肝移植术后早期细菌感染流行病学分析

目的 探讨肝移植术后细菌感染的流行病学特征.方法 回顾性分析该院2003年3月～2006年12月53例肝移植术后细菌感染的特征.结果 53例肝移植受者36例发生感染,感染率67.9%.感染组死亡相对危险度是对照组2.14倍,感染最常见于肺部,时间为术后2～42d,常见致病菌为大肠埃希氏茵.送检795份标本,阳性386份,阳性率50.9%.最常见感染标本为痰液,占31.9%.两个或以上部位感染32例,占88.9%.革兰阴性菌大部分对氨基糖苷类、β-内酰胺酶抑制剂复合制剂、碳青霉烯类敏感,对喹诺酮类、三代、四代头孢菌素耐药;革兰阳性菌对青霉素类、喹诺酮类和碳青霉烯类耐药,仅对万古霉素敏感.结论 肝移植术后感染率和病死率高,感染最常见于肺部,致病菌为耐药菌,对多种常用抗生素耐药.     

利卡汀治疗原发性肝癌72例近期临床疗效观察

[摘要] 目的 探讨利卡汀和利卡汀联合碘油及化疗药物治疗原发性肝癌（PHC）的近期临床疗效。方法 已确诊的PHC患者72例，采用肝动脉灌注介入术（TACE），其中单纯利卡汀介入治疗50例，利卡汀＋碘油＋吡柔比星＋丝裂霉素介入治疗22例，检测治疗前和治疗后1个月AFP值、肿瘤大小、肝肾功、外周血白细胞、红细胞、血小板的变化。结果 单纯利卡汀组治疗1个月后，肿瘤瘤体明显缩小、AFP有所下降但无统计学意义；外周血白细胞、红细胞、血小板、肝肾功无明显变化。利卡汀＋碘油＋化疗药治疗1个月后肿瘤瘤体和AFP明显下降，外周血白细胞、红细胞、血小板、肝肾功无明显变化。结论 两组介入治疗PHC，均能使瘤体缩小、AFP下降，以利卡汀＋碘油＋化疗药效果更好，治疗前后外周血白细胞、红细胞、血小板、肝肾功无明显变化，表明利卡汀和（或）利卡汀联合碘油及化疗药介入治疗中晚期原发性肝癌近期疗效显著、安全。 [关键词] 利卡汀 原发性肝癌 导管动脉化疗栓塞术     

氧疗对肝移植围手术期患者肺动脉压及氧动力学的影响及护理

目的 探讨背驮式肝移植围手术期氧疗对患者肺动脉压和氧动力学的影响及总结给氧护理要点。方法 2006年6月～2007年10月对10例肝移植患者实施氧疗，在病情稳定时停用呼吸机，观察患者在停止氧疗60min前后血流动力学变化情况。结果 患者吸氧期间比停止吸氧后60min平均肺动脉压（mPAP）明显降低（P〈0．01），氧分压（PaO2）明显升高（P〈0．001）。结论 背驮式肝移植围手术期吸氧可降低患者肺动脉压和提高PaO2。给氧过程应调节好氧流量，并观察用氧后病情的变化。     

床旁超声在肝移植术后早期并发症诊治中的价值

目的研究床旁超声在肝移植术后早期并发症诊治中的价值。方法应用彩色多普勒超声连续系统检查了12例患者肝移植术后肝脏及胸腹腔,重点检测门静脉、肝动脉、肝静脉及下腔静脉,胆管、胸腹腔。结果肝移植术后超声检查发现的常见并发症有移植肝保存性损伤并流出道梗阻1例,肝淤血2例,胆道并发症3例,腹腔积液12例,胸腔积液12例,超声引导介入检查及治疗8例。结论床旁超声在肝移植术后早期并发症诊治中起到积极有效的作用。     

