Wnt信号通路与类风湿关节炎关系的研究

<正>类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以侵蚀性关节炎为主要表现的慢性、全身性自身免疫病。本病表现为以双手和腕关节等小关节受累为主的对称性、持续性多关节炎。病理表现为关节滑膜的慢性炎症、血管翳形成,并出现关节软骨和骨破坏,最终可导致关节畸形和功能     

雷公藤多苷对rmMIF诱导大鼠成纤维样滑膜细胞增殖及RANKL／OPG表达的影响

目的观察雷公藤多苷（tripterygiumglycoside,TG）对重组鼠巨噬细胞移动抑制因子（recombinantmousemacrophagemigrationinhibitoryfactor,rmMIF）诱导大鼠成纤维样滑膜细胞（fibroblast—likesynoviocytes,FLS）的增殖及其细胞核因子-KB受体活化因子配体（receptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKL）、骨保护素（osteo—protegerin,OPG）表达的干预作用。方法采用大鼠FLS细胞株RSC-364,常规方法复苏、培养、传代,实验用3～5代FLS。分为4组：空白对照组加入200μlDMEM培养液,另3组分别加入200肛1含rmMIF（200ng／m1）（MIF组）、rm—MIF（200ng／m1）＋TG（20μg／m1）（MIF＋TG组）、rmMIF（200ng／m1）＋MTX（0．5μg／m1）（MIF＋MTX组）的DMEM培养液。置37℃、5％CO2孵箱培养48h。MTT法检测FLS的增殖活性;免疫组化法检测滑膜细胞OPG／RANKL的表达;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测FLS上清液OPG、RANKL表达。结果MIF组增殖活性高于空白对照组,MIF＋TG组、MIF＋MTX组增殖活性低于空白对照组和MIF组（P〈0．01）。MIF＋TG组和MIF＋MTX组细胞OPG标记指数均高于空白对照组和MIF组,MIF＋TG组OPG标记指数高于MIF＋MTX组（P〈0．01,P〈0．05）。MIF组细胞RANKL标记指数高于空白对照组,MIF＋TG组、MIF＋MTX组RANKL标记指数均低于MIF组（P〈0．05,P〈0．01）。MIF组上清液RANKL浓度和RANKL／OPG值均高于空白对照组,MIF＋MTX组上清液RANKL浓度低于空白对照组（P〈0．05,P〈0．01）;MIF＋TG组和MIF＋MTX组上清液RANKL浓度和RANKL／OPG值均低于MIF组（P〈0．01）。结论rmMIF可促进体外培养大鼠FLS增殖,上调FLS的RANKL表达和RANKL／OPG值;TG抑制rmMIF诱导的大鼠FLS增殖、降低rmMIF诱导大鼠FLS分泌RANKL、下调FLS的RANKL表达和RANKL／OPG比值,可能是其治疗类风湿关节炎的骨免疫学机制之一。     

英夫利西单抗治疗类风湿关节炎的疗效与安全性

目的 比较英夫利西单抗(IFX)与甲氨蝶呤(MTX)合用治疗中度、重度类风湿关节炎(RA)的疗效和安全性,为临床选择合适的患者和治疗时机提供依据.方法 本研究为开放、多中心、前瞻性临床研究.234例接受稳定剂量MTX治疗至少4周的RA受试者参加本试验,其中中度RA患者104例,重度RA患者130例.受试者分别在观察的第0、2、6、14和22周接受3mg/kg IFX的静脉滴注,并完成临床病情评估,不良事件及实验室检查等.在第26周时受试者完成最后一次评估.结果 治疗第26周时,RA患者达到美国风湿病学会疗效评价标准(ACR)20、ACRS0和ACR70的比率分别为69.8%、52.4%和29.5%,3种评价指标在中度RA组与重度RA组的差异无统计学意义(P>0.05);而达到ACR90的患者比率为7.21%,中度RA组与重度RA组的差异有统计学意义(P<0.05).中度和重度RA组患者治疗前后触痛关节数、肿胀关节数、疼痛的视觉模拟(VAS)评分、受试者疾病总体状况VAS评分、研究者评估疾病总体状况VAS评分等指标差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 IFX+MTX治疗中、重度RA患者有较好的疗效和安全性,能够迅速改善各项症状、体征和实验室炎性活动指标,尤其对于中度RA患者能更加有效地降低疾病活动性和抑制关节组织损害进展.     

