肠出血性大肠埃希菌O157∶H7菌株的细胞毒性比较

目的 比较肠出血性大肠埃希菌流行菌株的细胞毒性,筛选强毒株,为进一步研究细菌的致病机理提供理论依据.方法 采用PCR技术鉴定菌株的毒力基因E-hlyA、stx2、stxl,Giemsa染色观察细菌的黏附情况,通过测定感染后Vero细胞的乳酸脱氢酶释放情况了解细菌的Vero细胞毒性强弱.结果 肠出血性大肠埃希菌O157∶H7菌株含有的毒力基因不同,均具有较强的黏附能力和Vero细胞毒性,其中国际菌株933W/O,中国流行菌株882364、01H112和日本菌株Cua9的Vero细胞毒性较强.结论 筛选出的流行菌株强毒株,可用于进一步的细菌感染模型构建和毒力基因致病机制研究.     

肠出血性大肠杆菌O157：H7的紧密黏附素基因eae的测序及生物信息学分析

目的克隆编码肠出血型大肠杆菌O157：H7的紧密黏附素eae基因，并对其进行测序及生物信息学分析，为研究EHEC与宿主细胞相互作用奠定基础。方法利用PCR技术扩增eae基因，经过纯化，将其定向插入克隆载体PMD19-T simple vector并进行测序．应用生物信息学软件分析其生物学特性。结果用PCR方法扩增eae基因，大小为2802bp，编码934个氨基酸，用DNAstar5．0软件分析紧密黏附素（Intimin）蛋白的生物活性，在202～210、510—520、716—735个氨基酸残基的肽链上，显示该蛋白具有良好的亲水性，在175～220、300。315、550～610、710—780、825～880个氨基酸残基的肽链上具有良好的柔韧性，在220～300、615～710个氨基酸残基的肽链上．显示该蛋白具有良好的抗原性。结论本研究用PCR法扩增出了O157：H7的eae基因，成功构建了肠出血性大肠杆菌O157：H7紧密黏附素eae基因的重组质粒，并分析了黏附素蛋白的亲水性、柔韧性、抗原性，为进一步研究大肠杆菌O157：H7黏附素的致病机制奠定了基础，为下一步表达出Intimin蛋白，进一步研究该蛋白与宿主细胞的粘附、免疫原性、抗原抗体反应提供了理论依据。     

采用PCR微板核酸杂交-ELISA技术进行HBV DNA基因分型的研究

目的 采用PCR微板核酸杂交－ELISA技术对HBV DNA进行基因分型研究。方法 采用PCR、核酸杂交和酶联显色技术,首先将HBV DNA进行PCR扩增,并将扩增产物加入预先包被HBV通用探针的微孔板,再加入HBV各基因型显色探针,同时进行微板核酸夹心杂交－ELISA显色,对152例临床诊断为不同程度乙型肝炎患者血清中HBV DNA进行基因分型。结果 152例不同临床表面的肝炎患得血清中的HBV DNA的基因型大多集中在B、C和D这3种基因型,其所占比例分别为：B型28．29％（43／152）,C型（37．50％（57／152）、D硎型18．42％（28／152）;A型、E型、F占比例很少,各占有3．29％（5／152）。还存在一定比例的混合基因型,B、C、D三型不同组合的混合型共占10．53％（16／152）。结论 PCR微板核酸杂交－ELISA方法可以准确、快速、简便进行HBV基因分型,在探讨HBV的流行病学及观察各基因型毒力强弱及致病性大小方面有重要意义。     

事关国计民生的重大课题——关于应急型公共卫生人才培养的实践探索

突发公共卫生问题是关系到国计民生的重大问题。围绕处置突发公共卫生事件"侦、检、消、防、治"关键技术,加快"核、化、生"相关学科融合,改善教学支撑条件,加强教学内容改革,增设应急课程,研制便携式应急装备,形成现场快速诊断和实验室精确鉴定能力,培养学生现场处置能力和组织指挥能力,培养我国高素质应急型公共卫生人才。     

发挥公共卫生学科优势 探索本科生创新教育模式

培养公共卫生创新人才是当前公共卫生事业发展的迫切需要。本文从建设高水平的学科,加强人才队伍建设,建立本科生创新教育基地,开设创新课程,成立本科生创新小组,给学生提供科研项目,培养本科生应对突发公共卫生事件现场的处置能力和组织指挥能力,为学生提供社会实践机会,逐步提高本科生的创新意识和创新实践能力等方面探索并实践我国高素质应急型公共卫生学本科生创新教育模式。     

