肌营养不良蛋白病遗传学诊断专家共识

Dystrophin基因的变异可导致X连锁隐性遗传的肌肉疾病, 包括进行性杜兴(杜氏)肌营养不良(DMD)、贝克(贝氏)肌营养不良(BMD)和扩张型心肌病, 严重威胁人类的生命和健康。遗传学诊断对于这类患者的诊断、治疗、预防具有十分重要的价值。如何合理选择、规范应用各项基因检测技术是临床医师必须掌握的技能。本共识经过同行专家的共同探讨, 结合国内外经验和指南, 从遗传学诊断角度, 针对dystrophin基因检测技术的选择、检测策略、检测流程等方面提供指导性建议。     

Ⅰ型肢根型点状软骨发育不良家系的遗传学分析

目的分析1个Ⅰ型肢根型点状软骨发育不良家系过氧化物酶生物合成因子7(peroxisomal biogenesis factor 7,PEX7)基因突变情况,探讨其致病原因。方法采集先证者留存羊水样本,先证者父母及其外祖父母、舅舅和50例体检健康者外周血,提取基因组DNA,进行全外显子组测序及生物信息学分析,采用Sanger测序法进行验证。结果先证者母亲及先证者外祖母存在PEX7基因c.45₅2dupGGGACGCC位点杂合突变,先证者父亲存在PEX7基因c.527-1G>C剪接位点杂合突变,先证者存在PEX7基因c.45₅2dupGGGACGCC位点和c.527-1G>C剪接位点复合杂合突变;先证者舅舅及先证者外祖父、50例体检健康者2个位点均为野生型。PEX7基因c.45₅2dupGGGACGCC位点突变为已报道的致病性突变;c.527-1G>C剪接位点突变未报道,为可能致病性突变。结论 PEX7基因复合杂合突变可能是该家系Ⅰ型肢根型点状软骨发育不良患儿的致病原因。     

内蒙古鄂温克族群体X染色体九个短串联重复序列位点的遗传多态性及法医学应用价值评估

目的研究内蒙古鄂温克族人群X染色体上9个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)位点(DXS6789、DXS101、DXS8378、DXS7132、DXS7133、DXS7423、DXS6804、DXS6799、HPRTB)的多态性分布及法医学应用价值。方法采取内蒙古鄂温克民族群体的99名健康无关个体静脉血,提取DNA,经PCR扩增,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染进行等位基因分型;SPSS13.0软件计算各位点基因型频率和等位基因频率,并检验其分布差异有无统计学意义;Genepop软件进行Hardy-Weinberg平衡检验;Fstat软件计算基因多态性、固定指数并检验固定指数偏离平衡值的程度;Powerstat软件计算各种法医学应用指标。结果获得内蒙古鄂温克族人群X染色体上9个STR位点等位基因频率分布的数据;9个X-STR位点中DXS6789、HPRTB位点的多态性和分化程度较低;DXS7132位点在不同民族中基因分布差异无统计学意义。结论9个X染色体STR位点中,DXS101、DXS8378、DXS7132、DXS7133、DXS7423、DXS6804、DXS6799等7个位点有较高的遗传多态性和个体识别率,在个体识别和女孩的亲权鉴定中有应用价值,对疾病相关研究有实际意义。DXS7132位点在不同民族中分布差异无统计学意义,在用X染色体STR位点标记判别鄂温克族与其他民族的差异时应该剔除。     

人类白细胞抗原-Ⅰ类基因位点多态性与河南地区儿童急性淋巴细胞白血病相关性研究

目的探讨人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)-Ⅰ类基因A,B,C位点多态性与河南地区儿童急性淋巴细胞白血病发生的相关性。方法采用序列特异性聚合酶链式反应方法对河南地区98例急性淋巴细胞白血病患儿(观察组)和373例正常对照个体的(对照组)HLA-A,B,C位点的多态性进行检测。结果 2组受试者共检出HLA-A等位基因型16种,HLA-B等位基因型37种,HLA-C等位基因型15种;其中观察组检出HLA-A,B,C等位基因型分别13,26,13种,而对照组分别检出15,36,14种;HLA-B*07在观察组中的频率0.015明显低于对照组的频率0.056(P=0.026,OR=0.261,95%CI:0.080～0.850,χ2=8.734);除HLA-B*07外,HLA-A,B,C其他各等位基因在观察组和对照组中分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HLA-B*07在河南儿童急性淋巴细胞白血病发生中可能起保护作用。     

