重组质粒pEGFP-mDlX5的构建及其在SVZa神经干细胞中的表达研究

目的构建真核表达重组质粒pEGFP-mDlx5,并了解它在室管膜前下区(SVZa)神经干细胞(NSCs)中的mRNA及融合蛋白表达情况。方法运用DNA重组技术自原核表达载体上将小鼠来源的mDlx5基因克隆到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)载体上,并用双酶切、测序进行鉴定;将重组质粒用电穿孔的方法转染SVZa NSCs,荧光显微镜下动态观察荧光变化情况;培养24h后提取转染细胞的总RNA及总蛋白,通过逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)了解其mRNA表达情况,用Western blot 检测其蛋白表达情况。结果重组质粒通过双酶切产生了0．78 kb目的插入片段及4．68 kb载体片段;测序后证实0．78 kb片段碱基序列与mDlx5基因完全同源;重组质粒转染SVZa NSCs 8 h后在荧光显微镜下观察到绿色荧光,12 h后逐渐增多,24-48 h达高峰,且稳定表达较长时间;24 h后通过 RT-PCR检测到mRNA表达,Western blot检测到58 kD目的蛋白表达。结论新构建的真核表达重组质粒pEGFP-mDlx5通过鉴定,结构正确:转染到SVZa NSCs后能在其中表达、发挥功能,为后续研究奠定了基础。     

扩大Le Fort Ⅰ型截骨入路在切除颅底肿瘤中的应用

目的探讨扩大Le Fort Ⅰ型截骨入路切除颅底斜坡区及鼻咽部和蝶窦区肿瘤的疗效.方法以扩大Le Fort Ⅰ型截骨入路对14例该区域的肿瘤进行手术切除,其中脊索瘤9例,软骨瘤2例,垂体瘤、转移癌、骨纤维结构不良各1例.结果颅底肿瘤全切除11例,次全切除3例;上颌骨复位后,咬合关系均恢复良好.随访12～24个月,4例局部复发,其余恢复良好.结论采用扩大Le FortⅠ型截骨入路切除颅底肿瘤,较传统前方或侧方入路对脑组织损伤小,手术视野暴露清楚,无严重及长期并发症.     

空洞分流对ChiariⅠ畸形伴脊髓空洞症近远期疗效的影响

目的比较chiariⅠ畸形伴脊髓宅洞症空洞分流与否对近远期疗效的影响，探讨脊髓空洞分流的必要性和临床意义，为临床选择手术方法提供依据．方法回顾性分析21例ChiariⅠ畸形伴脊髓空洞症手术治疗病例，观察8例经后颅窝减压 颈1、2或3椎板切开 硬脑膜修补(A组)与13例同时行脊髓空洞-蛛网膜下腔分流病人(B组)术后早期、随访半年以上临床症状与体征的变化，并采用Kamofsksyr行为能力评分法对两组病例远期疗效进行评定．同时比较术后空洞变化与临床症状的关系。结果A组术后早期症状改善5例(62．5％)。稳定3例，无症状恶化者，随访4例．按照Kamofsky，评分标准，临床症状改善3例，有效率75％(3／4)-B绀术后早期症状改善6例．稳定5例．恶化1例，有效率46.3％(6／13)；随访8例，临床症状改善7例，有效率87％(7/8)。随访MRI结果显示，B绀空洞缩小程度明显优于A组，多数空洞缩小者，症状好转，少数病例症状无变化结论后颅窝减压加颈1、2或3椎板切开及硬脑膜修补足治疗ChiariⅠ畸形伴脊髓空洞症的有效方法.加行空洞分流能有效缩小空洞体积，多数患者远期疗效优于未分流者，但部分病人存在无效或症状恶化可能。     

86例癫痫痫灶定位与脑电图懒波

目的探讨86例脑电图一侧懒波、另一侧痫样放电癫痫患者的病史特点及痫灶定位。方法回顾性总结分析86例一侧懒波、另一侧痫样放电癫痫患者的病史、脑电图特点,并结合影像学改变、临床发作及发作期偶极子定位系统密度压缩谱阵(DSA)分析进行讨论。结果蛛网膜囊肿、外伤后脑软化灶和脑萎缩所致懒波常见,分别为24.4%(21/86)、23.3%(20/86)和18.6%(16/86)。42例行术中皮质及深部脑电图探测,证实了术前定位。结论脑电图一侧懒波,另一侧痫样放电时,其懒波侧多为原发痫灶侧。存在此类脑电图特有表现的癫痫患者中,以继发性癫痫多见(94.2%,81/86),但少数病程较长的顽固性原发性癫痫也可出现类似表现(5.8%)。准确找出原发致痫灶并予以切除,可获得良好的治疗效果。     

胞嘧啶脱氨酶自杀基因转染U251恶性脑胶质瘤细胞及其表达研究

目的探讨胞嘧啶脱氨酶（CD）自杀基因转染U251恶性脑胶质瘤细胞的方法及其表达效果。方法采用脂质体法将CD基因转染U251恶性脑胶质瘤细胞，G418筛选阳性克隆（U251-CD），采用RT—PCR、免疫细胞化学染色、流式细胞仪（FCM）凋亡分析和高效液相色谱（HPLC）等方法检测CD基因的表达及其功能。结果CD基因成功转染U251细胞。G418筛选获得阳性克隆．RT—PCR证实阳性细胞有CD基因表达，抗-CD-抗体免疫细胞化学法显示细胞浆染色阳性．U251-CD细胞加入5-氟胞嘧啶（5-FC）后，FCM显示细胞凋亡峰，HPLC可检测到5-FC培养液内有5-氟尿嘧啶（5-FU）产生。结论CD基因能够在U251细胞表达．并具备将5—Fc转变为5-Fu的功能，造成肿瘤细胞凋亡．CD-5-FC系统可作为恶性脑胶质瘤辅助治疗手段之一。     

