乳剂对人参有效成分透皮吸收的影响

目的: 考察人参提取液和人参乳膏中有效成分的体外透皮吸收能力。 方法: 采用智能透皮吸收仪,以人参总皂苷和总多糖为考察指标,采用UV测定指标成分含量,通过体外释药试验考察人参提取液制备成乳膏前后指标成分的透皮吸收能力变化。 结果: 人参乳膏中总皂苷透皮吸收过程符合一级方程,而人参乳膏中总多糖、人参提取液中总皂苷和总多糖的透皮吸收过程均符合Higuchi方程,2种成分的累积释药率分别为82.30%,67.53%。 结论: 人参乳膏具有良好的透皮能力,可增加有效成分的透皮吸收,为其他透皮给药剂型的研制提供科学依据。     

炭疽AVA疫苗特异性抗体分泌细胞检测方法的建立

目的 应用酶联免疫斑点(ELISPOT)技术,建立一种检测炭疽AVA免疫后特异性抗体分泌细胞的方法,用于检测和评价炭疽无菌培养滤液抗原特异性抗体形成细胞的功能.方法 无菌分离小鼠脾细胞,建立一系列特异性ELISPOT检测炭疽无菌培养滤液抗原特异性抗体分泌细胞的参数:包括抗原最佳包被浓度、细胞最适孵育时间、反应体系中细胞浓度以及亲和素抗体工作浓度的确定,同时检测上清中抗体效价,并以不相关抗原包被,检验方法的敏感性和特异性.结果 当抗原包被浓度为7.5μg/mL时,不同细胞浓度反应曲线最稳定;细胞数为5×106/mL时,不同包被浓度形成的斑点数适量,易于计数;且在抗体稀释度相同情况下,脾细胞孵育时间为3～6 h所获得的斑点数最清晰,背景着色最浅,容易被仪器识别;同时,特异性抗原包被组所获得的斑点频数高于无关抗原包被组(P＜0.01);反应体系上清中未检测到抗原特异性抗体.结论 该方法敏感、特异,可用于AVA抗原免疫后体液免疫评价.     

祛风止痛贴膏薄层鉴别方法的建立

目的研究祛风止痛贴膏的质量标准,建立祛风止痛贴膏中当归、赤芍、马钱子和麻黄4种组方药材的薄层色谱鉴别法。方法采用薄层色谱法(TCL),基于样品与标准品对照,研究了祛风止痛贴膏中成分的提取方法、展开剂、显色剂、观察方法对结果的影响,对祛风止痛贴膏中当归、赤芍、马钱子和麻黄进行定性鉴别。结果 4种组方药材的薄层色谱图中,对照品、对照药材和供试品在相同位置处有相同颜色斑点,分离较好,阴性无干扰,具有较强的特异性。结论薄层色谱鉴别方法简单易行、重现性好、专属性强,结果可靠,可作为祛风止痛贴膏中当归、赤芍、马钱子和麻黄的定性鉴别方法,能为该制剂的质量控制提供依据。     

经典名方甘姜苓术汤中甘草苷含量的HPLC测定

目的探究甘姜苓术汤中指标性成分甘草苷含量测定方法,为甘姜苓术汤的质量控制提供实验依据。方法以乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱为流动相;以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱;检测波长为237 nm。结果该方法甘草苷峰面积和质量浓度之间线性关系良好,r=0.999 7,精密度、稳定性均符合要求,平均加样回收率为99.74%,RSD为1.60%。结论本文建立的甘姜苓术汤HPLC指标性成分甘草苷含量测定方法,可以为甘姜苓术汤的质量控制提供参考。     

