乙肝表面抗原和弓形虫棒状体分泌抗原多功能真核表达载体的构建与鉴定

目的探讨通过体外扩增乙肝表面抗原(HBsAg)基因,构建真核表达载体pcDNA3-HBsAg-ROP2的可行性。方法根据乙肝S基因序列及pcDNA3-p30-ROP2酶切位点等情况设计、合成引物,应用聚合酶链反应(PCR)技术,扩增HBsAg基因片段;应用回收、纯化、酶切、连接等技术,将HBsAg基因替换pcD-NA3-p30-ROP2中的p30基因,并进行酶切、PCR扩增及测序鉴定。结果 PCR扩增出约0.7 kb的目的基因HBsAg,成功构建pcDNA3-HBsAg-ROP2重组载体。PCR、酶切结果与理论相符,重组体包含了HBsAg和ROP2基因的完整序列。结论利用体外扩增乙肝表面抗原,可成功构建乙肝和弓形虫多功能重组载体pcDNA3-HBsAg-ROP2。     

人脑神经干细胞的分离培养及鉴定的研究

目的探讨分离培养人脑神经干细胞的方法及条件。方法用胰蛋白酶消化法从人胚脑中分离单个细胞,用无血清培养基进行体外培养,bFGF和EGF刺激细胞生长,用血清诱导其分化;采用免疫荧光细胞化学染色方法检测培养的细胞神经巢蛋白(Nestin)抗原和分化后成熟神经细胞抗原神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达。结果从胚龄16周的新鲜人胚脑中成功分离出神经干细胞。该细胞可在体外培养条件下传代培养,并表达神经干细胞标志Nestin;分化后的细胞主要表达成熟神经细胞标志NSE。结论在体外培养条件下可从人胚脑中分离培养出神经干细胞。     

血小板膜糖蛋白αⅡb基因A2334 C突变对αⅡ bβ3复合物合成及转运的影响--附一例报告

目的探讨血小板膜糖蛋白αⅡb基因A2334C突变对αⅡbβ3复合物合成的影响。方法构建αⅡb基因A2334C真核表达载体，测序正确后用脂质体将其与表达人整合素β3亚基的真核表达质粒αⅡbβ3共转染CH0细胞，对转染后细胞用Westelmblot法鉴定αⅡb基因A2334C突变体在CH0细胞中的总体表达；用流式细胞仪分析转运至细胞膜表面的αⅡb基因A2334C亚基；为了明确突变亚基的亚细胞定位，构建了αⅡb基因A2334C GFP融合蛋白表达质粒并用激光共聚焦显微镜确定GFP融合蛋白的细胞内定位。结果Western blot证明转基因CH0细胞有αⅡb A2334C基因的表达，但是成熟αⅡb的比例较正常对照低；流式细胞仪检测发现在细胞膜上有该亚基的分布，但是只有正常的25％；进一步的融合蛋白细胞内定位研究显示，αⅡb基因．A2334C GFP可以由内质网转运至高尔基体。结论αⅡb基因A2334C突变没有影响αⅡb的合成及其与B3的结合，但是仅有少部分前体αⅡb能够进一步形成成熟的αⅡb，其膜上的表达仅为正常的25％。该突变不影响αⅡbβ3由内质网向高尔基体的转运。该突变的致病机制可能是αⅡb的折叠错误使其容易降解导致膜上αⅡbβ3复合物减少及血小板功能减弱。     

原发性十二指肠类癌1例报告

患者,男性,57岁,因上腹饱胀不适伴返酸、嗳气2年余于2007年10月12日人院。体检：一般情况好,无贫血消瘦貌,皮肤巩膜无黄染,浅表淋巴结未及肿大,心肺未见异常。腹平软,全腹元压痛,腹部未及异常包块,肝、脾肋下未及,无移动性浊音,肠鸣音元异常。直肠指检无异常。     

