青藤碱对PKC⁃α/NF⁃κB⁃p65通路的抑制作用及机制

目的：探讨过表达蛋白激酶C?α（protein kinase C?α,PKC?α）对HEK?293T细胞中核因子?κB?p65（nuclear factor?κB?p65,NF?κB?p65）磷酸化水平的影响,并检查青藤碱（sinomenine,SIN）对PKC?α/NF?κB?p65信号通路的抑制作用。方法：采用PCR技术扩增大鼠PKC?α基因蛋白质编码区（complete sequence coding,CDS）序列,将其插入到pIRES2?EGFP空载质粒中,构建野生型（wide type,WT）PKC?α过表达质粒（pIRES2?PKC?α?WT,PKC?αWT）;在PKC?αWT质粒的基础上,将PKC?α第25位丙氨酸（A）与368位赖氨酸（K）分别突变为谷氨酸（E）和精氨酸（R）,即构建持续活化（constitutively active,CA）突变型PKC?α过表达质粒（pIRES2?PKC?α?A25E,PKC?αCA）和显性负性（dominant negative,DN）突变型PKC?α过表达质粒（pIRES2?PKC?α?K368R,PKC?αDN）。本课题组前期构建的大鼠野生型NF?κB?p65过表达质粒（pIRES2?NF?κB?p65,p65WT）分别与上述各PKC?α过表达质粒共同转染HEK?293T细胞,免疫印迹法检测PKC?α、NF?κB?p65的表达及磷酸化水平。再将上述不同质粒转染HEK?293T细胞,46 h后予50 ng/mL SIN处理细胞2 h,再行免疫印迹实验分析SIN对PKC?α、NF?κB?p65磷酸化的影响。结果：菌液PCR及测序证实,上述PKC?α过表达质粒构建成功。在HEK?293T中过表达PKC?αWT或PKC?αCA可促进NF?κB?p65的磷酸化,且过表达PKC?αCA时尤为显著,而过表达PKC?αDN后NF?κB?p65的磷酸化无明显变化。SIN处理可抑制PKC?αWT、PKC?αCA和PKC?αDN转染组HEK?293T细胞中PKC?α的磷酸化,同时也能抑制过表达PKC?αWT上调的NF?κB?p65磷酸化修饰,但不影响过表达PKC?αCA和PKC?αDN对NF?κB?p65的磷酸化作用。结论：过表达PKC?α可促进HEK?293T细胞中NF?κB?p65的磷酸化,SIN处理HEK?293T细胞后可通过抑制PKC?α的磷酸化下调NF?κB?p65的磷酸化修饰。     

复方谷氨酰胺肠溶胶囊联合枯草杆菌肠球菌二联活菌胶囊治疗腹泻型肠易激综合征的临床疗效观察

目的观察复方谷氨酰胺肠溶胶囊联合枯草杆菌肠球菌二联活菌胶囊治疗腹泻型肠易激综合征的临床疗效。方法将120例腹泻型肠易激综合征患者分为联合组及对照组各60例。联合组同时口服复方谷氨酰胺肠溶胶囊（500 mg,tid）和枯草杆菌肠球菌二联活菌胶囊（500 mg,bid）,对照组仅服用枯草杆菌肠球菌二联活菌胶囊（500 mg,bid）,于治疗2周结束时观察疗效。结果联合组的总有效率为95.5%,对照组为75.0%,两组差异有统计学意义（P〈0.05）;治疗腹泻有效率联合组为93.3%,对照组为70.0%,两组差异有显著的统计学意义（P〈0.01）。结论复方谷氨酰胺肠溶胶囊联合枯草杆菌肠球菌二联活菌胶囊治疗腹泻型肠易激综合征患者疗效确切。     

单用垂体后叶素与联合硬化治疗食管静脉曲张破裂出血疗效比较

目的比较硬化剂联合垂体后叶素与单用垂体后叶素治疗食管静脉曲张破裂出血,总结急诊硬化剂治疗的疗效特点.方法 78例患者采用联合治疗方案,84例接受垂体后叶素单独治疗,分别观察并记录出血情况及并发症.结果治疗组急诊止血率92.3%,并发症发生率11.5%,近期再出血率为8.3%;而对照组则分别为61.9%、30.9%及38.5%,相对应比较均有统计学意义（ P ＜0.01）.治疗组疗效与肝功能及食管静脉曲张分度无明显相关.结论硬化剂与垂体后叶素联用治疗食管静脉曲张破裂出血,止血效果好、适应证宽及并发症少.     