γ射线对人淋巴细胞Cx43和Egr-1基因转录表达影响

目的研究γ射线对人外周血淋巴细胞Cx43和Egr-1基因转录表达的影响。方法对数生长期的淋巴细胞,分别给予2、4和6Gy的60^Coγ射线照射,并于照射前（对照组）和2Gy照射后4、8、12、24、48和72h及不同剂量照射后12h,分别提取总RNA,反转录成cDNA。利用实时荧光定量PCR技术,检测各组Cx43和Egr-1基因表达改变。结果人外周血淋巴细胞Cx43 mRNA表达水平在2Gy照射后4～12h明显增高,为对照组的6．74倍以上（P〈0．05）;24～72h,其表达水平与对照组相比没有明显变化。不同剂量照射后12h,2Gy和6Gy时表达水平高,是对照组的10．52倍以上（P〈0．05）。Egr-1 mRNA表达水平在2Gy照射后的8h和24h增高,但没有统计学意义;4、12、48和72h,Egr-1 mRNA表达水平比对照组显著降低（P〈0．05）。不同剂量照射后12h,2Gy时,Egr-1 mRNA表达水平比对照组降低（P〈0．05）,4Gy时,其表达水平接近对照组,6Gy时,表达水平增高,为正常对照组的7．94倍（P〈0．05）。结论γ射线照射后能够明显上调Cx43基因表达。Egr-1要达到表达水平增高倍数和Cx43倍数相同,所需剂量比Cx43大。     

转染组织纤溶酶原激活物及内皮型一氧化氮合酶基因的内皮细胞和平滑肌细胞共同种植于人工血管对内膜增生的影响

背景:前期研究表明,双层细胞种植能有效提高内皮细胞保留率,将组织纤溶酶原激活物基因转染到内皮细胞中能提高其细胞溶解纤维蛋白的能力.目的:采用双细胞种植及修饰内皮的组织纤溶酶原激活物基因提高内皮细胞保留率和抗栓能力,通过内皮型一氧化氮合酶基因调控平滑肌细胞的增殖,观察对小口径人工血管通畅率的影响.方法:以4种不同组合细胞(内皮细胞+平滑肌细胞SMC,内皮细胞/组织纤溶酶原激活物+平滑肌细胞,内皮细胞+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶,内皮细胞/组织纤溶酶原激活物+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶)种植在PTFE管腔面.将新西兰大白兔随机分成4组,4种人工血管经旁路分别移植在4组兔的腹主动脉上.结果与结论:移植后60 d,种植内皮细胞+平滑肌细胞组和内皮细胞+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶组内膜厚度无明显差异(P > 0.05).与内皮细胞/组织纤溶酶原激活物+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶组相比,未转染内皮型一氧化氮合酶组(内皮细胞/组织纤溶酶原激活物+平滑肌细胞)内膜明显增厚(P < 0.05);未转染组织纤溶酶原激活物组(内皮细胞+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶)内膜较薄(P < 0.05).提示组织纤溶酶原激活物基因转染可以促进血管内膜增生导致血管狭窄,但同时转入内皮型一氧化氮合酶基因可以抑制组织纤溶酶原激活物的促进平滑肌细胞增殖及内膜增生的作用.     

合并2型糖尿病的乳腺癌患者临床病理特征及预后分析

目的:分析合并2型糖尿病乳腺癌患者的临床病理学特征及其与预后的关系。方法:收集西安交通大学第二附属医院肿瘤科2012年1月至2014年12月收治的合并2型糖尿病的乳腺癌患者102例作为糖尿病组,按照1∶2的原则选取同期就诊于西安交通大学第二附属医院肿瘤科的非糖尿病乳腺癌患者204例作为对照组,比较两组临床病理特征以及预后。结果:糖尿病组相比对照组,糖尿病组50岁以上人群比率显著高于对照组（76.5% vs 57.8%,P<0.05）,糖尿病组绝经后患者的比率显著高于对照组（69.6% vs 53.9%,P<0.05）;糖尿病组和对照组相比,其中T2期及以上患者所占比例（79.4% vs 66.2%）、淋巴结阳性患者比例（68.6% vs 55.4%）、Ⅱ/Ⅲ期患者所占比例（82.8% vs 67.6%）糖尿病组更高,差异具有统计学意义（P<0.05）。糖尿病组5年复发转移率为14.9%。结论:2型糖尿病是乳腺癌发生发展和淋巴结转移的不良危险因素,乳腺癌合并2型糖尿病患者的病理T分期和临床分期偏晚,淋巴结转移更多,其复发转移率较高,合并2型糖尿病的乳腺癌患者可能预后更差,应更加注重术后定期复查及随访。     

