细胞共培养技术及其在干细胞临床研究中的应用

细胞共培养技术是指在体外将各种不同的细胞置于同一培养环境中,近似模拟体内微环境的一种方法.该系统能很好地展现细胞与细胞之间,细胞与微环境之间的联系,在了解细胞内在机制方面具有重要的理论意义.该方法广泛应用于干细胞研究领域.该文就共培养的研究方法及在干细胞领域中的应用作一综述.     

白花蛇舌草-半枝莲药对组分对结肠腺癌Lovo细胞生物学行为的影响

摘要:目的　探讨白花蛇舌草-半枝莲药对组分对结肠腺癌Lovo细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响及作用机制。方法　将白花蛇舌草、半枝莲按质量1∶1进行3次煎煮,获得水提物,后取适量浸膏用石油醚回流脱脂,再以乙酸乙酯进行多次萃取,获得白花蛇舌草-半枝莲药对组分,并计算得率。实验分为对照组（正常培养Lovo细胞）、白花蛇舌草-半枝莲药对组分低剂量组（10 mg/L）、中剂量组（30 mg/L）及高剂量组（50 mg/L）。通过噻唑蓝比色法（MTT）检测各组细胞培养24、48、72 h后的增殖抑制率。各组细胞培养48 h后,流式细胞仪检测细胞周期分布;Transwell实验检测细胞侵袭能力;划痕实验检测细胞迁移能力;TUNEL法检测细胞凋亡情况;Western blot法检测Grb2相关结合蛋白1（Gab1）、血管内皮生长因子受体2（VEGFR-2）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、苏氨酸激酶（Akt）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达情况。结果　化学萃取后的白花蛇舌草-半枝莲药对中主要含有对羟基苯乙酮、野黄芩苷、木犀草素和芹菜素4种化合物,组分得率为0.61%。与对照组相比,低、中、高剂量组细胞增殖抑制率升高,G1期肿瘤细胞比例增加,细胞凋亡指数增高,侵袭细胞数和划痕闭合率明显减小（均P＜0.05）,细胞中Gab1、VEGFR-2、PI3K、Akt、MMP-9、Bcl-2蛋白表达降低,Bax表达升高（均P＜0.05）,且存在剂量依赖性。结论　白花蛇舌草-半枝莲药对组分可抑制结肠腺癌Lovo细胞的增殖,降低其迁移和侵袭能力,诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制Gab1/VEGFR-2/PI3K/Akt信号通路活化有关。     

胃镜取出婴幼儿食管异物3例体会

胃镜取出婴幼儿食管异物３例体会郄日升病例介绍［例１］１０个月女婴。误吞入２分硬币５天，于１９８９年１２月４日１１时由外院转来。５天来患儿哭闹，只进少许奶汁。在外院摄Ｘ线片见胸锁关节下正中有一圆形影。随即给氯胺酮麻醉下用ＯｌｙｍｐｕｓＰ１０型胃镜插入未...     

不同吸烟状况非小细胞肺癌患者临床特征及表皮生长因子受体突变研究

目的 探讨不同吸烟状况非小细胞肺癌患者的临床特征及表皮生长因子受体(EGFR)突变情况。方法 选取自2019年2月至2022年2月收治的103例非小细胞肺癌患者为研究对象。根据患者的吸烟状况分为A组(有吸烟史,n=52)与B组(无吸烟史,n=51),比较两组患者的临床特征。所有患者入院后均采用高通量测序技术检测EGFR基因突变情况,分析不同吸烟状况非小细胞肺癌患者EGFR基因突变率以及其与临床特征的关系。结果 不同吸烟状况非小细胞肺癌患者的年龄、性别、病理类型和临床分期比较,差异有统计学意义(P <0.05)。两组患者的居住地、家族史、粉尘接触史比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。本研究103例患者中,EGFR基因突变发生率为40.8%(42/103),其中,19-del、L858R突变位点的突变频率最高,分别占突变总体的45.1%(19/42)、33.3%(14/42)。B组患者EGFR基因突变发生率为53.0%(27/51),高于A组的28.8%(15/52),差异有统计学意义(P <0.05)。两组突变型患者的家族史、粉尘接触史、居住地比较,差异均无统计学...     

热休克蛋白10和热休克蛋白60的表达、纯化及与线粒体DNA转录因子A相互结合

目的:表达、纯化热休克蛋白10(Hsp10)和热休克蛋白60(Hsp60),研究人类线粒体DNA转录因子A(TFAM)在体外与Hsp10,Hsp60间的相互交联作用.方法:使用Escherichia.Coli(E.coli)诱导表达含有6个组氨酸标记的Hsp10和Hsp60,镍离子鳌合树脂分离纯化后,体外分别与纯化TFAM共育,抗-TFAM抗体免疫沉淀,SDSPAGE分离蛋白,CBB探测分析.结果:Hsp10可在体外与TFAM发生免疫共沉淀,Hsp60不能.结论:Hsp10可能为TFAM-复合体组分.     

如何撰写医学论文Ⅶ.关于医学论文英文摘要的撰写要求(四)

在第三讲中我们讨论了英文摘要“目的”和“方法”的撰写要求，现继续讲解如何撰写医学论文英文摘要的“结果”、“结论”和“关键词”部分。     

苦瓜中新化合物的化学研究

目的 研究苦瓜的新活性成分.方法 采用乙醇提取、微波萃取、D-101型大孔树脂纯化、硅胶柱色谱以及制备液相色谱等方法分离,通过理化常数及光谱数据鉴定化合物的结构.结果 分离并鉴定了8个化合物,分别为charantadiol A(5β,19-epoxycucurbita-6,23(E),25(26)-triene-3β,19(R)-diol,Ⅰ)、(+)-eduesmin(Ⅱ),blueme-nol A(Ⅲ)、宽叶葱苷元D(karatavilagenin D.Ⅳ)、5β,19-epoxycucurbita-6,23-diene-3β-19,23-triol(Ⅴ)、苦瓜皂苷元Ⅰ(5,19-epoxy-5β-cucurbita-6,23(E)-diene-3β,25-diol,Ⅵ)、苦瓜皂苷L昔元(aglycone of momordicoside L,3β,7β,25-trihydroxy-cucurbita-5,23(E)-diene-19-al,Ⅶ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅷ ).结论 化合物Ⅰ为新化合物,命名为苦瓜二醇A(charantadiol A),化合物Ⅱ、Ⅲ为从苦瓜中首次分离得到.     

云南省3株柯萨奇病毒A组10型分离株全基因组序列分析

目的 分析手足口病相关的柯萨奇病毒A组10型(coxsackievirus A10,CV-A10)云南省分离株的基因组特征.方法 对云南省2009年和2015年3例手足口病患儿临床样本中分离到的3株CV-A10分离株A103/YN/CHN/2015、A72/YN/CHN/2015和R09191/YN/CH N/2009...