“q”形胆管切开取栓术在肝细胞癌伴B4型胆管癌栓治疗中的应用价值

背景与目的：肝癌（HCC）伴B4型胆管癌栓（BDTT）如何取栓目前尚无共识,因此,笔者对1例HCC伴B4型BDTT患者治疗经过进行总结回顾,以期为该病的治疗提供参考。 方法：回顾性分析福建省立医院2019年3月收治1例HCC伴B4型BDTT患者临床资料,在术前精准评估后行手术治疗。术中采用“q”形胆总管切开取栓术,即纵行切开胆总管前壁至右肝胆管前壁,使BDTT完整暴露,再环行切断右肝胆管汇入肝总管处,完整切除肝外BDTT。分析患者术中、术后相关指标及随访情况。 结果：该患者顺利完成右半肝切除+胆囊切除+“q”形胆管切开取栓+肝十二指肠韧带淋巴结清扫术。手术时间313 min,术中出血150 mL。病理学检查结果示,右肝肿物标本大小为4 cm×3 cm×3 cm,低分化HCC,侵犯肝包膜,可见脉管癌栓;胆总管癌栓为HCC。患者术后恢复顺利,无胆汁漏、腹腔感染、肝衰竭等并发症发生,术后第7天出院。随访14个月,患者生活质量良好,肿瘤无复发。 结论：“q”形胆管切开取栓术是HCC伴B4型BDTT安全、有效、且符合无瘤原则的方法,推荐临床参考使用。     

采用一种新的经腹切开膈肌方法治疗肝癌合并膈上下腔静脉癌栓

肝癌合并下腔静脉癌栓是晚期肝癌的表现,以往认为手术治疗效果很差。随着外科技术的发展,手术治疗不仪能去除原发灶,而且能解除癌栓脱落造成心力衰竭和肺动脉栓寒。福建省市阪院收治了1例肝癌合并膈上下腔静脉癌栓患者,旨在探讨肝癌合并下腔静脉癌栓手术过程中经腹切开膈肌显露脯上下腔静脉的新方法。     

RNA干扰逆转肝癌多药耐药

目的 研究siRNA对肝癌耐药细胞系HepG2/mrp1中多药耐药相关蛋白基因(multidrug-resistant-associated 1,mrp1)及其蛋白产物MRP1表达的抑制作用和逆转其耐药性的效果.方法 设计合成针对mrp1启动子区域的RNA干扰小片段,转染肝癌耐药细胞HepG2/mrp1.通过RT-PCR和流式细胞仪,在mRNA和蛋白质水平评估RNA干扰对mrp1表达的影响;MTT法检测RNA干扰逆转HepG2/mrp1细胞多药耐药性的变化,按照实验组和亲本组细胞的半数抑制剂量(ICso)评估RNA干扰对细胞耐药倍数的改变.结果 在耐药细胞HepG2/mrp1中,RNA干扰明显抑制了 mrp1 mRNA和蛋白产物MRP1的表达水平,在相同浓度药物作用下实验组细胞耐药性显著下降.结论 我们设计的siRNA对肝癌耐药细胞HepG2/mrp1中的mrp1基因有显著的抑制作用,具有良好的逆转多药耐药性的效果.

Abstract：

Objective To investigate the suppression of mrp1 and MRP1 induced by small interfering RNA and the restoration of sensitivity to chemotherapeutic drugs in the multidrug-resistant hepatocellular carcinoma cell lines HepG2/mrp1. Methods mrp1-targeted small interfering RNA duplexes were designed and composed and introduced into multidrug-resistant hepatocellular carcinoma cell lines HepG2/mrp1. The suppression of mrp1 mRNA and its gene product MRP1 was examined by RT-PCR and flow cytometry (FCM), respectively. MTT assay was performed to measure the reverse effect of small interfering RNA based on the results of ICs0. Results The overexpression of mrp1 mRNA and MRP1 was effectively suppressed by small interfering RNAs. The level of mrp1 mRNA in the transfected HepG2/mrp1 cells was reduced to (86.36±2.76)% and MRP1 to (89.38±3.76)%compared with those of the controls. The resistance to ADR was reversed five-fold, which indicated the restoration of sensitivity to drugs. Conclusion Small interfering RNA can inhibit mrp1 expression effectively and reverse the multidrug resistance mediated by MRP1.     

