川芎嗪对肾脏缺血/再灌注大鼠GRP78和Caspase-12表达的影响

目的观察川芎嗪(TMP)对肾缺血/再灌注(I/R)大鼠肾脏GRP78、Caspase-12表达的影响及其意义。方法将Wistar大鼠30只随机分为假手术组(对照组)、I/R组和I/R+TMP组。采用夹闭双侧肾蒂45min再灌注24h制备肾I/R模型。I/R+TMP组在手术前1h按20mg/kg腹腔注射TMP,余操作同I/R组。检测血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr);光镜观察肾小管组织结构变化;RT-PCR和免疫组化检测GRP78、Caspase-12 mRNA和蛋白表达。结果与假手术组比较,I/R组大鼠血清BUN,Cr水平显著升高,肾组织损伤严重,GRP78和Caspase-12 mRNA和蛋白表达呈显著性增加(P<0.01);与I/R组比较,I/R+TMP组血清BUN、Cr水平及GRP78、Caspase-12表达均有显著性下降(P<0.01),肾脏损伤明显减轻。结论川芎嗪对肾脏缺血/再灌注大鼠GRP78、Caspase-12过度表达有很好的抑制作用,这可能是它减轻肾脏缺血/再灌注损伤的重要机制之一。     

PUMA介导大鼠缺氧/复氧心肌细胞凋亡的研究

目的研究促凋亡蛋白p53上调凋亡调制物(PUMA)在大鼠缺氧/复氧(H/R)心肌细胞凋亡中的作用及意义。方法原代培养的大鼠心肌细胞缺氧5 h后复氧2～12 h以制备缺氧/复氧损伤模型,靶向PUMA的siRNA转染大鼠心肌细胞以建立PUMA沉默表达模型。采用Annexin V-FITC联合PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;分光光度法检测Caspase-3活性变化;RT-PCR、Western blot等方法分析PUMA及凋亡相关基因Bax、Bcl-2的mRNA及蛋白表达变化。结果与正常对照组相比,H/R处理后心肌细胞凋亡率及Caspase-3活性迅速上升;PUMA mRNA及蛋白表达上调,凋亡相关蛋白Bax表达上调及Bcl-2的表达下调。靶向PUMA的siRNA转染后,Bax上调表达及Bcl-2下调表达的程度明显被抑制。结论在大鼠心肌细胞缺氧/复氧过程中,PU-MA表达明显升高,其可能通过下调Bcl-2表达及上调Bax表达导致Caspase-3活性增加以介导心肌细胞凋亡。     

白英水提物诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的实验研究

目的:观察白英水提物(ESL)对胃癌SGC-7901细胞凋亡及相关基因表达的影响.方法:常规法制备ESL;实验分正常对照组、白英处理组和顺铂处理组.白英处理组加入ESL终浓度分别为12.5、25、50 mg/mL.MTT法检测细胞增殖抑制率,荧光显微镜观察SGC-7901细胞凋亡及形态变化,半定量RT-PCR分析基因bcl-xl、bid、Caspase-9 mRNA表达,荧光分析法测定Caspase-3活性.结果:与正常对照组比较,三个剂量白英处理组SGC-7901细胞增殖抑制均有显著性增加,且呈明显的时效和量效关系,细胞凋亡显著增多(P＜0.05),表现细胞核固缩、染色质凝集、边聚等;bcl-xl mRNA表达显著下降(P＜0.05),bid、Caspase-9 mRNA表达显著性升高(P＜0.05),并随ESL浓度增加而加强,Caspaes-3活性亦显著性增高(P＜0.01).结论:ESL能剂量依赖性诱导SGC-7901细胞凋亡和抑制增殖,其作用与调控bcl-xl、bid、Caspase-9 mRNA表达和增强Caspase-3活性相关.     

周期蛋白A、D1和增殖细胞核抗原在肺癌中的表达及临床意义

目的观察细胞周期蛋白A、D1（Cyclin A、D1）和增殖细胞核抗原（PCNA）在肺癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化和RT-PCR方法观察94例肺癌组织和10例假瘤炎性肺组织（对照组）中Cyclin A、D1和PCNA的表达。结果在94例肺癌中，Cyclin A蛋白表达阳性率为84.0%；Cyclin D1蛋白表达阳性率为63．8％;PCNA蛋白表达阳性率为68．1％；肺癌的分期与Cyclin A和PCNA蛋白的表达相关（P〈0．05）。在小细胞癌、鳞癌中Cyclin A、D1的mRNA表达较对照组均存非常显著的提高（P〈0.01）;在腺癌中Cyclin A、D1的mRNA表达较对照组也有明照增强（P〈0．05）。结论肺癌中Cyclin A和PCNA蛋白表达有显著升高，Cyclin A和PCNA蛋白的过表达与肺癌的分期相关。     