S100A4和血管内皮生长因子C、D在胃癌组织中的表达及其与淋巴结转移和预后的关系

目的 观察人胃癌S100A4和血管内皮生长因子(VEGF)-C、VEGF-D的表达,探讨其与临床病理特征及预后的关系.方法 应用免疫组织化学方法检测108例人胃癌及20例癌旁组织中S100A4和VEGF-C、VEGF-D的表达.分析S100A4和VEGF-C、VEGF-D表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、病理类型、浸润深度、淋巴结转移和肿瘤TNM分期的关系,并作预后分析.结果 S100A4和VEGF-C、VEGF-D在胃癌组织中的阳性率明显高于癌旁组织(P＜0.05).S100A4的表达与肿瘤大小和淋巴结转移有关(P＜0.05),VEGF-C的表达与淋巴结转移和TNM分期有关(P＜0.05),VEGF-D的表达与淋巴结转移和TNM分期无明显相关(P＞0.05),肿瘤组织内S100A4和VEGF-C两者表达呈正相关(P＜0.05).S100A4和VEGF-C、VEGF-D阳性胃癌患者5年生存率分别低于阴性患者,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 S100A4和VEGF-C的表达与胃癌的淋巴结转移有关,S100A4可能参与VEGF-C淋巴管生成通路,在胃癌的淋巴结转移中发挥重要作用.     

弧形钢板治疗锁骨骨折25例

我院自 1998年 2月至 2 0 0 0年 12月采用切开复位 ,弧形钢板内固定治疗有移位的锁骨骨折 2 5例 ,疗效满意 ,报告如下。1　临床资料1.1　一般资料 :本组男 15例 ,女 10例。年龄 18～ 6 5岁。左侧 11例 ,右侧 14例。粉碎性骨折 12例 ,横形骨折13例 ,均有不同程度的移位。车祸伤 18例 ,跌伤 4例 ,坠落伤 3例。 2 5例中合并其他部位骨折者 5例 ,合并颅脑外伤 2例 ,肋骨骨折肺挫伤 1例。手术时间为伤后 2～ 14天。1.2　手术方法 :选颈丛麻醉或局部浸润麻醉。患者取仰卧位 ,肩部垫沙袋。沿锁骨上缘切口 ,长约 6 cm,直达骨膜 ,作骨膜下分离暴露锁…     

药物性肝病312例临床分析

目的观察分析药物性肝病的临床特点和诊治方法,总结其临床诊治经验及体会。方法选取我院2010年5月～2012年5月药物性肝病的患者312例,分别对其临床病历与诊治资料进行回顾性分析,按照数字表随机抽取法分成两组,各156例;对照组给予常规甘利欣治疗,观察组在对照组基础上加用舒肝宁联合硫普罗宁治疗,观察对比两组临床治疗效果。结果①病因：在导致药物性肝病的各种类药物中,以抗结核药物导致的发生率最高,占42．3％（132／312）,显著高于其他药物种类导致的发生率（P〈0．05）;②治疗：观察组患者经治疗后总有效率为93．6％（146／156）,对照组患者经治疗后总有效率为68．6％（107／156）,两组治疗总有效率对比存在显著差异（P〈0．05）。结论药物性肝病预防是重中之重,建议临床合理使用抗生素并尽量避免大剂量使用药物,并对用药期间进行随访跟踪,监测生化指标变化,以降低药物性肝病的发生,保证用药安全。     

锁骨外端骨折与肩锁关节脱位治疗分析

目的 评价不稳定型锁骨外端骨折与Ⅲ度肩锁关节脱位治疗方法和疗效.方法 对120例不稳定型锁骨外端骨折和80例Ⅲ度肩锁关节脱位患者分别行手术复位,克氏针张力带同定.喙锁间螺钉固定和锁骨钩钢板固定治疗.平均随访24个月.疗效参照王Lazcano的术后疗效评定标准.结果 优良率:克氏针张力带组为83%,喙锁间螺钉同定组90%,锁骨钩固定组为98%.相比之下,锁骨钩钢板固定符合生物力学要求,疗效好,螺钉固定组次之,克氏针张力带固定组较差.结论 对不稳定型锁骨外端骨折与Ⅲ度肩锁关节脱位内固定应首选锁骨钩钢板.