气管切开患儿的气道护理进展

气管切开术是给患者建立一个新的、暂时的或永久的呼吸通道。由于新的气道没有任何防御功能,且气道直接开放,带来了感染、管道堵塞、脱管等风险,因此术后的气道护理十分重要。小儿气管切开术后气道护理程序与成人气管切开术后护理基本相同,但因小儿气管处于发育期,气管短小而壁薄,加之患儿不配合,更易出现并发症。现将护理内容综述如下。     

带缝匠肌蒂骨瓣移植治疗股骨头缺血性坏死手术配合体会

该院自1989年以来开展带缝匠肌蒂骨瓣植入,重建股骨头血运治疗45岁以下息股骨头缺血性坏死病人86例。其临床症状及X光显示均获得改善取得了满意的治疗效果。现将手术配合与体会介绍如下。1 临床资料本组86例,男71例,女15例,年龄在7岁～45岁,本组治愈42人,占49％,好转,明显好转44人,占51％。     

ZBTB3表达对胶质母细胞瘤细胞增殖和克隆形成的调控

目的：检查人胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)组织和细胞系中ZBTB3的表达,并探讨ZBTB3对GBM细胞增殖和克隆形成的影响及其调控机制。方法：通过GEPIA2数据库分析GBM患者肿瘤组织中ZBTB3的表达情况。RT-PCR、qPCR和Western blot检测GBM细胞系(U251、U373、U87)中ZBTB3的mRNA和蛋白表达水平,筛选出ZBTB3表达最高的U87细胞。CCK-8和克隆形成实验检测沉默ZBTB3基因对U87细胞增殖和克隆形成的影响。用p38MAPK、AMPK、Akt1抑制剂处理U87细胞后,Western blot检测p38MAPK、AMPK、Akt1的磷酸化水平,RT-PCR、qPCR和Western blot测定ZBTB3的mRNA和蛋白表达水平,CCK-8和克隆形成实验检测细胞增殖和克隆形成。结果：GBM患者肿瘤组织中ZBTB3的表达显著高于正常组织。U251、U373和U87细胞中均可见ZBTB3的表达,其中U87细胞表达最高。沉默ZBTB3基因能明显抑制U87细胞的增殖和克隆形成。抑制AMPK既能显著降低U87细胞ZBTB3的表达水平...     

中药抗肝纤维化及其作用机理研究进展

肝纤维化是很多慢性肝病向肝硬化发展的必经阶段，是由肝脏某些细胞（如成纤维细胞、贮脂细胞、枯否氏细胞、淋巴细胞等）．细胞因子以及细胞外基质等因素相互作用而形成的．是一种病理学诊断。已故肝病专家P0pperr认为“谁能阻止或减缓肝纤维化的发生，谁就将治愈大多数慢性肝病”。西药抗纤维化，由于其副作用大．疗效不肯定，价格昂贵，未得到临床广泛应用．而中医工作者在近几年临床及实验研究中，积累了丰富的抗肝纤维化的单味药和复方中药，兹综述于下。1单味药及其有效成分的研究1．1疏肝理气药有柴胡、青皮、权壳、厚朴等。其中对…     

胰十二指肠切除术后肠内营养支持的观察与护理

目的总结胰十二指肠切除术后患者肠内营养（EN）的效果观察与护理体会。方法选择20例胰十二指肠切除术患者在围手术期应用肠内外营养（治疗组）,与同期行手术治疗后给予单独肠外静脉营养的20例胰十二指肠切除术患者（对照组）进行对照研究。针对术前术后体重变化,总蛋白、白蛋白改善情况,术后并发症发生率等指标进行统计学分析。结果治疗组中行胰十二指肠切除的术后并发症发生率、手术前后体重变化及总蛋白改善情况均明显优于对照组（P〈0.05）。结论胰十二指肠切除术应用肠内外营养有其显著的优点,临床医生应更加重视围手术期肠内营养支持治疗。     

埃索美拉唑三联疗法不同疗程治疗幽门螺杆菌阳性活动期十二指肠溃疡的疗效观察

目的观察埃索美拉唑三联疗法不同疗程治疗幽门螺杆菌（Hp）阳性的活动期十二指肠溃疡的疗效及安全性。方法 80例经胃镜证实Hp阳性的活动期十二指肠球部溃疡患者,随机分成1周疗法组（A组）和2周疗法组（B组）。A、B2组用药均为埃索美拉唑20mg、阿莫西林1.0g、克拉霉素缓释片0.5g,均每天2次。A组疗程1周,B组疗程2周。治疗过程中观察不良反应发生情况,停药4周后复查胃镜,观察溃疡愈合率,并作14C尿素呼气试验（14C-UBT）了解Hp根除率。结果 A组溃疡愈合率、Hp根除率、不良反应发生率分别为91.9%、77.5%、5.0%;B组分别为92.1%、90.0%、5.0%。A、B2组之间比较Hp根除率差异有统计学意义（P〈0.05）;溃疡愈合率、不良反应发生率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论埃索美拉唑＋阿莫西林＋克拉霉素三联2周疗法治疗Hp阳性的活动期十二指肠溃疡,可达到满意的Hp根除率和溃疡愈合率,且不良反应小。