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1.
2.
3.
为探讨乳猪肝细胞分离、体外培养的条件及其生长方式。方法用两步灌注结合胶原酶消化法分离乳猪肝细胞,用激素条件培养基进行体外培养,EDTA消化传代,测定细胞的活性,观察其生长方式,群体倍增时间及蛋白质和DNA的合成。结果在胶原酶浓度为0.075%,细胞的收获和成活率较高,原代和传代的肝细胞生长良好,原代肝细胞倍增时间较短,DNA和蛋白质的合成也较活跃,与传代细胞相比,无明显差别(P>0.05)。结论乳猪肝细胞分离所需的胶原酶浓度较高,在一定的条件下,能分裂增殖,且能进行传代,同时能维持其基本特性。 相似文献
4.
人源性抗HBs可变区单链抗体基因的构建及核酸序列测定 总被引:6,自引:0,他引:6
将通过噬菌体显示技术获得的一株人源性抗HBs Fab抗体基因重链和k轻链的可变区用编码柔性肽的Linker使其连接成单链,克隆入中间载体,并进行核酸序列测定,为其后的表达及双功能抗体的构建打下基础。 相似文献
5.
6.
肝毒清方单味药水提物的体外抗HBV作用 总被引:8,自引:0,他引:8
采用 2.2 15细胞为靶细胞,Ara-Amp为阳性对照药,观察肝毒清方单味药不同浓度水提物对2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg的影响。结果表明,白马骨、木芙蓉、毛鸡屎藤、白花丹、山竹子、秋海棠水提物在一定浓度范围内,对2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg有抑制作用。 相似文献
7.
近段时间以来,25岁的小王常常感到全身乏力,胃口很差。检查发现,过去只是"小三阳"的他,已经有了明显的脂肪肝和肝硬化表现。经医生检查后告知:正是由于他长期不吃药、乱进补从而导致肝脏负担加重,病情迅速发展。专家介绍,目前我国"小三阳"发病率非常高,"如果诊断患有‘小三阳',一定要到正规医院检查、治疗,如果自己盲目食补,可能导致本来就脆弱的肝脏平衡进一步遭破坏,一旦演变成肝硬化,严重者甚至危及生命。" 相似文献
8.
为防治流行性出血热患者急性肾脏功能衰竭,探讨其发病机理及中药治疗效果,笔者以中药茅丹黄治疗氯化高汞诱致的兔急性肾功能衰竭,以茅丹黄浸膏连续灌胃5d,观察尿素氮、肌酐、尿肌酐、左肾动脉血流动力学参数、心率和肾动脉内径、普通病理及电镜观察超微结构。结果治疗组低固定比重尿持续时间短,肾功能恢复早,肾血流动力学改善及病理损伤恢复较快。 相似文献
9.
目的构建以人HBsAg单链抗体(HBScFv)为导向作用、α干扰素为治疗作用的融合蛋白酵母表达载体pPICZ-αB/ScFv-IFN-α。方法通过重叠PCR构建目的蛋白质基因,再亚克隆到酵母表达载体pPICZαB中,DNA测序后,转化巴氏毕赤酵母宿主菌GS115 ,菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定重组酵母,重组酵母经甲醇诱导后,通过SDS PAGE分析鉴定表达产物。结果DNA测序结果显示构建的目的基因片段(HBScFv IFN-α)的序列与原设计序列相符合;菌落PCR结果显示目的基因已整合到酵母菌中;诱导表达后,SDS PAGE结果显示在相对分子质量约4 4 0 0 0处可见目的蛋白质表达带。结论成功构建了抗HBsAg单链抗体与α干扰素融合蛋白酵母表达载体 相似文献
10.
重组人抗HBsAg单链抗体工程菌的中试发酵工艺研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的研究表达重组人抗HBsAg单链抗体工程菌的中试发酵工艺。方法首先采用摇瓶培养,对培养基配方、pH值、诱导表达时机和诱导剂量进行优化,确定基本发酵参数,然后在30L发酵罐上进行中试规模发酵培养。结果在摇瓶培养时,发现含有甘油和微量元素等成分的改良培养基效果明显优于LB培养基和2×YT培养基,另外,工程茵的最佳pH值为7.0,最佳诱导时机为对数中期,最佳诱导剂浓度为0.4mmoL/L异丙基-1-硫代-β-呋喃半乳糖,最佳诱导时间为4h,将摇瓶培养确定的关键参数应用到30L发酵罐中,控制溶氧大于30%,进行3批发酵试验,发现发酵产物的湿菌产量可达58-61.9g/L,目的蛋白质表达量可达28.9%-31.2%以上。结论建立了工程菌M15[pQE-scFv]的中试发酵工艺,为进一步开发打下良好基础。 相似文献