TaqMan~实时定量RT-PCR检测G3型轮状病毒VP7基因方法的建立

目的:建立一种检测G3型轮状病毒VP7基因的TaqMan实时定量RT-PCR方法。方法:设计轮状病毒VP7基因型特异性引物和探针,采用体外转录RNA为标准品,建立TaqMan实时定量RT-PCR方法。结果与结论:本检测方法快速、灵敏且重复性好,可以对107～101copies.μL-1轮状病毒VP7基因进行有效检测,为G3型轮状病毒的检测和定量提供了有用的工具。     

灵芝双向固体发酵草乌后菌质抗炎镇痛作用研究

目的研究灵芝双向固体发酵草乌后菌质的抗炎镇痛作用。方法运用双向固体发酵技术获得灵乌菌质,采用角又菜胶致炎法、二甲苯致耳肿胀法、扭体法等多种动物模型和方法考察不同剂量灵乌菌质的抗炎镇痛作用。结果灵乌菌质能明显减少小鼠腹腔注射醋酸引起的扭体反应次数,与传统湿热法炮制品组相比,灵乌菌质高剂量组对小鼠疼痛反应的抑制作用差异显著（P〈0．05）。抗炎作用方面,灵乌菌质能够明显抑制二甲苯引起的小鼠耳肿胀及角叉菜胶引起的大鼠足跖肿胀。在高剂量时,灵乌菌质对小鼠耳肿胀的抑制作用明显优于传统湿热法炮制品,存在显著性差异（P〈0．01）,而低剂量灵乌菌质在致炎后4h和5h内明显降低大鼠足跖容积,对大鼠足跖肿胀的减轻作用显著优于炮制品（P〈0．01）。结论草乌与灵芝所构成的发酵组合灵乌菌质的抗炎镇痛作用与单品相比具有不同程度的增强。     

带血供脂肪筋膜瓣对骺板缺损骨桥形成的预防作用

目的 制作未成年兔的股骨远端中心型骺板缺损模型,观察带血供脂肪筋膜瓣充填骺板缺损后对骨桥形成的预防作用.方法 用3.5mm克氏针造成兔一侧股骨远端中心型骺板缺损,另一侧作正常参照.实验动物分为3组,A组用带血供脂肪筋膜瓣填塞骺板缺损;B组用游离脂肪筋膜瓣填塞;C组不做任何填塞,为单纯缺损组.20周后,取3组手术侧股骨长度、膝关节外翻角与健侧的差值进行比较,评价股骨的畸形.并通过组织学的方法观察骨桥形成及骺板自身修复情况.结果 3组的手术侧股骨长度较对侧正常股骨短,A、B、C组短缩的程度分别为(1.73±1.37)、(3.89±1.49)、(6.52±1.62) mm,3组之间差异有统计学意义(P＜0.05);3组手术侧股骨与健侧对比均有不同程度的外翻畸形,外翻角的差异分别为A组(3.73±3.41)°,B组(6.34±6.07)°,C组( 18.38±10.65)°,C组外翻畸形明显,而A、B两组之间无统计学意义(P＞0.05).组织学观察,A组脂肪筋膜瓣未被吸收,并有较规则的骺板再生;B组脂肪筋膜瓣大部分吸收,与骺板之间有骨桥形成,骺板再生不规则;C组有明显骨桥形成.结论 带血供脂肪筋膜瓣对中心型骺板缺损后的骨桥形成有明显的预防作用,且能减小骺板缺损后股骨的畸形程度.     

KW组合式外固定骨延长器在下肢截骨延长及骨迁移中的应用

[目的]探讨一种新型的组合式外固定延长系统在肢体短缩畸形及骨缺损中应用的方法及治疗效果。[方法]在Hoffmann II型外固定器基础上,设计出新型的KW组合式外固定骨延长器,并治疗15例肢体短缩及骨缺损患者。肢体短缩者10例,平均短缩8.7 cm(6.0～22);外伤性骨骺损伤后遗症4例,骨髓炎后遗症所致下肢不等长3例,其中4例肢体延长同时行预防性跟腱延长术,1例合并足外翻畸形行胫距关节融合术矫正,3例合并膝内翻畸形,同期或先行膝内翻截骨矫形手术;3例脊髓灰质炎后遗症合并马蹄内翻足畸形,行三踝关节融合术矫正。应用骨迁移技术治疗骨缺损患者5例,平均骨缺损长度7.3 cm(5.0～8.5 cm),其中2例合并足下垂,延长同时行跟腱延长术矫正。[结果]所有患者均达到术前预定的肢体延长长度,下肢畸形得以矫正,骨缺损修复。平均延长或迁移7.5 cm(5.5～21 cm),平均外固定时间89 d(68～343 d);平均外固定指数16.3 d/cm(9.0～32.5 d/cm),平均骨愈合指数39 d/cm(30～62 d/cm)。[结论]KW组合式外固定骨延长器操作简单,是用于治疗肢体短缩畸形和骨缺损的理想器械。     