耳穴贴压法配合高乌甲素对肛瘘术后疼痛的护理疗效观察

目的：观察耳穴贴压法配合高鸟甲素贴片对肛瘘术后患者切口疼痛的护理疗效。方法：将160例肛瘘术后切口疼痛患者按随机数字表法分为对照组和观察组各80例。对照组采用耳穴贴压法治疗,观察组在此基础上配合高鸟甲素贴片法,两组均于实施后24h评估患者疼痛程度。结果：肛瘘术后疼痛缓解率观察组轻度、中度、重度分别为97％、94％、61％,优于对照组的86％、66％、25％,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：耳穴贴压法配合使用高乌甲素贴片能有效缓解肛瘘术后切口疼痛。     

高剂量X射线对人离体外周血中有核细胞DNA的损伤及其修复

目的:应用单细胞凝胶电泳技术检测X射线对离体外周血中有核细胞的DNA的损伤及损伤修复.方法:采用血常规正常的离体人外周血,用能量为6MV的X射线给予0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy、10Gy的剂量照射,分别在0.5h、1h、2h用单细胞凝胶电泳技术检测全血中有核细胞的彗星率、慧尾长度和尾部DNA含量.结果:0Gy...     

内皮型一氧化氮合酶基因转染对移植人工血管内膜增生的作用*★

目的：平滑肌细胞增殖移行和血小板激活导致血栓形成是移植血管再狭窄的主要原因，一氧化氮可以抑制上述生物反应，但内皮型一氧化氮合酶基因转染是否抑制种植了平滑肌细胞的人工血管内膜增生还未得到证实。实验拟进一步观察内皮型一氧化氮合酶基因转染对种植平滑肌细胞的人工血管内膜增生的影响。 方法：实验于2006-04/2007-05在西安交通大学医学院中心实验室及分子生物学实验室完成。①实验材料：1月龄新西兰大白兔1只，用来获取平滑肌细胞。成年新西兰大白兔18只，随机数字表法分成3组，每组6只。正常细胞组移植未种植细胞的人工血管；LacZ转染组移植种植转染lacZ的平滑肌细胞的人工血管，内皮型一氧化氮合酶转染组移植种植内皮型一氧化氮合酶的平滑肌细胞的人工血管。②实验方法：构建含有报道基因lacZ和内皮型一氧化氮合酶基因的假型反转录病毒载体小鼠白血病病毒/疱疹性口炎病毒G糖蛋白，并转染平滑肌细胞。将转染了基因的细胞种植在人工血管上，并用血管旁路移植的方法植入兔腹主动脉。③实验评估：测定转染内皮型一氧化氮合酶基因及LacZ基因细胞培养上清中一氧化氮含量。血管植入30，100 d 后X-gal染色及苏木精-伊红染色观察人工血管上的平滑肌细胞，同时显微镜下测量每段血管内膜增生的厚度。 结果：纳入成年新西兰大白兔18只，均进入结果分析。①内皮型一氧化氮合酶转染组一氧化氮含量明显高于未转染的正常细胞组（P < 0.05)。平滑肌细胞转染lacZ基因后经X-gal染色，倒置显微镜下可见转染了基因的细胞被染成蓝色。②血管植入30 d，与正常细胞组比较，LacZ转染组和内皮型一氧化氮合酶转染组内膜厚度差异无显著性（P > 0.05）；100 d后，内皮型一氧化氮合酶转染组内膜厚度与正常细胞组无明显差异，与LacZ转染组相比较，差异显著（P < 0.05）。 结论：内皮型一氧化氮合酶基因转染抑制了种植平滑肌细胞的人工血管内膜增生。