簇的表达在脱落细胞中则没有显著差异,提示OLP病损区中不同类型细胞对miRNA表达的调控不同,可能与OLP的组织学异质性相关。双标图分析表明miR-203与miR-96／182／183簇的表达量在患者病损区组织中呈正相关。本研究结果表NmiR-203不仅在分子层次显示TOLP的组织学异质性,还可能成为潜在的诊断标志物和治疗药物靶标。     

半去势雄性大鼠外周血中睾酮代偿性变化的研究

目的 研究半去势雄性大鼠外周血中睾酮水平变化规律.方法 取20只性功能正常的雄性SD大鼠,随机分为正常组与半去势组(n=10),分别行右侧睾丸摘除术与假手术后,第2,3、5、7、9周放射免疫法检测外周血中睾酮(T)、促黄体生成素(LH)、促卵泡刺激素(FSH)含量.结果 在各时间段内,半去势组T含量显著低于正常组(P<0.05),半去势组第7周显著高于第2、3、5、9周(P<0.05),正常组各周间差异则无统计学意义(P>0.05).半去势组LH在2、3、5、7、9周后均显著高于正常组(P<0.05),在各时间段内,半去势组第7周显著高于2、3、5、9周(P<0.05),而第3、5周与第9周间差异无统计学意义(P>0.05).半去势组与正常组间FSH含量差异无统计学意义(P>0.05),半去势组2、3、5、7、9周间差异亦无统计学意义(P>0.05)结论半去势后T水平显著降低,其代偿性升高于现象9周后回落,其代偿机制可能与LH相关.     

125I放射性粒子植入治疗恶性纤维组织细胞瘤术后肺转移瘤的短期效果观察

目的 探讨CT引导下经皮穿刺放射性125I粒子肿瘤内植入治疗恶性纤维组织细胞瘤(MFH)术后肺转移瘤的短期临床效果.方法 选择MFH术后肺转移瘤患者8例,转移病灶28个,行CT引导下经皮穿刺肿瘤内放射性125I粒子植入,处方剂量80 Gy,粒子活度0.7 mCi(2.59×107 Bq).粒子植入术后6个月复查胸部CT,与粒子植入前比较肿瘤变化,按照国际标准判定疗效.结果 接受粒子植入的瘤体平均照射剂量(172.9±39.9)Gy,D100( 77.7±10.2)Gy,D90 (97.2 ±6.8)Gy.有效率为82.1％(23/28),患者术后生存10.0 ～26.0个月,平均(14.6±3.5)个月,中位生存期13.0个月.结论 放射性粒子对MFH肺部转移病灶短期局部效果明显.