沙利度胺致不完全性结肠梗阻一例

患者女,45岁.因腰骶疼痛伴晨僵4年,加重1个月入院.患者2002年出现双侧腰骶部疼痛,在外院查人类白细胞抗原(HLA)-B27阳性,骶髂CT示骶髂关节炎.外院诊断考虑强直性脊柱炎(AS),治疗予柳氮磺吡啶、沙利度胺25 mg/d.     

抗环瓜胺酸肽抗体和葡萄糖-6-磷酸异构酶抗原在类风湿性关节炎中的意义

目的探讨抗环瓜胺酸肽抗体（cyclic citrullinatedpeptide,CCP）和葡萄糖-6-磷酸异构酶抗原（glucose-6-phosphate isomerase,GPI）在类风湿性关节炎中的意义。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）间接法检测90例RA患者血液中的CCP抗体,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）同样检测90例RA患者血液中的GPI。结果在GPI组Ⅳ期的RA阳性率明显高于Ⅰ期及Ⅱ期～Ⅲ期患者（P〈0.05）,有统计学意义。CCP组在Ⅰ期、Ⅱ期～Ⅲ期和Ⅳ期无统计学意义。GPI在ESR〉100组的阳性率显著高于ESR〈40和40≤ESR≤100组（χ^2=10.045,P=0.007）;抗CCP在各组的阳性率无显著性差异（χ^2=4.432,P=0.109）。结论抗CCP抗体和GPI抗原在RA的诊断中都有重要意义。抗CCP抗体在RA的早期诊断和骨侵蚀方面更有价值,而GPI抗原特异性高于抗CCP抗体和RF,同时,它还能反映关节的炎症程度及RA的活动性。     

西医指南与中医药指南:在相互学习中共同提高

中西医并举是中国医疗卫生体系的特色之一,西医指南和中医药指南在指导中国医疗实践方面均具有重要意义和价值。本文将对西医指南和中医药指南的发展现状、制订区别与联系及彼此需要或值得学习的内容展开讨论,并就如何促进西医和中医药指南交流与合作,共同改进和提升指南质量提出思考与建议。     

消痹膏镇痛抗炎作用的实验研究

目的:评价中药复方外敷剂消痹膏的镇痛、抗炎作用。方法:将ICR小鼠(或SD大鼠)随机分为5组:阴性对照组(黄凡士林)、阳性对照组(扶他林乳胶剂)及消痹膏低、中、高剂量组,分别于腹部脱毛处外敷相应药物。采用热板法、醋酸法致小鼠疼痛模型,外涂二甲苯致小鼠急性炎症模型,注射角叉菜胶致大鼠慢性炎症模型,考察各组的镇痛、抗炎作用。结果:镇痛实验显示,消痹膏高剂量组可明显提高热板法致小鼠疼痛痛阈值,且优于阳性对照组,但差异无统计学意义;消痹膏各剂量组及阳性对照组均可明显抑制醋酸法致小鼠疼痛反应(P0.01),且呈一定的量效关系。抗炎实验显示,消痹膏各剂量组及阳性对照组均可显著抑制二甲苯致小鼠耳肿胀度、抑制角叉菜胶致小鼠足肿胀度(P0.01,P0.05)。结论:消痹膏有明显的镇痛、抗炎作用。     

