Ⅳ型狼疮肾炎患者肾组织中程序性死亡配体-1-程序性死亡-1的表达及其意义

目的 了解Ⅳ型狼疮肾炎(LN)患者肾组织中程序性死亡配体-1(PD-L1)、程序性死亡-1(PD-1)的表达及PD-L1与PD-1、肾小管间质病理损害程度的关系、方法 采用免疫组织化学、原位杂交染色法，观察正常肾和Ⅳ型LN患者肾组织PD-L1、PD-1的表达，以及PD-L1阳性强度与肾小管—间质PD-1阳性细胞数、小管—间质病理损害程度的关系。结果 Ⅳ型LN肾组织表达PD-L1、PD-1较正常组增强：狼疮组肾小管PD-L1阳性强度与肾问质PD-1阳性细胞数呈正相关，与肾小管间质病理损害程度呈负相关。结论PD-L1～PD-1信号通路在Ⅳ型狼疮性肾炎肾小管间质病理损害中起重要作用。     

B细胞刺激因子受体融合蛋白改善BXSB狼疮鼠病变的研究

目的 观察腹腔注射B细胞刺激因子受体融合蛋白(BAFF-R-IgG4mut)对狼疮鼠病变的影响.方法 100μl的磷酸盐缓冲液(PBS)、200 μg人IgG4和100 μg BAFF-R-lgG4mut融合蛋白分别经腹腔注入10周龄BXSB狼疮鼠,每周注射3次,共注射5周.分别检测狼疮鼠外周血BAFF水平、外周血和脾脏组织中B220~+CD5~-B细胞、CD3~+CD4~-CD8~+T细胞和CD3~+CD4~+CD8~-T细胞的表达,检测尿蛋白、IgG型抗双链DNA(dsDNA)抗体、肾脏病理损伤指标和狼疮鼠的存活率.以方差分析和X~2检验进行数据统计.结果 实验组9、10、12、15周龄鼠外周血BAFF水平分别是(2.0±1.6)ng/ml、(4.1±2.2)ng/ml、(3.7±1.9)ng/ml、(3.9±1.8)ng/ml,较对照组下降(P<0.01);外周血、脾脏组织中B220~+CD5~-细胞比率较埘照组下降(P<0.01),蛋白尿、IgG型抗dsDNA抗体产生减少,IgG在肾组织沉积及肾组织病理损伤较对照组明显减轻(P<0.01),存活率较对照组延长(P<0.01). 结论 BAFF-R-IgG4mut融合蛋白改善BXSB狼疮鼠病变.     

乳晕双环切口治疗乳腺囊性增生症伴乳房下垂

目的探讨沿乳晕双环法在肿块型乳腺囊性增生症伴乳房下垂治疗中的应用及其意义。方法患者取直立位设计切口：先确定新乳头的位置,画出外环,再以原乳头为中心,画出直径为3．5～4．0cm的内环。之后,去除内外环之间的表皮,广泛分离乳房皮下组织,切除囊性增生病变,并将剩余乳腺组织塑形、悬吊。结果本方法治疗轻、中度乳房下垂的乳腺囊性增生症患者共45例,术后乳房外形满意,乳头、乳晕血供和感觉良好,瘢痕不明显,效果良好。结论对于有需要手术的乳腺良性病变且伴有轻、中度乳房下垂的患者,采用沿乳晕的双环切口既可切除病变,又可悬吊乳房。其操作简便,效果满意。     

PD-L1-PD-1信号通路在肾小管上皮细胞与Jurkat细胞共培养中的作用

目的 了解12-O-十四酰基咐派醇-13-乙酸酯(TPA)对培养的Jurkat细胞表达PD-1的影响以及阻断PD-L1-PD-1信号通路在人近端肾小管上皮细胞株HK2细胞与Jurkat细胞共培养中的作用.方法 RT-PCR、流式细胞计数法检测Jurkat细胞上PD-1的表达,夹心ELISA法检测Jurkat细胞分泌的IL-2. 结果正常培养的Jurkat细胞不表达PD-1 mRNA和蛋白,20 nM的TPA刺激Jurkat细胞24 h后,可见PD-1 mRNA和蛋白表达升高,与对照组比较差异有显著性(P<0.01).HK2细胞与Jurkat细胞共培养上清中IL-2的含量平均为(540±96)pg/mL,当加入抗人PD-L1抗体后,IL-2的平均含量升高为(760±84)pg/mL(P<0.001).结论 TPA刺激Jurkat细胞表达PD-1升高,HK2细胞上的PD-L1可能通过与Jurkat细胞上的PD-1的结合,负调节Jurkat细胞的活性.     

