柔毛水杨梅甲醇提取物通过调控miR-758表达对滋养层细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨柔毛水杨梅甲醇提取物对滋养层细胞增殖、迁移侵袭的影响。方法 不同浓度的柔毛水杨梅甲醇提取物处理人正常滋养细胞HTR8/SVneo后，四甲基偶氮唑蓝（MTT）实验检测细胞增殖，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测HTR8/SVneo、正常胎盘滋养细胞、子痫前期胎盘滋养细胞中miR-758表达水平。将miR-758抑制物转染HTR8/SVneo，检测抑制miR-758表达对HTR8/SVneo细胞增殖、迁移和侵袭的影响。将miR-758模拟物转染HTR8/SVneo，检测过表达miR-758对柔毛水杨梅作用的HTR8/SVneo细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果 柔毛水杨梅甲醇提取物处理后HTR8/SVneo细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著升高，miR-758表达显著降低，并呈一定浓度依赖性（P<0.05）。在子痫前期胎盘滋养细胞中miR-758表达升高，抑制miR-758表达后HTR8/SVneo细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著升高（P<0.05）。过表达miR-758能够逆转柔毛水杨梅甲醇提取物对HTR8/SVneo增殖、迁...     

Ac-SDKP对ROCK通路介导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化的调节作用

目的 研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)是否能够通过对转化生长因子-β1(TGF-β1)介导的ROCK通路的调节,抑制肺成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化.方法 胰酶消化法原代培养肺成纤维细胞,取4代肺成纤维细胞分为对照组、TGF-β1诱导分化组、Y-27632干预组和Ac-SDKP干预组.激光共聚焦扫描显微镜观察ROCK、SRF以及d-SMA在细胞内的定位与分布情况;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测ROCK、SFR、α-SMA、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白在肺成纤维细胞的表达;实时定量荧光聚合酶链反应法(Real time PCR)检测ROCK、SFR、α-SMA mRNA的表达.结果 与对照组相比较,给予TGF-β1诱导刺激后,激光共聚焦扫描显微镜显示胞体内出现大量平行或交叉排列的α-SMA抗体标记的肌丝,诱导刺激6、12、24 h后,ROCK、SRF、α-SMA蛋白和mRNA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均增强,差异均有统计学意义(P＜0.05).与TGF-β1诱导分化组比较,给予Y-27632干预后,在相应时间点ROCK、SRF、d-SMA蛋白和mRNA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).给予Ac-SDKP干预后,在相应时间点ROCK、SRF、α-SMA蛋白和mRNA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达也较TGF-β1诱导分化组明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 Ac-SDKP能够通过对TGF-β1介导的ROCK信号转导通路的调控,阻抑大鼠成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化和抑制胶原蛋白的合成,可能是Ac-SDKP发挥其抗(矽)肺纤维化的作用机制之一.     

不良IVF结局患者NK细胞信号通路调节FoxP3细胞表达的研究

目的探讨IVF不良结局患者叉头样转录因子P3(FoxP3)细胞表达情况及NK细胞信号通路调节机制。方法选取我院自2018年1月至2019年1月间收治的75例IVF不良结局患者作为研究对象,依据失败类型分成3组:实施IVF≥3次均未获得妊娠者(反复失败组)25例、实施IVF后仅生化妊娠患者(生化妊娠组)25例、实施IVF后妊娠12周内胚胎停止发育/自然流产者(流产胚停组)25例;选取同期生育1次健康未孕女性25例作为对照组。所有受检者均于卵泡末期采集静脉血液,EDTA抗凝后密度梯度离心法分离血液中的单个核细胞(PBMC),再用免疫磁珠法分离血液中的NK细胞、CD4+CD25-Treg细胞,流式细胞分析各组NK细胞亚群活性;实时定量PCR检测4组受检者CD4+CD25-Treg细胞中FoxP3 mRNA表达情况,并分析肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的NK细胞对于CD4+CD25-Treg细胞表达FoxP3的影响。结果与健康对照组比较,IVF不良结局各组CD56+、CD56+CD16+NK细胞水平均显著升高(P<0.05);IVF不良结局组中流产胚停组CD56+NK细胞水平显著高于其他两组(P<0.05)。IVF不良结局各组CD4+CD25-Treg细胞FoxP3 mRNA表达水平均显著低于健康对照组(P<0.05),且不良结局组中反复失败组、生化妊娠组CD4+CD25-Treg细胞FoxP3 mRNA表达水平显著低于流产胚停组(P<0.05)。体外刺激实验显示TNF-α诱导NK细胞下调CD4+CD25-Treg细胞FoxP3的表达(P<0.05)。结论IVF不良结局患者外周血中CD56+、CD56+CD16+NK细胞水平显著升高,而Treg细胞中Fox3 mRNA水平显著降低,且NK细胞能够下调Treg细胞中FoxP3的表达。     

