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【目的】构建人resistin基因原核表达载体并观察其表达,为开展对resistin的研究打下实验基础。【方法】酚氯仿一步法从一位2型糖尿病合并胆管癌患腹壁皮下脂肪组织抽取总RNA,RT-PCR法扩增出resistin基因cDNA,经测序后,PCR产物亚克隆入 T载体,用EcoR I和Kpn I分别酶切重组T质粒和原核表达载体pGENKS,然后resistin基因片段和表达载体通过T4DNA连接酶进行定向连接,用核酸内切酶EcoR I、KpnI酶切和测序方法鉴定出重组表达质粒。重组表达质粒转化大肠杆菌JM109,经1mmol/LIPTG在32℃诱导表达2h,裂解细菌,进行PAGE凝胶电泳鉴定融合蛋白的表达。【结果】RT-PCR扩增产物分子大小为327bp,序列分析表明为人resistin基因完整编码区。PCR产物与T载体连接、转化大肠杆菌后,从细菌质粒中酶切回收了目的片段。重组表达质粒经EcoR I和Kpn I双酶切后能产生出327bp、4980bp大小的两个片段,序列分析表明重组表达质粒包含人resistin基因完整编码区,基因编码无移位,PAGE凝胶电泳表明在细菌裂解上清有分子质量为39.5kD的融合蛋白。【结论】成功构建了人resistin基因原核表达载体,且构建的载体能表达出含目的蛋白的融合蛋白,为下一步研究打下了实验基础。 相似文献
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Alzheimer病(AD)是一种退变性大脑疾病,是引起痴呆的最常见原因。其病理改变除明显脑萎缩以外,还包括镜下所见的老年斑、神经元纤维缠结(NFT)等。其发病机制很复杂,至今还不十分清楚。本文就AD发病机制的研究进展做一综述,以进一步提高临床上对该病的认识。1 遗传因素AD常于60岁以后发病,65岁以上人群中患病率约为3%~10%。发生于60岁以下者属早期发作型,此类患者多数有家族史,即家族性AD(FAD),在40岁左右开始发病。60岁以上发病者属晚期发作型,多无家族史,亦称散发型。早期发作FAD属常染色体显性遗传[1~2]。研究发现在某些家系中… 相似文献
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Resistin, a new hormone found in the year 2001 and secreted by adipocytes, is related to type 2 diabetes and obesity. It brings some hope to solve the medical hamper of insulin resistance. The resistin discovery, molecule structure, function and expression, secretion regulation as well as gene polymorphism are reviewed in the article. 相似文献
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目的:探讨类风湿关节炎(RA)患者中白细胞介素-1β(IL-1β)基因多态对IL-1β mRNA表达的影响。方法: 应用荧光定量RT-PCR技术检测不同IL-1β基因型的RA病人外周血单个核细胞(PBMC)中IL-1β mRNA表达量的差异。结果: 携带IL-1β(-511)纯合子等位基因2组RA病人PBMC表达IL-1β mRNA量明显较非纯合子及正常人组为高(均P<0.01)。结论: IL-1β基因多态性改变对IL-1β mRNA的表达产生影响,IL-1β(-511)纯合子等位基因2促进了IL-1β mRNA的表达。 相似文献
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何东华 《临床合理用药杂志》2020,(10):33-35
目的比较不同浓度罗哌卡因在B型超声引导下肌间沟臂丛神经阻滞中的应用效果。方法选取2017年11月-2018年11月佛山市南海区第七人民医院收治的上肢手术患者60例,利用随机数字表法分为Ⅰ组与Ⅱ组各30例。Ⅰ组患者罗哌卡因浓度为0.375%,Ⅱ组患者罗哌卡因浓度为0.5%,均行B型超声引导下肌间沟臂丛神经阻滞。比较2组患者麻醉效果、阻滞起效时间、阻滞完成时间及镇痛持续时间。结果Ⅰ组患者麻醉优良率为96.7%,Ⅱ组患者麻醉优良率为93.3%,2组比较差异无统计学意义(χ^2=0.350,P>0.05)。Ⅱ组患者阻滞起效时间、阻滞完成时间均短于Ⅰ组(P<0.01);2组患者镇痛持续时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论罗哌卡因在B型超声引导下肌间沟臂丛神经阻滞中的应用效果好,根据患者的耐受度、康复需要选择适当浓度的罗哌卡因,以提高患者的治疗效果。 相似文献