CD4~+/CD8~+ T细胞在维持性血液透析患者血管钙化发生中的作用

目的探讨维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者CD4+T、CD8+T细胞表达变化及其在腹主动脉血管钙化和不良心血管事件中的作用。方法选择30例血液透析方式和透析器均相同的MHD患者为试验组,以侧腹部X射线平片评价腹主动脉钙化情况,再分为钙化组(男8例,女7例)和非钙化组(男7例,女8例),选择同期健康体检者10例为对照组(男女各5例)。分别用流式细胞技术检测两组患者静脉血淋巴细胞亚群表达,免疫比浊法检测血超敏C反应蛋白(sCRP)。以t检验和卡方检验进行数据统计学分析。结果 MHD两组患者年龄、血压、血钙、血磷、血sCRP和血清甲状旁腺素(iPTH)以及CD3+T细胞和CD4+CD3+T细胞百分数差异均无统计学意义(P>0.05)。钙化组CD8+CD3+T细胞百分数为(23.54±4.62)%,较非钙化组的(39.22±7.21)%明显下降(P<0.01);钙化组CD4+/CD8+T细胞比值为(1.81±0.30),较非钙化组的(1.26±0.39)上升(P<0.01),其中CD4+/CD8+T细胞比值在1.5以上及1.5以下血管钙化发生率分别是73%和20%,差异有统计学意义(P<0.01),但CD4+/CD8+T细胞比值在1.5以上和以下其不良心血管事件发生率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 MHD患者存在CD4+/CD8+T细胞表达变化,CD4+/CD8+T细胞参与血管钙化的发生,但CD4+/CD8+T细胞在血管钙化及不良心血管事件发生中的作用需要进一步研究。     

162例次腹膜透析相关性腹膜炎临床分析

目的 探讨持续性不卧订腹膜透析（CAPD）相关性腹膜炎发生的影响因素。方法 从患者性别、年龄、职业、受教育程度、基础疾病、致病菌种类以及透析连接系统类型7个方面回顾性分析我科近6年来收治的162例次CAPD相关性腹膜炎。结果 腹膜炎的平均发生率,妇性低于男性,但无统计学意义（P＝0.533）;≤35岁和大学以上文化患者明显低于其他年龄和文化层次患者（P＜0.01）;双联系统显著低于其他连接系统（P＜0.001）;农民患者明显高于其他职业组患者（P＜0.01）;在各种基础疾病中的分布差异无显著性（P＞0.05）;结核杆菌和真菌感染率有上升趋势。结论 CAPD相关性腹膜炎的发生与患者年龄、性别、职业、受教育程度、致病菌种以及透析连接系统类型等诸因素有关;与ESRD的基础疾病关系不明显。     