中药血清药理学研究中血清处理方法的探讨

目的以具有子宫兴奋作用的坤血安作为分析药物,观察不同方法处理的空白血清以及给予坤血安后采集的血清对小鼠离体子宫的影响.方法坤血安含药血清的制备:给小鼠灌服坤血安中间体470 mg/kg,50 min后小鼠摘眼球取血,分离血清,分别采用56℃加热30 min处理(加热处理)、50%乙醇沉淀(醇沉)、56℃加热30 min处理后再以50%乙醇沉淀(加热后再醇沉)、50%乙醇沉淀后再56℃加热30 min处理(醇沉后再加热)等方法处理血清;空白血清实验前灌服生理盐水,再如前法制备及处理血清.所得血清加入恒温浴槽中,以PowerLab/8S系统观察受试血清对小鼠离体子宫平滑肌活动的影响.结果不同方法处理后的空白血清中,以加热后再醇沉及醇沉后再加热2种方法所处理血清对离体子宫的干扰最小,且对药物作用影响不大.结论在此实验中采用加热后再醇沉法或醇沉后再加热法制备血清比较适宜.     

成人股骨头坏死带血供植骨术后持续被动功能锻炼的临床观察

目的探讨成人股骨头坏死带血供植骨术后,持续被动功能锻炼(continuous passive motion, CPM)对髋关节功能恢复的作用。方法对83例不同时期的股骨头缺血性坏死患者在行带血供植骨手术后,施行CPM下肢关节器进行持续被动屈伸功能锻炼,并辅之以滑板活动,作内收、外展功能锻炼,使髋、膝关节逐步由被动活动过渡到主动活动,直至正常或接近正常。结果除2例因自身疾病疗效不佳外,其余 81例均取得满意疗效。结论股骨头坏死植骨术后,CPM功能锻炼能防止因长时间制动所致的肌肉萎缩、关节粘连、疼痛、废用性骨质疏松和进行性关节炎,对于最大限度地恢复关节功能、提高生活质量,有积极的作用。     

髂腹股沟神经皮支营养血管皮瓣的应用解剖

目的:为髂腹股沟神经皮支及其营养血管为蒂岛状皮瓣的临床应用提供解剖学基础。方法:在27侧经红色乳胶液灌注的会阴及下肢标本上解剖观测髂腹股沟神经皮支及其营养血管的来源、走行、分布、吻合及外径,2侧成人新鲜标本灌注墨汁,观测营养血管的墨染范围。结果:髂腹股沟神经来源于第1腰神经腹侧支,其皮支从腹股沟管浅环穿深筋膜,穿出点横径为(1.89±0.47)mm,穿出时位于精索或子宫圆韧带下方。髂腹股沟神经皮支营养血管主要来源于阴部外浅动脉的升支、降支及股内侧支,并沿途发出皮支营养周围皮肤。结论:可以设计以髂腹股沟神经营养血管为蒂的岛状皮瓣。     

高效液相色谱法测定子宫内膜细胞释放的前列腺素F_(2α)

目的:建立测定子宫内膜细胞在缩宫素(OT)存在的条件下分泌PGF2的方法。方法:采用柱α前衍生法对荧光衍生化试剂4-溴甲基-6,7-二甲氧基香豆素(BDMC)与PGF2的反应条件进行研α究。探讨荧光产物的色谱分离条件。结果:建立了测定子宫内膜分泌的微量PGF2的方法,测定了αOT诱导的大鼠子宫内膜细胞产生的PGF2。结论:本方法灵敏,最小检测限可达0.1ng,精密度α高,重复性强,可用于细胞水平或其他生物样品中前列腺素F2的测定。α     

负压封闭引流在毁损性断肢再植中的应用

目的 为扩大断肢再植的适应证,探讨负压封闭引流(VAC)在毁损性断肢再植中的应用. 方法 2000年11月～2006年6月,对24例26侧毁损性离断肢体重建骨骼结构,修复肌腱、神经,吻合血管或通过自体静脉移植恢复血液循环,对所遗留的大面积软组织缺损,运用VAC系统Ⅰ期封闭创面,Ⅱ期主要以中厚皮片移植或肌瓣、肌皮瓣转位修复. 结果随访7～20个月,再植肢体全部存活.8例再植处发生骨不连,行自体骨移植修复.12侧小腿离断中6侧发生马蹄内翻畸形,行三关节融合矫正.所有再植肢体均获得满意的外观和功能.结论 毁损性断肢可再植成活并恢复大部分功能,VAC可解决再植术中软组织缺损的难题.     

甲醛对小鼠睾丸各阶段生殖细胞致突性的研究

目的　观察甲醛 (Formaldehyde)对小鼠睾丸各阶段生殖细胞的致突毒性。　方法　选用雄性昆明小鼠 ,采用腹腔注射染毒 ,染毒的甲醛剂量分别 0 .2 0、2 .0 0、2 0 .0 0 mg/ kg· bw。每天 1次 ,连续 5 d。第 6 d和 15 d分别处死动物进行 SCE和微核试验 ,判断生殖细胞的致突毒性。　结果　甲醛的中、高剂量组早期精细胞微核率显著升高 (P<0 .0 5 ) ;同时精原细胞 CE交换率也显著升高 (P<0 .0 5 )