预防医学专业学生毕业论文中存在的问题及对策

对预防医学专业大学生毕业论文设计、写作过程中存在的问题进行简要总结,并提出相应对策,为深化预防医学专业教学改革、培养合格的预防医学专业人才提供参考。     

H7N9病毒的来源和重组模式

目的通过序列分析揭示H7N9病毒的来源和重组产生模式。方法收集H7N9序列,运用BLAST、MEGA5.0等生物信息
学软件分析序列相似性、多序列比对、构建进化树,确定H7N9病毒各节段序列的亲缘序列,模拟H7N9重组产生方式。结果系
统进化树显示HA、NA、PB2和NS节段最近缘关系序列只有一个;而PB1、PA、NP和MP节段序列,分布于不同的两个分枝。通
过组合分析亲缘序列,可以将目前流行的H7N9病毒分为5型：A、B、A/Shanghai/1/2013-H7N9、A/Pigeon/Shanghai/S1069-H7N9
和A/Zhejiang/HZ1/2013-H7N9。A型又可以分为A1和A2亚型。结论通过对序列的组合分析,推测此次H7N9病毒流行至少
由5个病毒经过4次重组产生,产生两个主要流行株A和B型。A1和A2亚型的出现是同一次重组过程中产生两株不同产物;A/
Pigeon/Shanghai/S1069-H7N9 是A 型H7N9 病毒在流行期间与当地H9N2 病毒的再一次重组产生。A/Zhejiang/HZ1/
2013-H7N9是A2亚型和B型重组后产生的混合型。
     

分子信标PCR检测志贺菌ipaH基因

目的用分子信标探针PCR快速检测志贺菌属(Shigella)。方法根据GenBank上公布的福氏志贺菌M32063株ipaH基因序列,设计引物和分子信标探针,以4种细菌进行对照,进行特异性和灵敏度分析,建立Shigella的实时PCR技术快速检测,应用于食物中毒和食品检测。结果检测20个样本,Shigella呈阳性,其它呈阴性,时间约2h。结论Shigella分子信标探针技术具有快速、灵敏度高、特异性强等特点,可用于Shigella食物中毒快速诊断和食品微生物检测,为食源性疾病的早期、准确诊断提供新的检测手段。     

深圳市基于污水流行病学的新型冠状病毒奥密克戎变异株感染者来源追踪案例分析

污水流行病学(WBE)是一门新兴学科, 已被应用于药物滥用追踪和传染病病原体监测。在新型冠状病毒(简称新冠病毒)感染疫情期间, WBE被应用于监测疫情流行趋势和提供早期预警。为了及时发现隐匿的新冠病毒感染者, 防止其在社区的传播, 深圳市于2022年7月26日至11月30日在福田、南山、罗湖和盐田区的口岸地带、城中村、居民小区等重点场所布设369个污水采样点位, 覆盖193万人口, 开展污水监测新冠病毒的工作。每日在用水高峰时段进行3 h连续采样, 采用聚乙二醇沉淀法和RT-qPCR进行污水病毒富集浓缩及新冠病毒核酸检测, 并形成了阳性水样处置流程。本文旨在介绍深圳市基于城市污水开展新冠病毒感染者来源追踪的相关案例, 在罗湖区洪湖水质净化厂污水监测有效发挥了早期预警作用并实现感染者来源追踪;在福田区福田南路阳性水样处置中获得监测点位布设的重要经验;在南山区南山村污水监测中揭示了隐匿感染者的存在。分享基于WBE的新冠病毒监测和感染者追踪, 避免新冠病毒感染者在社区传播的经验, 总结污水监测的优势和应用前景, 为未来具有肠道排毒的新发或再发传染病病原体监测提供新的研究思路。     

副溶血性弧菌tdh基因的分子信标PCR技术检测

目的采用分子信标PCR技术进行副溶血性弧菌tdh基因检测。方法在反应体系中加入分子信标探针。对13株副溶血性弧菌和其他细菌分别进行tdh基因实时和终点法荧光检测。结果2株副溶血性弧菌和阳性质粒的终点法检测荧光值分别为114．9，95．2，90．0。实时PCR检测的CT值分别为26．2，26．8，32．0。其他肠道细菌终点法检测荧光值为47．0～69．1；CT值〉32．0或无值，与琼脂糖电泳分析结果一致。结论分子信标PCR技术可以准确、快速、实时、简便地进行副溶血性弧菌tdh基因检测。