腺病毒介导Cubilin反义RNA对肾小管上皮细胞Cubilin蛋白诱导表达的抑制作用

目的构建细菌内同源重组型的Cubilin反义RNA腺病毒表达载体并研究其对肾小管上皮细胞Cubilin蛋白诱导表达的影响.方法 PCR 扩增大鼠Cubilin起始编码区767 bp 的DNA 片段,与T载体连接,测序鉴定连接方向,通过选择反向和同向的双酶切位点与腺病毒穿梭载体pAdtack-CMV 同时酶切和连接,构建反向插入(正向插入作为对照)的腺病毒穿梭载体.将PmeⅠ线性化的腺病毒穿梭载体pAdtack-ACUB和pAdtack-CUB转染包含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1 的受体菌BJ5183(AdEasyTMXL) 进行同源重组.用含有卡那霉素的LB 平板筛选同源重组阳性的克隆, PacⅠ酶切和测序鉴定后,转染包装细胞(293细胞),经病毒扩增和纯化后,再以OD 法和GFP 法计算重组腺病毒的滴度.经免疫印迹法分析Cubilin反义RNA 对Cubilin 蛋白质诱导表达的抑制作用.结果成功构建了Cubilin的反义RNA腺病毒表达载体(pAdEasy-ACUB)和对照正义RNA腺病毒表达载体(pAdEasy-CUB),滴度为2.0 ×1010pfu/ ml、1.8×1010pfu/ ml;Cubilin反义RNA腺病毒表达载体转染可明显抑制大鼠肾小管上皮细胞的Cubilin 蛋白的诱导表达.结论 Cubilin的反义RNA腺病毒表达载体的成功构建以及对肾小管上皮细胞Cubilin蛋白诱导表达的明显抑制作用,为在基因水平的研究和治疗蛋白尿引起的肾间质损伤奠定了良好的基础.     

白蛋白活化肾小管上皮细胞对肾小管周微血管的影响及机制研究

目的 探讨人类血清白蛋白（HSA）超负荷损伤肾小管上皮细胞后对肾间质微血管损伤的影响及可能机制。 方法 激光共聚焦显微镜观察肾小管上皮细胞（HKC）吞饮罗丹明标记白蛋白（TRITC-BSA）以及吞饮受体cubilin siRNA对其的抑制效应。氢化乙锭标记的荧光探针检测白蛋白刺激HKC产生O2－以及白蛋白吞饮受体cubilin siRNA和线粒体呼吸链复合物I抑制剂鱼藤酮对HKC产生O2－的抑制作用。培养上清H2O2采用化学比色方法检测。倒置显微镜下观察HSA激活的HKC以及cubilin siRNA或鱼藤酮预处理的HKC与脐静脉内皮细胞（HUVEC）共培养后血管内皮管样结构形成情况。四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法测定内皮细胞活力。用流式细胞仪以AnnexinV FITC/PI双染法检测内皮细胞凋亡率。 结果 （1）cubilin siRNA可显著抑制HKC吞饮白蛋白(P ＜ 0.05)。（2）HSA刺激HKC产生 ROS呈剂量及时间依赖性(P ＜ 0.05)；cubilin siRNA及鱼藤酮均可抑制白蛋白超负荷诱导HKC产生大量ROS (P ＜ 0.05)。（3）HKC与HUVEC共培养体系中，HSA活化的HKC抑制内皮细胞管样结构的形成，内皮细胞增殖显著减少(P ＜ 0.05)，细胞凋亡率显著增高(P ＜ 0.05)；而cubilin siRNA和鱼藤酮干预组内皮细胞管样结构数及内皮细胞活力显著增加(P ＜ 0.05)，细胞凋亡率显著降低(P ＜ 0.05)。 结论 白蛋白可通过吞饮受体cubilin激活肾小管上皮细胞线粒体呼吸链复合物I产生大量ROS，后者可能是慢性肾病时大量蛋白尿活化肾小管上皮细胞进而损伤肾小管周微血管网的重要介质。     

Mammotome联合开放手术治疗多发性乳腺肿块的研究

目的 探讨超声引导下曼默通(Mammotome,MMT)联合开放手术对多发性乳腺肿块的临床治疗价值.方法 118例多发性乳腺肿块患者,分为MMT联合开放手术组(联合组)及传统开放手术组(对照组),联合组中肿块直径＞2.5 cm者、位于乳晕和乳房边缘者选用开放手术,其余选用MMT.术后随访3个月至1年,比较两组手术情况、术后并发症、美容效果和心理满意度.结果 联合组手术时间短,术后疼痛少,皮下血肿少,切口数量少,患者满意度高,较开放组优势明显.结论 超声引导MMT联合开放手术治疗多发性乳腺肿块,是一种微创、安全、美容效果好的手术方法,值得推广.