硝苯地平调控铜绿假单胞菌群体感应系统的初步研究

摘要：目的:探讨硝苯地平调控铜绿假单胞菌（PA）群体感应（QS）系统抑制毒力因子的表达。方法:应用倍比稀释法测定硝苯地平对PA的体外最低抑菌浓度（MIC）;设置空白对照组和实验组,体外构建适宜环境,培养菌株24 h,测定600 nm处硝苯地平对PA增殖的影响,并绘制生长曲线;蛋白水解酶实验测定硝苯地平对PA蛋白水解酶的抑制作用;弹性蛋白酶实验测定硝苯地平对PA弹性蛋白酶的抑制作用;绿脓毒素实验测定硝苯地平对PA绿脓毒素的抑制作用。结果:硝苯地平在体外对PA表现出良好的抗菌活性:硝苯地平抗PA的MIC为256μg·ml-1;生长曲线显示,加样4 h时后,硝苯地平浓度为256,128,64,32μg·ml-1时可明显抑制PA生长（P<0.05或P<0.01）;毒力因子表达实验中,硝苯地平浓度为512,256,128,64,32,16,8μg·ml-1时可明显抑制蛋白水解酶和弹性蛋白酶的活性（P<0.05或P<0.01）,硝苯地平浓度为512,256,128,64,32,16μg·ml-1时可明显抑制绿脓毒素的表达（P<0.05或P<0.01）;且硝苯地平对PA毒力因子表达的抑制作用表现出浓度依赖性。结论:硝苯地平可调控QS系统抑制PA毒力因子表达的作用,在体外可有效抑制PA的生长,有望成为一种新型抗菌增效药物。     

hIL-10基因修饰的L02肝细胞的克隆培养和最高表达株的筛选

目的:确认hIL-10基因修饰的L02肝细胞的克隆培养可实现hIL-10在L02肝细胞中的高效表达．方法:通过构建真核质粒表达载体pchIL-10, 并纯化后转染L02肝细胞．通过G418的压力选择获得hIL-10高表达的克隆株,并以ELISA测定其表达水平．结果:经过测序和酶切验证,真核质粒表达载体pchIL-10构建成功．电泳显示一长约540 bp 条带．hIL-10基因转导可在L02肝细胞中实现 hIL-10的高效表达．最高表达株表达量为每小时69．875 ng/106细胞．结论:hIL-10基因修饰的L02肝细胞的克隆培养可实现hIL-10的高效表达,为抗肝纤维化、肝硬化提供有效途径．     

54例小儿外科手术部位感染的调查北大核心

目的了解小儿外科患者手术部位感染情况及相关影响因素,为制定手术部位感染质量评价指标提供循证依据。方法通过目标监测和资料分析方法,对某儿童医院住院外科手术患儿手术部位感染及其相关危险因素进行调查与分析。结果共调查该医院手术患儿6 819例,其中手术部位感染54例,感染率为0.79%。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类手术部位感染率依次以为0.83%、0.84%和0.40%。手术切口感染的病原菌主要为金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌,分别占33.33%和18.09%。手术时间、手术部位、植入物和NINS指数等为小儿手术部位感染的高风险因素。结论该医院儿科手术部位Ⅰ、Ⅱ类切口感染率高于Ⅲ类切口值得关注,应寻找其中的关键性危险因素,有针对性地采取措施。     

不同程度神经功能缺损的脑梗死患者血尿酸与预后的相关性研究

根据美国国立卫生研究院卒中量表( NIHSS)评分将急性脑梗死患者分为轻度和中重度神经功能缺损两组,发病后第7 天行 NIHSS 评分,第 1 个月和第 3 个月行改良RANKIN量表( mRS)评分,检测发病24 h内和发病后第7天的血尿酸( SUA)浓度,分析SUA与神经功能评分的相关性.55例轻度神经功能缺损患者的SUA浓度无明显变化, SUA浓度与评分均无关;65例中重度神经功能缺损患者的SUA浓度显著降低,且SUA变化值与第7天NIHSS和第1个月mRS有关,Logistic回归显示SUA变化值是第1个月预后不良的危险因素.     

