ATM基因突变与细胞辐射敏感性关系研究进展

共济失调毛细血管扩张症突变基因(ataxia-telangiectasia mutated,ATM)是AT唯一的致病基因,AT是一种常染色体隐性遗传病,其临床特征有小脑退化、免疫缺陷、染色体不稳定性、细胞周期紊乱,对放射线及类射线细胞毒药物极度敏感等。由于AT患者这种特殊的遗传性的辐射敏感性,使得ATM成为放射生物学界研究辐射敏感性机制的重要对象之一。笔者就ATM基因的结构功能、ATM基因突变和细胞辐射敏感性机制以及二者之间关系做一综述。     

γ-干扰素对冬凌草甲素抑制白血病K562细胞增殖的影响

[目的] 研究γ-干扰素对冬凌草甲素抑制白血病K562细胞增殖的影响。[方法] 以浓度1000U／ml的γ-干扰素与不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的K562细胞，观察细胞生长状态的变化。MTT法检测细胞生长抑制率，应用流式细胞仪、台盼蓝染色及Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡，TRAP-PCR-ELISA法检测细胞凋亡前后的端粒酶活性。[结果] γ-干扰素与冬凌草甲素联合应用可显著抑制K562细胞的生长，诱导细胞发生凋亡，并降低K562细胞端粒酶活性，其作用呈现出明显的量-效与时-效关系。[结论] γ-干扰素与冬凌草甲素联合应用对白血病K562细胞具有明显的增殖抑制作用，降低细胞端粒酶活性足诱导细胞发生凋亡。可能是其重要作用机制之一。     

转染自杀基因pCEAcd-tk的SPC-A-1细胞的死亡机制

【目的】探讨自杀基因 pCEAcd tk/前体药物体系旁观者效应的细胞死亡机制。【方法】提取质粒pCEAcd tk ,转染到肺癌细胞株SPC A 1中 ,与未转染的细胞按 2∶8的比例混合后加到 96孔培养板中 (每孔 3× 10 3 ) ,加前体药物 5 FC(5 μmol/L)和GCV(10 μmol/L)孵育 5d后 ,MTT法测定细胞存活率而估计旁观者效应。取处理后的细胞 ,提取DNA ,琼脂糖凝胶电泳 ;Hoechst染色后荧光显微镜观察及碘化丙啶 (PI)染色 ,流式细胞仪分析细胞周期。【结果】①SPC A 1细胞株在转染了pCEAcd tk体系后加前体药物存在明显的旁观者效应 ;②处理细胞的基因组DNA琼脂糖凝胶电泳呈涂布状 ;③处理细胞用荧光显微镜观察到形状变大 ,无凋亡小体形成 ;④流式细胞仪分析到细胞周期发生改变。【结论】SPC A 1细胞在转染了pCEAcd tk后存在旁观者效应 ,这种旁观者效应引起的细胞死亡是一种坏死。     

5 个新Y-STR基因座及其在广州地区汉族群体内的单倍型分布

 【目的】 从Y染色体DNA序列中筛选新的Y-STR基因座,调查其在汉族群体中的遗传多态性&;#65377; 【方法】 在人类Y染色体DNA序列中查找Y-STR基因座,确定它们在Y染色体上的定位并测序,与已报道的Y-STR基因座比较&;#65377;检测汉族(广州地区)无关男性群体中这些Y-STR基因座单体型&;#65377;【结果】 鉴别出5个Y-STR基因座(DYS709,DYS720,DYS721,DYS722和DYS723),其中3个STR基因座是新发现的,另2个基因座与在线报告的重叠&;#65377;所有5个STR基因座都是男性特有的&;#65377;它们的扩增产物长度介于185 bp ~ 278 bp&;#65377;在108例汉族无关男性个体中发现DYS709有6个,DYS720有11个,DYS721有4个,DYS722有6个,DYS723有6个等位基因&;#65377;在本组群体中发现95种单体型,其中84种只出现1次&;#65377;单体型多样性达0.997 2 ± 0.001 2&;#65377;【结论】 这组5个Y-STR基因座可望应用于汉族群体的有关研究中&;#65377;     