重组抗HBsAg单链抗体在HBV转基因小鼠体内作用的研究

目的　研究重组人源抗HBsAg单链抗体 (HBscFv)在HBV转基因小鼠体内的活性作用 ,探讨HBV转基因小鼠作为HBsAg特异性抗体的结合活性评价模型的可行性。方法　工程菌表达的HBscFv包涵体经固定化金属螯合层析和分子排阻层析两步纯化后 ,分步透析复性。复性后的HBscFv(0 .9g L)经尾静脉注射HBV转基因小鼠 ,一定时间后测定鼠血清中HBsAg的浓度 ,计算抗体注射前后HBsAg浓度下降的百分比 (结合率 ) ,同时以人血源HBsAbIgG(40U ml)和生理盐水作为对照。结果　两步纯化获得纯度达到 98%的重组HBscFv。HBscFv制品能够结合转基因小鼠体内的HBsAg,其结合率为 (30 .4 7± 9.85 ) % ,与生理盐水组差异有显著性 (P <0 .0 0 1) ,与HBsAbIgG组差异无显著性(P >0 .0 5 ) ;对照品HBsAbIgG的结合率为 (39.0 0± 7.4 3) % ,与生理盐水组差异也有显著性 (P <0 .0 0 1)。比较HBscFv和HBsAbIgG的结合率及其浓度 ,求得HBscFv的结合效价为 31.5 8U mg。结论　HBscFv在转基因小鼠体内具有特异性结合HBsAg活性 ,HBV转基因小鼠可发展为评价HBsAg特异性抗体的体内结合活性的候选模型。     

构建分泌型HBsAg单链抗体在毕赤酵母菌中的表达研究

为了从巴氏毕赤酵母中获得分泌表达的非融合人源抗HBsAg单链抗体 (HBscFv ) ,设计引物从pGEM HBscFv上扩增HBscFv,亚克隆至P pastoris表达载体pPICZαA中 ,然后转化P pastorisGS115、KM71,菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定转化子 ,甲醇诱导目的蛋白表达并对其性质进行鉴定。结果发现 ,3%～ 5 %的转化子具有 2 0 0 0mg/LZeocin抗性 ;转化子诱导后 ,可以合成并分泌相对分子质量为 32 0 0 0的HBscFv ,表达量占酵母培养上清中总蛋白的 2 2 % ;酵母表达产物可被针对大肠杆菌来源HBscFv的单克隆抗体特异性识别 ,并具有结合HBsAg活性。     

胎牛骨髓多肽对小鼠和人T细胞功能的影晌

用F60透析柱从胎牛骨髓中提取出一组分子量在10kD的多肽物质,以CorA诱导的淋巴细胞增殖反应研究其对小鼠T细胞功能的影响,发现该物质能促进ConA激活的小鼠淋巴细胞增殖反应。研究还发现,胎牛骨髓多肽在终浓度为5.0—10mg/ml时对人淋巴细胞表达mIL-2R有促进作用。从而提示该物质对机体细胞免疫功能具有促进作用。     

重组人抗-HBs单链抗体与白细胞介素2融合蛋白的表达、纯化及活性鉴定

目的 探讨抗-HBs单链抗体与白细胞介素2融合蛋白的表达、纯化及活性鉴定方法。方法 将构建的目的蛋白表达工程菌M15[pQE-ScFv-IL-2]经IPTG诱导后,通过SDS-PAGE及Western blot分析鉴定表达产物;再通过Ni^2 离子金属螯合亲和层析和离子交换层析纯化目的蛋白;采用逐步透析法对纯化后的目的蛋白进行复性后,用间接ELISA实验和CTL-2细胞增殖反应实验对其进行活性鉴定。结果 SDS-PAGE及Western blot分析结果显示有分子量约为43kD的重组蛋白表达,表达量可达18％;两步纯化后凝胶成像分析目的蛋白的纯度达到95％;复性后纯化产物的活性鉴定结果表明,重组抗体融合蛋白既能与HBsAg特异性结合,也能刺激CTLL-2细胞增殖。结论 获得的抗体融合蛋白兼具亲本分子的双特异性,为慢性乙型肝炎及相关疾病的导向治疗研究打下了良好基础。     

工程化人源性抗-HBs Fab抗体的制备、纯化和鉴定

用获得的表达人源性抗 ＨＢｓＦａｂ片段的大肠杆菌,发酵表达该抗体的可溶Ｆａｂ片段。以羊抗人Ｆａｂ抗体偶联ＨｉＴｒａｐ柱,用Ａｃｔｉｓｅｐｅｌｕｔｉｏｎｍｅｄｉｕｍ作为洗脱液,在ＦＰＬＣ上纯化。用ＳＤＳ ＰＡＧＥ及蛋白印迹法分析、鉴定,用固相放兔法检测其活性单位。蛋白印迹及ＥＬＩＳＡ显示转化菌株有抗 ＨＢｓＦａｂ片段的表达。经ＦＰＬＣ纯化的抗体Ｆａｂ片段呈单一峰,与抗 ＨＢｓ阳性血清相似。纯化后的抗体Ｆａｂ片段达到电泳纯,具有较高的活性。