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Delta1-IRES-EGFP双顺反子逆转录病毒表达载体的构建及鉴定 总被引:1,自引:1,他引:0
目的构建并鉴定人Delta1和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因双顺反子逆转录病毒表达载体.方法利用基因重组技术将人Delta1基因构建到含IRES-EGFP逆转录病毒载体中;电穿孔法将重组质粒pDelta1-IRES-EGFP分别转入单、双嗜性包装细胞GP E86和PA317,嘌呤霉素(puromycin)筛选获得阳性表达克隆;"乒乓球"法提高病毒滴度;重组病毒感染NIH3T3细胞,流式细胞仪(FACS)及RT-PCR法分别检测细胞荧光和Delta1 mRNA表达变化;C2C12共培养实验检测蛋白的功能.结果酶切、PCR鉴定及DNA测序证实逆转录病毒表达载体pDelta1-IRES-EGFP构建正确;经体外包装,获得最高滴度9.7×105 CFU/ml的重组病毒液;重组病毒液感染NIH3T3细胞,FACS检测部分细胞荧光强度显著提高;RT-PCR证实细胞内有外源基因Delta1表达;C2C12共培养实验证实外源蛋白Delta1可抑制C2C12细胞的分化.结论逆转录病毒基因转移系统安全,效率较高,可获得外源基因长期、稳定的表达. 相似文献
524.
背景:CXC趋化因子16作为一种炎症反应中的趋化因子冠状动脉粥样硬化发生机制中发挥重要作用。
目的:观察雷帕霉素药物洗脱支架置入前后稳定型心绞痛患者血清中CXC趋化因子16的变化。
方法:选择郑州大学第一附属医院心内科住院行冠状动脉支架置入并置入1或2枚雷帕霉素药物洗脱支架的稳定型心绞痛患者40例,另选同期于本院经冠状动脉造影显示无异常的健康者10名作为对照组。对受试者进行CXC趋化因子16、超敏C-反应蛋白检测,并分析其相互关系。
结果与结论:与对照组相比,血清CXC趋化因子16在支架置入前、置入后0.5,2,24 h均升高(P < 0.05);与置入前相比,置入后0.5,2 h升高(P < 0.01)。置入后0.5,2,24 h患者血清超敏C-反应蛋白较对照组显著升高(P < 0.01),其中置入后 0.5 h与2 h差异无显著性意义(P > 0.05),2 h高于24 h(P < 0.01)。血清CXC趋化因子16和超敏C-反应蛋白水平呈正相关性(r=0.632,P=0.017)。 相似文献
525.
526.
药物成瘾(drugaddiction),又称药物滥用(drugabuse)、药物依赖(drugdependence)、药物使用不当(drugmisuse),是一种由神经活性物质作用于大脑所导致的心理行为异常状态的慢性反复发作的功能性脑疾病。以往研究认为阿片类药物成瘾的主要原因是躯体依赖,把吸毒看作一种不良习惯,而不是一种疾病;而近年来研究发现初始吸毒者通常是出于好奇,缓解压力和焦虑,或意外和重大生活事件等原因带来的压力和焦虑,一旦成瘾,不仅在脑功能上发生病理变化, 相似文献
527.
目的探讨冠心病患者内脏脂泌素水平变化及临床意义。方法选择经冠状动脉脉造影证实的冠心病患者共73例,其中稳定型心绞痛(SAP)患者30例,不稳定型心绞痛(UAP)患者23例,急性心肌梗死(AMI)患者20例,另选冠状动脉脉造影正常的15例作为对照组,应用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组空腹血浆内脏脂泌素、胰岛素、肿瘤坏死因子α(TNF~α)、血脂水平。依据稳态模式评估法计算胰岛素抵抗指数(IRI)。结果正常对照组、SAP组、UAP组及AMI组血浆内脏脂泌素水平依次增高,分别为(15.91±4.23)ng/L。vs(36.68±7.42)ng/L、(53.15±8.34)ng/L、(72.55±7.21)ng/L(F=198.508,均P〈0.01)。冠心病患者内脏脂泌素水平与TNF-α、IRI、及低密度脂蛋白胆固醇呈正相关(r分别为0.842,0.772,0.351,均P〈0.01),与甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇呈负相关(r分别为-0.233,-0.400,P〈0.05或〈0.01)。结论血浆内脏脂泌素可能参与冠心病的发生发展,并在导致斑块不稳定状态中起重要作用。 相似文献
528.
<正>感染后咳嗽是临床常见疾病,也是亚急性咳嗽的常见病因。感染后咳嗽的程度及持续时间与体质、药物干预时间以及是否存在基础疾病等密切相关。现代医学至今未完全明确其发病机制,通过药物等对症治疗的效果欠佳,且医疗花费及副作用大。中医药治疗此病具有疗效高,花费少,依存性高等优势,易被患者接受。“伏邪”致病的思想最早见于《黄帝内经》,后经历代医家的不断发展与总结日趋成熟,目前泛指一切伏于体内,而不即时发病的邪气,是中医学理论体系的重要组成部分。感染后咳嗽的病因病机错综复杂、病程较长、症状缠绵难愈,这与“伏邪”的致病特点十分相似。本文以“伏邪”理论为引,历代典籍、现代医学及临床疗效观察为基,从虚邪致伏、风痰致伏、郁热致伏出发,分别探讨“虚”“风”“痰”“郁”“热”与感染后咳嗽的相关性,以期为该病的中医药治疗提供新的方向。 相似文献
529.
目的调查儿童喂养方式、吮奶瓶时间及其他一些口腔不良习惯对儿童牙颌发育的影响。方法将牙颌发育正常的儿童240例作为对照组,将牙颌畸形患儿268例作为试验组,进行喂养方式、吮奶瓶时间、不良习惯的统计学分析。结果喂养方式、吮奶瓶时间、不良习惯均对牙颌发育产生一定影响(各组间P值均小于0.05)。结论各种口腔不良习惯均可导致牙颌畸形的发生,提示应早期纠正口腔不良习惯,提倡母乳喂养。 相似文献
530.
genistein对人乳腺癌抑瘤效应及造血辐射防护作用的实验研究 总被引:8,自引:0,他引:8
大豆异黄酮genistein具有抗氧化、抗增殖等多重抑瘤效应[1 ] 。我们在近期的体外研究中发现 ,genistein放疗后给药和模拟放疗对肿瘤细胞有协同杀伤作用[2 ] 。为此 ,在探讨genistein对动物照射防护作用基础上 ,我们通过裸鼠荷瘤模型 ,研究其在体内有无放疗协同效应 ,特别是在抑瘤的同时对造血的影响 ,为进一步拓展其临床应用打下基础。一、材料与方法1 实验动物与试剂 :genistein (Sigma公司 )溶于二甲基亚砜 ,稀释后过滤备用 ;VEGF、EGFR组化试剂盒购自博士德公司。BALB C nu n… 相似文献