大肠杆菌T蛋白PDH结构域的高效表达纯化与活性测定

 目的构建高效表达菌株,以大量表达大肠杆菌T蛋白的预苯酸脱氢酶(PDH),为研究T蛋白双功能结构域CM和PDH的相互协同作用以及T蛋白抑制剂对其影响提供活性蛋白材料。方法利用pGEX高效融合表达系统将PDH与谷光甘肽疏基转移酶(GST)编码序列在表达宿主BL21实现高效表达,并利用对GST具有亲和作用的GlutathioneSepharose4B琼脂糖珠进行亲和层析以对其分离纯化。结果表达产物达菌体总蛋白的40%,可溶性目的产物得量为240mg·L^-1,利用亲和层析法纯化后纯度达92.5%,GSTPDH融合蛋白的PDH的比活为38U·mg^-1。结论本法成功构建高效表达PDH菌株,表达量高,纯化度高,GST-PDH酶活性正常,为进一步研究奠定基础。     

全人源肝癌噬菌体单链抗体的筛选及特异性鉴定

目的对全人源肝癌噬菌体单链抗体库进行鉴定,筛选肝癌抗体,同时对抗体的活性及特异性进行鉴定。方法PCR鉴定阳性重组菌TG1中人肝癌ScFv的插入率。先以人成纤维细胞吸附后再以体外培养的肝癌细胞SMMC7721为抗原对所建抗体库进行3轮“吸附洗脱扩增”的亲和筛选。将筛选后的ScFv进行PCR鉴定及双酶切鉴定;通过ELISA法及FCM鉴定其与人肝癌细胞及正常细胞的结合活性。结果ScFv基因插入率为70%。在亲和筛选过程中,肝癌噬菌体单链抗体得到富集,收获率逐轮得到提高,第3轮为第1轮的214倍。筛选后的ScFv进行PCR鉴定及双酶切鉴定,均可检测到目的基因。ELISA分析结果显示18个克隆与SMMC7721呈阳性反应,阳性率为90%,15个克隆与成纤维细胞有交叉反应。得到3株肝癌单链抗体。ScFv的FCM鉴定表明,以正常胎肝细胞L02为对照,ScFv与肝癌结合比率为41.3%。特异性鉴定表明,其与肝癌细胞结合活性明显高于正常细胞。结论利用噬菌体抗体库技术结合减数筛选得到了肝癌噬菌体单链抗体及其基因,且筛选后的抗体片段与人肝癌细胞有特异性的结合活性。     

卫生监督局成立一年来的实践与体会

随着卫生体制改革的不断深入，在卫生立法不断完善的新形势下，黄冈市卫生局为强化行政执法进一步理顺卫生监督体系，于2004年2月8日由原市卫生防疫站正式组建成黄冈市卫生监督局。一年来，市卫生监督局依据法律、法规所赋予的职责，以党的“十六大”精神为指导，认真实践“三个代表，’的重要思想，坚持以“解放思想、更新观念、深化改革、内强素质、外村形象”的要求，     

一起原因不明食物中毒的流行病学调查

目的 :探索一起原因不明食物中毒的中毒原因。方法 :应用病例一对照研究方法及危险因素分层分析法 ,对食物中毒的致病因素进行探讨。结果 :中毒反应以恶心、腹痛、腹泻等急性胃肠道症状为主 ;筛选出辣螃蟹是本次中毒唯一的危险食物。结论 :本起食物中毒拟认为是食用了加工不当的螃蟹而致的副溶血性弧菌性食物中毒。     

鼻内镜下手术切除鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤15例临床分析

鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤(NIP)属上皮源性良性肿瘤，其特点是上皮向基质内呈乳头状增生，高复发性、破坏性生长方式及易恶性变为其临床特性，手术切除是治疗NIP的最佳选择。以往所采取的手术方式为鼻侧切开术、Caldwell-luc手术及鼻内径路肿瘤切除术，国内许庚、韩德民最早将鼻内镜手术技术应用于鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤。我科1999～2001年应用鼻内镜技术治疗NIP 15例，取得了较为满意的效果，现总结如下。     

谨慎原则在医院会计核算中的应用

谨慎原则是对没有发生但却可能发生的费用和损失加以估计，并加以确认。由于医院经济活动不确定性因素较多，很可能发生经营风险和损失。为把风险和损失缩小到或限制在极小范围内，要求医院在会计核算上，必须严格遵循谨慎原则。如果忽视谨慎原则，会使医院经营产生风险；若是滥用谨慎原则，会产生虚假的会计信息。为此，建立谨慎原则要适度。     

自体外周血干细胞移植在多发性骨髓瘤中的应用

外周血干细胞移植(APBSCT)是经大剂量放、化疗或其他免疫抑制剂预处理，清除受体内的肿瘤细胞、异常克隆细胞，阻断发病机制，然后把造血干细胞移植给受体，使受体重建正常造血及免疫功能。，而达到治疗目的的一种手段。与骨髓移植相比，APBSCT有如下优点①外周血中造血干细胞收集比较方便，无需麻醉，也无需多部位骨髓穿刺之痛     

脑脊液置换术治疗蛛网膜下腔出血的临床观察

目的 :了解脑脊液置换术能否缩短蛛网膜下腔出血 (SAH)患者头痛恢复时间及脑脊液转清时间。方法 :采用回顾性分析、组间对照法 ,观察患者头痛恢复时间及脑脊液转清时间。结果 :SAH治疗后头痛恢复时间及脑脊液转清时间与对照组比较差异有显著性 (P<0 05)。结论 :脑脊液置换术能明显缩短SAH患者头痛恢复时间及脑脊液转清时间 ,从而降低再次出血及脑血管痉挛 ,进而降低SAH的死亡率及致残率     

心理卫生与精神疾病的预防

预防为主是我国卫生工作的方针。精神疾病的预防是指在尽可能的范围内，采取有效措施，创造条件，防止或减少精神疾病的发生、发展和复发，以及对患者本身、家庭、周围人员及社会的不利影响，病因未明者，在现阶段只能开展一般性预防工作。