用 STR进行亲权鉴定时结果的判定及其理论根据

[目的] 探讨亲权鉴定中应该应用的 STR基因座的数量及出现矛盾基因座时下结论的标准.[方法] 根据基因频率和遗传规律,用计算机模拟 1万例亲权鉴定,统计父权指数.根据平均非父排除率和突变率,用二项分布公式计算真父和随机男人出现不同数目矛盾基因座的概率和似然比.[结果] 在 1万例模拟亲权鉴定中,当检测 9个和 13个 STR基因座时,分别有 2%和 0.06%的 PI小于 999.检测 17个 STR基因座,真父和随机男人出现 1个矛盾基因座的似然比为 2.3× 103.检测 24个 STR基因座,真父和随机男人出现 2个, 3个和 4个矛盾基因座的似然比分别为 1 087, 1.408和 0.002.[结论] 亲权鉴定中应该检测 13个以上的 STR基因座.出现 1个和 2个矛盾基因座时,应该分别增加检测到 17和 24个基因座 , 才能下肯定的结论.检测到 3个矛盾基因座时,应该用其它方法作进一步的分析.出现 4个矛盾基因座时,可排除父权关系.     

正交试验在选择聚合酶链反应最适条件中的应用

正交试验在选择聚合酶链反应最适条件中的应用孙晨光，罗超权，伍新尧，杨英浩，扶庆国（中山医科大学生化教研室；广州，５１００８９）主题词聚合酶链反应；研究设计中图号０３．３聚合酶链反应（ＰＣＲ）是８０年代兴起的一种体外ＤＮＡ扩增技术。它能快速特异地扩增目...     

精神分裂症与补体第四成份C4A及C4B基因缺陷关联性研究

目的探讨补体第四成份C4A、C4B基因缺陷与精神分裂症的相关性。方法采用Amp-RFLP(amplificationrestrictionfragmentlengthpolymorphism)方法，对192例精神分裂症患者和142例健康对照组样本补体第四成份C4A、C4B基因缺陷的相关性进行研究。结果精神分裂症患者与补体第四成份C4A基因缺陷纯合子C4AQ0/C4AQ0的发病率显著高于对照组(χ     

用计算机程序进行Hardy-Weinberg氏平衡吻合度测验的方法

本文给出用计算机程序进行Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ氏平衡吻合度的ｘ２检验的方法和有关公式，同时给出在ｘ２值和自由度ｎ给定的情况下，对概率Ｐ（ｘ２，ｎ）进行精确计算的公式，这些方法和公式都已编成计算机程序，使得在进行Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ氏平衡吻合度测验时，能够对数据进行自动化的统计分析，大大地提高了工作效率。     

广东汉族群体Y染色体DYF155S1基因座3''''端多态性研究

【目的】揭示广东汉族人群Y染色体小卫星DYF155S1基因座3'端多态性。【方法】采用Amp-FLP和荧光MVR-PCR方法扩增,PCR产物用ABI377电泳或中性聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染方法分析。【结果】155例无关男性个体的4型核心序列MVR图谱第1条DNA片段大小均为133bp。155例共检出有24种等位基因,有7个等位基因仅出现1次,频率最高的为9号等位基因,DNA条带数为连续的13个,频率为0.1355;基因多样性(h)为0.9226。155人中有3人表现为连续DNA谱带中有1个DNA条带的缺失(nullrepeat),序列分析证明缺失的DNA条带位置对应于3型核心序列。【结论】揭示了DYF155S1位点3'端多态性及其等位基因频率,为群体遗传学研究及法医学应用提供了基础资料。     

基质辅助激光解析-电离-飞行时间质谱法检测单核苷酸多态性的研究进展

单核苷酸多态性(SNP)是人类基因组中单个碱基的变异和备受关注的第三代多态性遗传标记，其最低基因频率不低于1％，在复杂疾病、遗传病研究及法医个体识别和亲权鉴定方面都有重要作用。在器官移植和骨髓移植方面，高产量的SNP分析使较大规模、设有较好对照的完整研究得以进行；而通过详细分析移植物预后显著变异性的复杂基因决定因素，则将更有可能获得个体化治疗和改革治疗概念的机