1例1p36微缺失综合征的产前诊断及遗传学分析

目的明确1例胎儿染色体拷贝数目变异的性质,探讨其发生机制。方法高龄孕妇1例,行羊膜腔穿刺术抽取胎儿羊水,并采集孕妇及配偶静脉血,采用常规G显带分析羊水细胞及外周血染色体核型,利用微阵列比较基因组杂交(array comparative genomic hybridization,aCGH)技术分析胎儿及其父母基因组DNA拷贝数目变异,使用RepeatMasker软件分析断裂点区域序列特征,并与美国加州大学圣塔克鲁兹分校基因组数据库进行比较。结果 G显带核型分析结果显示,胎儿及其父母染色体核型未见异常;aCGH分析结果显示胎儿1p36.33-36.32区域存在2.8 Mb杂合性缺失,且包含4个功能基因,其父母基因组DNA未见拷贝数目异常;断裂点区域序列分析结果显示,断裂点区域序列GC含量升高,含有7个富含GC的短串联重复序列,包含12种Alu重复单位共32个Alu序列。结论胎儿1p36区域缺失为新发突变,具有致病性,可能与富含GC的短串联重复序列参与缺失的形成有关。     

先天性肾囊性疾病的产前遗传学诊断探索

目的:总结胎儿期肾囊性病的产前遗传学诊断情况,探索先天性囊性肾病产前遗传学诊断的临床可行性及意义。方法:纳入2017年6月至2019年9月在河南省人民医院诊断为先天性囊性肾病的25例胎儿。经羊膜腔穿刺术抽取羊水标本,17例仅进行了染色体微阵列分析（chromosome microarray analysis,CMA）检...     

原发性高血压患者肿瘤坏死因子-α基因多态性与动脉粥样硬化的相关性

目的:探讨肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)基因-308G>A,-238G>A多态性与原发性高血压动脉粥样硬化的关系.方法:对河南汉族人群212例原发性高血压患者进行颈动脉超声检测,根据检测结果将患者分为颈动脉粥样硬化组和颈动脉正常组,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测TNF-α基因-308G>A,-238G>A多态性.结果:颈动脉粥样硬化组与颈动脉正常组TNF-α-308G>A及TNF-α-238G>A基因型及等住基因的分布比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论:TNF-α-308G>A,-238G>A基因多态性与河南汉族原发性高血压动脉粥样硬化的发生有关.     

河南地区汉族人群复发性流产患者HLA-DRB1、DQB1等位基因多态性的研究

目的探讨复发性流产易感性与人类白细胞抗原(HLA)DR、DQ区域基因多态性的关系。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP),分析200例复发性流产患者(患者组)和200例无不良妊娠史正常妇女(对照组)的DRB1和DQB1基因型。结果患者组中的DQB1*03(39.25%)等位基因频率显著高于对照组(32.5%)(P=0.047<0.05,RR=1.208),DQB1*05(14%)等位基因频率较对照组显著降低(22.75%)(P=0.001<0.05,RR=0.615);患者组中DRB1*09(14%)等位基因频率显著高于对照组(9.25%)(P=0.036<0.05,RR=1.514),DRB1*12(8.5%)等位基因频率较对照组显著降低(14%)(P=0.014<0.05,RR=0.607)。结论河南地区汉族人群中DQB1*03、DRB1*09可能是复发性流产的易感基因,而DQB1*05、DRB1*12可能对复发性流产的发生有保护作用。     

μ阿片受体一号外显子SNP多态性与海洛因依赖关联研究

目的探讨西安汉族人群中μ阿片受体基因（OPRM1）一号外显子基因多态性与海洛因依赖关联性。方法采用病例对照研究策略,分别对102名海洛因依赖者（海洛因依赖组）和103名健康对照者（健康对照组）的OPRM1基因一号外显子（exon1）进行测序分析,从测序结果中确定出存在于这一区域中的单核苷酸多态性（SNP）位点,并分析海洛因依赖者OPRM1受体基因一号外显子上的多态性位点与海洛因依赖的相关性。结果共鉴定出两个SNP位点,分别为rs1799971（A118G）和rs6912029（G172T）,单位点关联分析显示两位点在两组之间的分布并不存在显著性差异;单体型分析两位点3种单体型均与海洛因依赖间无关联。结论 OPRM1基因一号外显子区域多态性位点与海洛因依赖无显著相关性。     

100例两种无痛人工流产临床效果分析

目的观察两种不同方法无痛人工流产的临床效果。方法将6～10周需终止妊娠并自愿要求无痛人工流产的健康妇女100例随机分为两组,每组50例,A组采用丙泊酚联合芬太尼、阿托品静脉全麻无痛人工流产,B组采用利多卡因联合阿托品宫颈封闭清醒无痛人工流产,比较两组的镇痛效果、麻醉监测、手术时间、出血量、人工流产综合征发生率及其对呼吸循环的影响。结果 A组镇痛效果显著,对呼吸循环有一定的抑制作用,使用时需专职麻醉师全程监护,B组镇痛效果较差,对呼吸循环无抑制作用,不需专职麻醉师参与。结论丙泊酚联合小剂量芬太尼、阿托品镇痛效果满意,更适合无痛人工流产,值得推广使用。