雷藤舒(LLDT-8)通过提高MEKK2蛋白表达调控胶原诱导性关节炎小鼠Treg/Th17平衡

为研究雷藤舒(LLDT-8)通过提高MAPK信号通路中MEKK2蛋白的表达,调控脾脏淋巴细胞中Treg/Th17比例,探索治疗CIA小鼠免疫作用机制。采用鸡II型胶原诱导小鼠关节炎模型,随机分为N组、CIA组、LLDT-8组,HE染色比较各组小鼠关节病理损伤程度,Masson染色观察各组胶原组织增生情况,应用流式细胞术检测脾脏淋巴细胞中Treg/Th17比例;RT-PCR检测相关转录因子和炎性因子Foxp3、ROR-γt、IL-17A mRNA表达量;检测脾脏淋巴细胞中MEKK2蛋白和基因表达水平。结果显示,LLDT-8治疗可以减轻关节炎小鼠的关节病变严重程度、减少软骨表面及骨关节处胶原纤维增生。与N组比较,CIA组小鼠脾脏淋巴细胞中Treg比例降低,Th17比例升高(P0.01);LLDT-8治疗后能显著提高Treg比例(P0.01),降低Th17比例(P0.05);CIA组脾脏淋巴细胞中MEKK2蛋白和基因表达量较正常组降低(P0.01),LLDT-8治疗后能显著提高MEKK2的蛋白和基因表达量(P0.01)。由此,该研究提示MEKK2蛋白在CIA模型的发病中起着重要的作用,LLDT-8可能通过提高MEKK2蛋白的表达,影响Treg/Th17比例而发挥治疗RA的作用。     

LLDT-8对类风湿关节炎滑膜细胞NF-kB信号通路的影响

研究新雷公藤衍生物雷藤舒[(5R)-5-hydroxytriptolide,LLDT-8]对TNF-α联合IL-17诱导的类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者的成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocyte,FLS)NF-κB信号通路及其下游IL-6、IL-8表达的影响。体外培养FLS,TNF-α联合IL-17体外诱导FLS,ELISA法检测FLS上清液中IL-6、IL-8的含量;RT-PCR法检测FLS中IL-6、IL-8mRNA的表达;Western blotting检测FLS p-p65、p-IκBα的表达;免疫荧光染色法检测FLS NF-κB p65的核转运。研究发现LLDT-8可抑制NF-κB信号通路下游炎性因子IL-6、IL-8的表达;LLDT-8可抑制FLS NF-κB信号通路的IκBα磷酸化、p65活性;LLDT-8可显著抑制TNF-α联合IL-17诱导的NF-κB p65向FLS核内移位。由此LLDT-8可能通过调控NF-κB信号通路的活化,抑制IL-6、IL-8表达最终达到抗炎作用,将为进一步的临床应用提供实验依据。     

强直性脊柱炎患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的研究

目的 观察强直性脊柱炎(AS)患者外周血CD4+CD25调节性T细胞(Treg)的数量、功能及肿瘤坏死因子(TNF)-a 抑制剂治疗的影响.方法 活动性AS患者25例,10例给予etanercept治疗12周,健康对照21名,分离外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术检测CD4+CD25high T细胞比例;实时定量聚合酶链反应检测FOXP3 mRNA表达;免疫磁珠法去除CD25+细胞,可溶性噻唑盐(WST-1)法检测T细胞增殖.结果 活动性AS组CD4+CD25high T细胞比例与对照组差异尤统计学意义,但FOXP3 mRNA表达明显低于对照组(P＜0.01),并与C反应蛋白(CRP)呈负相关(P＜0.01).两组的CD4+CD25+细胞体外均能抑制T细胞增殖(P均＜0.01). Etanercept治疗明显增加CD4+CD25highT细胞比例和FOXP3 mRNA表达(P均＜0.01),与CRP降低呈负相关(P＜0.05;P＜0.01).结论 AS患者外周血表达FOXP3的CD4+CD25+Treg细胞异常,可能参与AS发生和发展;Etanercept治疗上调Treg细胞,可能是抗TNF-α治疗的一个机制.