胰腺癌中Ring1B、LSD1及P16表达及其与预后的关系

目的:探讨胰腺癌中E3泛素连接酶亚单位Ring1B、组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)及细胞周期调节因子P16表达与及其与患者预后的关系。方法:用免疫组化法检测85例胰腺癌患者手术标本(癌组织与癌旁组织)中LSD1、Ring1B与P16蛋白的表达及分布,并选取其中6对癌组织和癌旁组织,用qRT-PCR和Western blot法检测mRNA和蛋白表达;分析三者在胰腺癌组织中表达的相关性,及其与患者生存的关系。结果:免疫组化结果显示,Ring1B与LSD1蛋白主要表达于细胞浆,P16主要表达于胞核;Ring1B与LSD1在胰腺癌组织中表达明显高于癌旁组织,而P16的表达明显低于癌旁组织(均P0.05);在胰腺癌组织中Ring1B、LSD1的表达与P16的表达均呈负相关(r=-476;r=-0.673,均P0.05)。qRTPCR结果显示,胰腺癌组织中Ring1B和LSD1的mRNA的平均相对表达量均明显高于癌旁组织(8.908vs.1.947;7.126 vs.1.940,均P0.05),P16的mRNA的平均相对表达量明显低于癌旁组织(1.269vs.5.237,P0.05);Western blot结果显示,三者的蛋白表达趋势与mRNA表达一致。生存分析显示,Ring1B、LSD1高表达患者生存率均分别低于其低表达患者(χ~2=8.958,P=0.012;χ~2=8.856,P=0.010),而P16高表达患者生存率高于其低表达患者(χ~2=7.867,P=0.024)。结论:胰腺癌组织中Ring1B与LSD1表达升高,P16表达降低;Ring1B、LSD1可能分别通过组蛋白泛素化和去甲基化调控P16的表达,从而影响胰腺癌预后。     

重组腺病毒介导TIMP-1对人肝癌细胞系体外侵袭的影响

[目的]探讨人基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(hTIMP-1)过表达对人肝癌细胞系HepG2体外侵袭的作用。[方法]构建携载hTIMP-1全长cDNA的重组腺病毒AdhTIMP-1,转染HepG2细胞,利用MTT、细胞生长曲线及BoydenChamber检测hTIMP-1对HepG2细胞体外增殖和侵袭能力的影响。[结果]成功构建重组腺病毒并实现体外表达,转染HepG2细胞,对其体外增殖及侵袭有明显抑制作用,细胞增殖率为49%,穿膜细胞相对百分率为(8.4±1.2)%(P<0.01)。[结论]hTIMP-1的过表达能有效抑制人肝癌细胞系HepG2的体外侵袭,可望用于肝癌基因治疗的研究。     

胆囊十二指肠瘘的诊断与治疗

目的探讨胆囊十二指肠瘘的病因、诊断与治疗。方法对1993年11月~2002年12月收治的55例胆囊十二指肠瘘的临床资料进行回顾性分析。结果胆囊十二指肠瘘大多由胆石症引起,消化性溃疡、胆囊癌、外伤为少见病因。55例术前诊断率为18.1%(10/55),其余均在术中或行其他手术时发现的。全部经手术治愈。术后十二指肠漏、切口感染、败血症各1例,经保守治疗后治愈。结论胆囊十二指肠瘘术前诊断较为困难,对长期胆囊结石患者尤其发现胆囊萎缩、囊区内胆汁暗区消失或肝内胆管系统积气应高度怀疑。对胆道疾病的及时诊断与治疗是减少胆囊十二指肠瘘发生率和改善其预后的关键。     

肝细胞癌合并胆管癌栓多学科诊治中国专家共识(2020版)

肝细胞癌伴胆管癌栓(bile duct tumor thrombus,BDTT)是肝细胞癌的一种特殊类型,发生率为0.5%~2.5%,疾病进展快、预后差,目前国内外尚无相关的诊治共识,造成该病的治疗极不规范。中国医师协会肝癌专业委员会基于国内外本领域研究获得的循证医学证据,并结合我国的临床实践,特制订《肝细胞癌伴胆管癌栓多学科诊治中国专家共识(2020版)》。该共识针对肝细胞癌伴胆管癌栓的临床表现、诊断及分型、外科治疗、辅助治疗,以及其他局部、区域性和系统性治疗进行系统阐述,旨在规范、普及和提高对肝细胞癌伴胆管癌栓的诊断和多学科治疗水平,改善该病总体预后。     