影像导航辅助显微神经外科手术切除侧脑室肿瘤的疗效

目的 研究影像导航辅助显做神经外科手术技术切除侧脑室肿瘤的疗效。方法 术前病人行MRI检查，数据输入导航工作站，根据导航工作站所显示肿瘤的三维结构，制定手术方案，在导航棒的辅助引导下完成肿瘤切除术。结果 完成23例侧脑室肿瘤切除，其中5例脑膜瘤均达到100％切除，术后无明显神经功能障碍，18例胶质瘤全切10例，次全切5例，大部分切除3例。结论 应用影像导航辅助显微神经外科手术技术切除侧脑室肿瘤可达到定位准确，减少对皮层脑组织的损伤，有效保护正常神经组织的目的。     

BMP2在SVZa神经干细胞向神经元分化中的作用

目的 研究BMP2在室管膜前下区(SVZa)神经干细胞向神经元分化中的作用，提高SVZa神经干细胞分化为神经元的比例。方法 体外分离培养SVZa神经干细胞，以不同浓度的BMP2诱导SVZa神经干细胞，采用免疫荧光和流式细胞仪技术，检测SVZa神经干细胞分化为神经元的比例。结果 BMP2浓度为1～10ng/ml时SVZa神经干细胞分化为神经元的比例均高于0ng／ml，10ng／ml时达到最高峰，20～100ng／ml时SVZa神经干细胞分化为神经元的比例亦高于0ng／ml，但呈下降趋势。结论 BMP2可以促进SVZa神经干细胞向神经元分化，可以明显提高分化为神经元的比例。     

丙泊酚镇静对颅脑外伤患者术后再出血及预后的影响

【摘要】 目的 探讨丙泊酚镇静对颅脑外伤患者术后再出血及临床预后的影响。方法 收集我院2015年2月～2017年1月收治的颅脑外伤患者131例,按照治疗方法不同分为对照组（62例）和观察组（69例）,对其临床资料进行回顾性分析。对照组术后予以常规治疗,观察组在对照组基础上加用丙泊酚镇静治疗,观察两组患者术后Riker镇静躁动评分（Sedation Agitation Scale,SAS）、颅内压（Intracranial pressure,ICP）、心率（Heart rate,HR）、收缩压（Systolic blood pressure,SBP）、舒张压（Diastolic blood pressure,DBP）、血氧饱和度（SpO2）等指标,行组间差异性分析,比较两组患者术后再出血率、病死率及术后6个月时格拉斯哥预后评分（Glasgow Outcome Scale,GOS）。结果 观察组患者SAS、ICP在术后1、2、4、8 h各个时间点均低于对照组,差异有统计学意义（P＜005）;两组患者的HR、SBP、DBP在术后1h差异无统计学意义（P＞005）,但在术后2、4、8 h差异有统计学意义（P＜005）;观察组再出血率明显低于对照组,差异有统计学意义（P＜005）;观察组病死率低于对照组,但差异无统计学意义（P＞005）;术后六个月时格拉斯哥预后评分观察组与对照组比较,差异有统计学意义（P＜005）。结论〓颅脑外伤患者术后使用丙泊酚镇静能避免剧烈躁动,减少再出血发生率,改善患者远期预后,提高生存质量。     

大鼠皮层损伤瘫痪后胎脑组织移植治疗的神经行为学变化

本实验通过以胎脑组织移植修复皮层损伤后瘫痪，观察瘫痪大鼠的神经行为学变化。结果表明，移植组织可在宿主中存活，且与宿主脑组织发生部分整合。移植组的神经行为与损伤组比较明显改善。表现为神经学检查反应的正确率上升，在高杆上爬过的间隔数明显增多，且坠落次数明显减少。移植组的神经行为已基本恢复至伤前正常水平。所以，胎脑组织移植物可在宿主中存活，与宿主组织发生整合，并替代受损神经元，从而改善皮层损伤性大鼠的神经行为。     

高密度Oligo基因芯片筛选小鼠嗅球发育相关基因的研究

目的研究小鼠嗅球发育相关基因表达谱,探讨嗅球(olfactory bulb,OB)在室管膜前下区(anterior subventricular zone,SVZa)神经干细胞的迁移及分化中的作用.方法采用16 500点的小鼠高密度Oligo基因芯片对胚胎16 d(embryonic day 16,E16)、生后1 d(postnatal day 1,P1)、7 d(P7)、21 d(P21)OB的基因表达情况进行检测,以4个时相点全脑等量混合样品作为对照.结果通过筛选基因表达谱,得到5 277条在E16、P1、P7及P21 OB中均有表达的基因,然后采用两两对比组合,得到6组数据,从中筛选出了581个差异在3倍以上的基因,分层聚类分析将其分为6大类,进一步分析了与SVZa区神经干细胞的迁移相关基因Slit2聚类同组的28个基因及与多巴胺神经元分化相关基因TH聚类同组的17个基因.结论在小鼠嗅球发育中发现了581条表达差异≥3倍的基因,进一步通过对与Slit2相关的28个基因及与TH相关的17个基因的分析有助于揭示SVZa神经干细胞迁移及向多巴胺神经元分化的作用机制.