ERK1/2及其上游相关激酶表皮生长因子受体在寻常型银屑病皮损中的表达及意义

目的：探讨 ERK1/2及其上游相关激酶表皮生长因子受体（EGFR）在寻常型银屑病皮损中的表达。方法选取寻常型银屑病患者60例为观察组,另选取60例健康志愿者为对照组,应用 SP 免疫组化法分别检测两组相同部位的 ERK1/2及 EGFR 含量。结果观察组 ERK1/2阳性表达率显著高于对照组;观察组 EGFR 的阳性率高达93.3%,而对照组阳性率仅为15.0%,两组比较差异均有统计学意义（均 P ＜0.001）。结论在寻常型银屑病皮损患者体内 ERK1/2及 EGFR 的表达均显著高于正常人,可能与其发病机制密切相关。     

NHERF3在肾癌组织中的表达变化及其意义

目的研究NHERF3在肾癌及其癌旁组织中的表达变化,为揭示肾癌组织NHERF3表达变化的临床意义提供线索。方法分别采用免疫组织化学法、Western blotting和RT-PCR方法检测肾癌及其对应癌旁组织中NHERF3蛋白及mRNA的表达,比较二者的差异。结果在癌旁组织中,NHERF3蛋白有较丰富的表达,而在肾癌组织中NHERF3蛋白的表达十分微弱(P<0.01);癌旁组织NHERF3 mRNA表达水平亦明显高于肾癌组织(P<0.05),二者之间的差异均有统计学意义。结论肾癌组织中NHERF3蛋白及mRNA与癌旁组织比较均呈现异常低表达,表明NHERF3基因表达在转录水平受到明显抑制,提示与肾癌NHERF3蛋白缺乏相关的NHERF3功能缺失(loss of function)可能在肾癌发生、发展中起重要作用。     

新疆牧区哈萨克族高血压患者疾病相关健康素养现状及其影响因素分析

目的确认牧区哈萨克族高血压患者的健康素养现状及其影响因素。方法采用分层随机整群抽样法对新疆牧区495例哈萨克族高血压患者的健康素养进行问卷调查,并按操作规范对其进行体格检查和相关实验室检查。结果本次受调查的哈萨克族高血压患者健康素养得分平均为(29.32±10.95)分,其中96.77%的研究对象属于健康素养缺乏范围;性别、学历、月收入和病程进入健康素养多元回归方程。结论哈萨克族高血压患者健康素养水平较低,性别、学历、月收入和病程是影响其健康素养水平的重要因素。     

基于荧光共振能量转移技术的快速检测CA16型手足口病病原体新方法的建立及其评价

目的：基于荧光共振能量转移（FRET）技术建立一种柯萨奇病毒A组16型（CA16）手足口病病原体快速检测的新方法,并对检测效果进行评价,使其达到疾病爆发流行期间大样本量检测的要求。方法：采用SDS-PAGE凝胶电脉技术和蛋白浓度定量试剂盒测定CA16鸡卵黄抗体（CA16-IgY）纯度及蛋白水平,采用间接ELISA法检测抗体效价及特异性,采用紫外可见光谱（UV-Vis）、红外光谱（FTIR）和透射电子显微镜（TEM）等方法对所制备的金纳米粒子（AuNPs）及其生物探针（IgY-AuNPs）的尺寸、形貌和性能进行表征;基于FRET技术构建CA16检测体系,通过优化检测体系中IgY-AuNPs浓度、氯化钠（NaCl）用量和荧光恢复时间等指标,对检测方法的灵敏度、特异度和临床样本检测进行评价。结果：CA16-IgY纯度较高,抗体平均蛋白水平为12.15 mg·L^-1,抗体效价高达1：128 000,特异性良好;AuNPs及IgY-AuNPs的UV-Vis、FTIR和TEM观察结果,IgY已成功标记至AuNPs表面,提示已通过静电自组装成功制备了可以特异性识别CA16的IgY-AuNPs。基于FRET技术构建CA16检测体系,体系经优化后,确定IgY-AuNPs的最佳浓度为0.52×10^-3g·L^-1,NaCl的最佳用量为40 μL,荧光恢复最佳时间为90 min,建立的检测方法的标准曲线为I_525nm=15.452IgC-9.746,R²=0.993 2,检测限为1×10⁴ PFU·mL^-1,与临床检测金标准实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法比较,一致率可达93.75%。结论：成功建立了CA16型手足口病病原体的快速检测新方法,可用于实验室和临床检测。