低评分胚胎在卵裂期及囊胚期移植的结局分析

目的分析低胚胎评分患者行卵裂期(D_3)或囊胚期(D_5)移植的结局。方法选取接受IVF-ET治疗的低评分胚胎患者222例,根据患者意向分为卵裂期移植组(A组)和囊胚培养组(B组)。比较2组临床妊娠率、继续妊娠率及种植率。结果 2组的取卵周期临床妊娠率无显著差异(P0.05),2组移植周期临床妊娠率、继续妊娠率及种植率有显著差异(P0.05)。结论继续囊胚培养能有效筛选出低评分胚胎中具有发育潜能的胚胎,降低无效移植。     

体外受精-胚胎移植时胚胎培养液HCG、sHLA-G和LIF水平对不孕症患者妊娠结局的预测价值

目的 探讨体外受精-胚胎移植（IVF-ET）时胚胎培养液人绒毛膜促性腺激素（HCG）、人可溶性白细胞抗原G(sHLA-G)、白血病抑制因子（LIF）水平对不孕症患者妊娠结局的预测价值。方法 选择接受IVF-ET的不孕症患者103例，其中妊娠成功49例（成功组）、妊娠失败54例（失败组），取受精第3天胚胎培养液，采用ELISA法检测胚胎培养液HCG、sHLA-G、LIF。收集所有不孕症患者临床资料，采用多因素Logistic回归模型分析不孕症患者接受IVF-ET后妊娠失败的影响因素。采用受试者工作特征（ROC）曲线评估胚胎培养液HCG、sHLA-G、LIF水平对不孕症患者接受IVF-ET后妊娠失败的预测价值。结果 失败组胚胎培养液HCG、sHLA-G、LIF水平均显著低于成功组（P均<0.05）。多因素Logistic回归分析显示，高龄、基础FSH水平下降、基础E2水平下降、无优质胚胎、移植胚胎1个以及胚胎培养液HCG、sHLA-G、LIF低水平均为不孕症患者接受IVF-ET后妊娠失败的影响因素（P均<0.05）。ROC曲线分析显示，胚胎培养液HCG、sHLA-G、LIF水平...     

胚胎培养液中表皮生长因子、转化生长因子、血管内皮生长因子与胚胎发育、妊娠结局的关系

目的分析胚胎培养液中表皮生长因子( EGF)、转化生长因子(TGF)、血管内皮生长因子(VEGF)与胚胎发育及体外受精-胚胎移植(IVF-ET)后妊娠结局的关系。方法选取 2020年 2月至 2021年 6月在唐山市妇幼保健院就诊并接受 IVF-ET的 92例病人为研究对象，根据妊娠结局将其分为妊娠组 54例和非妊娠组 38例；采用 Wetzels胚胎评分系统进行胚胎评级，根据评分将胚胎分为 Ⅰ级组、 Ⅱ级组、 Ⅲ级+Ⅳ级组。留取胚胎培养液，采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测胚胎培养液中 EGF、TGF-β1、VEGF表达水平；采用受试者操作特征(ROC)曲线分析胚胎培养液 EGF、TGF-β1、VEGF水平对妊娠结局的预测价值；采用 logistic回归分析影响 IVF-ET后妊娠结局的因素。结果 Ⅲ级+Ⅳ级组、 Ⅱ级组、 Ⅰ级组 EGF［(0.46±0.19)、(1.14±0.21)、(2.68±0.81)μg/L］、 TGF-β1［( 58.72±15.13)、(80.68±19.12)、(98.74±23.75)ng/L］表达水平依次升高， VEGF［( 39.66±12.71)、(22.85±4.79)、(13.86± 3.32)ng/L］表达水平依次降低(P<0.05)。与妊娠组［(2.54±0.73)μg/L、(85.44±19.87)ng/L、(15.94±3.61)ng/L］相比，非妊娠组 EGF［(1.49±0.43)μg/L］、 TGF-β1［(60.42±15.76)ng/L］表达水平较低， VEGF［(24.75±7.94)ng/L］表达水平较高(P<0.05)。EGF、TGF-β 1、VEGF水平及三者联合预测妊娠结局的曲线下面积( AUC)分别为 0.88［95%CI:(0.78，0.97)］、 0.88［95%CI:(0.78，0.98)］、 0.81［95%CI:(0.68，0.95)］、 0.96［95%CI:(0.90，1.00)］特异度分别为 82.4%、82.4%、94.1%、88.2%，灵敏度分别为 83.3%、94.4%、66.7%、96.4%。VEGF是 IVF-ET后妊娠失败的独立危险因素( P<0.05)TGF-β1是 IVF-ET后妊娠失败的保护因素(P<0.05)。结论 胚胎培养液中 EGF、TGF-β1、VEGF表达水平可能对评估胚胎质量及预测妊娠结局有重要价值。