用幽门括约肌替代Oddi括约肌行胃窦胆囊吻合术的动物研究

目的　探讨能否利用幽门括约肌来替代oddi括约肌。方法　选取草原犬 15只 ,随机分为对照组 5只 ,实验组 10只。对照组行开腹关腹术。实验组手术方式为 :保留胃窦神经支配 ,胃窦与胃体离断后 ,行胃窦胆囊吻合、空肠胃体吻合术。并分别在胃窦和十二指肠置造影用塑料管 ;采用放射免疫法测定对照组术前、术后 4周及实验组术前、术后 1周 ,4周血浆胃泌素 (Gn) ,生长抑素 (SS) ,神经降压素 (NT) ,β 内非肽 (β EP)浓度 ;在透视下经十二指肠造瘘管、胃窦造瘘管分别注入 2 0 %泛影葡胺 ,观察有无反流及胃窦内容通过幽门情况 ;采用石蜡包埋切片HE染色光镜观察实验组术前及术后 4周肝、胆囊、胆管、胃窦、胃组织学变化。结果　造影结果显示无造影剂反流入胃窦 ,造影剂可从胃窦进入十二指肠。定量结果显示实验组术前与术后Gn、NT、SS、β EP血浆浓度无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;对照组与实验组术后Gn、NT、SS、β EP血浆浓度无明显差异 (P >0 .0 5 )。光镜下观察实验组术前与术后 4周肝 ,胃窦 ,胆管组织学无明显改变。 结论　用幽门括约肌来代替Oddi括约肌行胃窦胆囊吻合术具有防止肠液向胆道反流的作用。     

小鼠肝Kupffer细胞分离方法探讨

目的 探讨分离BALB/c小鼠肝Kupffer细胞(KC)的方法.方法采用在体酶灌注和离体酶消化、不连续密度梯度离心、选择性贴壁三步法分离KC,并比较链霉蛋白酶、Ⅳ型胶原酶及联用链霉蛋白酶和Ⅳ型胶原酶等3种不同酶消化分离方法所得KC得率及纯度.结果3种不同酶消化分离方法细胞得率分别为(6.32±0.5)×106 g-1,(3.66±0.4)×106g-1,(10.3±0.7)×106 g-1;细胞纯度分别为(93.2±1.7)％,(90.7±1.5)％,(94.5±1.9)％.结论联合链霉蛋白酶和Ⅳ型胶原酶在体灌注和离体消化是分离小鼠KC的较好方法.     

表达吲哚胺2,3-二氧化酶的Kupffer细胞在体外对同种异体T淋巴细胞的凋亡作用

目的 探讨表达吲哚胺2,3-二氧化酶(IDO)的Kupffer细胞(KC)在体外对小鼠同种异体T淋巴细胞(TC)增殖的抑制作用.方法 用实时荧光定量PCR检测经IFN-γ处理或未处理的KC表达IDOmRNA和FasLmRNA的情况.用高压液相色谱仪分析IDO对色氨酸的分解作用以了解其活性.用3H嵌入增殖试验检测KC对同种异体TC增殖抑制情况.用流式细胞仪分析KC对同种异体TC细胞周期的影响和凋亡作用.结果 实时荧光定量PCR显示:经IFN-γ处理后小鼠KC表达IDO和FasL并且其表达在6 h后均达到高峰.IDO能降低培养基中色氨酸的浓度,提高其代谢产物犬尿氨酸浓度.表达IDO的KC能明显抑制同种异体TC的增殖,但1-甲基色氨酸和抗FasL抗体能部分阻断其增殖抑制作用,且存在剂量依赖关系.表达IDO和FasL的KC能阻滞同种异体TC于G1中期,诱导其凋亡.结论 除了FasL/Fas途径,IDO可能是KC抑制同种异体TC的增殖并诱导其凋亡的另一机制.

Abstract：

Objective To investigate kupffer cells (KCs) expressing indoleamine 2,3-dioxygenase(IDO)in the inhibition of allogeneic T-cell proliferation in vitro. Methods Real-time PCR was used to investigate the expression of IDO mRNA and FasL mRNA in KCs pretreated with or without IFNγ. High performance liquid chromatography was used to analyze the catabolism of tryptophan by IDO from KCs. Allogeneic T-cell response was used to confirm the inhibition of KCs in vitro. The proliferation of lymphocytes was detected using [3 H] thymidine incorporation. Cell cycle and lymphocyte apoptosis were evaluated by flow cytometric assay. Results Real-time PCR revealed IDO mRNA and FasL mRNA expression in KCs pretreated with IFN-γ. IDO catabolic effect was confirmed by a decrease in tryptophan and increase in kynurenine concentration. KCs expressing IDO and FasL from BABL/c mice acquire the ability to suppress the proliferation of T-cells from C57BL/6, which could be blocked by the addition of 1-methyl-tryptophan and anti-FasL antibody. The co-cultured T-cells with KCs expressing IDO and FasL could induce allogeneic T-cell apoptosis and exhibited cell-cycle arrest in G1. Conclusion In addition to the Fas/FasL pathway, IDO may also play an important role in KCs to inhibit allogeneic T-cell proliferation in vitro.