间接免疫酶标法在肿瘤细胞核抗原免疫定位上的应用

本文用间接免疫酶标技术对大鼠Morris_(7777)肝癌细胞核抗原(非组蛋白[NP]-DNA复合物)进行组织化学免疫定位。采用酸性乙醇处理可有效地消除内源酶活力的干扰,但不影响组织抗原物质的免疫活性。     

肾缺血再灌注损伤与内质网应激

急性肾衰竭(acuterenal failure,ARF)是由于多种病因引起肾功能在短期内(数小时至数周)迅速减退,肾小球滤过功能下降,血尿素氮及肌酐迅速升高,并引起水、电解质和酸碱平衡失调及急性尿毒症等的临床综合症状.在临床上,住院患者ARF发生率约为5%,且约2%至10%的ARF危重患者最终发展为肾衰竭晚期,需要进行长期的透析治疗[1],其中由肾缺血(肾前性因素或缺血性急性肾小管坏死)引起者占75%[2].     

大鼠Morris7777肝癌去组蛋白染色质的免疫特异性

如果癌的发生确是由于真核细胞基因表达的正常控制遭到改变的话,那么寻找癌变过程中导致基因表达变化的调节因子将是十分有意义的工作。目前认为染色质非组蛋白在基因表达中可能起重要的调节作用,因此非组蛋白的变化最引人注意。自从Chytil等报道鸡输卵管去组蛋白染色质(DHC)能在兔体内产生特异性抗体以来,Wakaba-     

肾腺苷脱氨酶及其结合蛋白的纯化和性质研究

目的：探讨人肾细胞腺苷脱氨酶（ADA）分子特性。方法：用免疫亲和层析法分离纯化ADA,测氨法测定ADA活性。结果：获得的ADA全酶分子达电泳纯,酶化尖力为2561．41U/mg,得率26．59％。经SDS－PAGE分析,全酶由45．6KD的小分子的ADA亚单位和无ADA活性的结合蛋白（ADAbp,其分子量为68．1KD和108．7KD）构成。用腺苷或脱氧腺苷为底物,全酶的Km值分别为89μmol/L和67μmol/L。对氯汞苯甲酸能显抑制酶活性,二硫苏糖醇可使被抑制的活性得到部分恢复,当腺苷浓度在50－150μmol/L范围内,ADAbp对ADA活性的抑制率为18．4％－21．5％。结论：人肾细胞中ADA为小分子ADA亚单位和无ADA活性的ADAbp构成的大分子ADA,巯流是该酶活性中心的必需基团,且ADAbp对ADA活性有抑制作用。     

碱性成纤维细胞生长因子促进血管内皮细胞增殖作用的实验研究

目的:探讨不同浓度的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对体外培养的人眼眶内微血管内皮细胞生长的影响。方法:通过不锈钢筛网2次过滤法分离得到眼眶内微血管内皮细胞.将浓度为20,40,80,160μg/L的bFGF分别加入内皮细胞培养液中作为实验组(I-IV)。不加bFGF的作为对照组,分别在24,48,72h,应用MTT法进行细胞计数。结果:用不锈钢筛网两次过滤法成功的分离到内皮细胞。3d内,实验组和对照组的内皮细胞都有不同程度的增殖。培养24h,实验组与对照组比较,P>0.05,无统计学差异;48h,III,IV与对照组及I,II组比较,差异非常显著(P<0.01);72h时,III组与其它实验组及对照组比较,差异非常显著(P<0.01)。结论:一定浓度的bFGF有非常明显的促血管内皮细胞生长的作用,其中以80μg/L的浓度最显著,可能对早期羟基磷灰石眶内植入血管内生延迟有较大的治疗作用。     

miRNA与肿瘤转移的研究进展

介绍微小RNA(miRNA)与肿瘤转移的关系,简述miRNA如何通过肿瘤干细胞、血管再生、肿瘤相关巨噬细胞和上皮间质转化等途径影响肿瘤转移,并提出miRNA通过上述途径调控肿瘤转移可能成为今后肿瘤治疗的新方向,可望为肿瘤治疗提供有益的参考或启示。