44例高血压儿童的护理分析

目的探讨儿童高血压的有效护理方法和价值。方法对44例高血压患儿进行药物治疗和病情观察的同时,实施了心理、用药、饮食等方面的综合护理。结果经精心护理,本组患儿的高血压均得到有效控制,未发生药物不良反应,治疗有效率100％。结论综合护理对于保证药物疗效,避免不良反应的发生十分重要。     

miRNA-20a在膀胱癌中的表达及其机制研究

  目的  探讨miRNA-20a在膀胱癌组织中的表达及其机制。  方法  收集2014年1月至2015年1月昆明医科大学第二附属医院96例患者的组织标本,运用实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）方法检测miRNA-20a在膀胱癌组织和癌旁组织中的表达;生物信息学方法预测miRNA-20a的靶基因并采用双荧光素酶报告基因实验进行验证;qRT-PCR、Western blot以及细胞免疫荧光分别检测人膀胱癌细胞系T24和J82细胞转染miRNA-20a模拟物或阴性对照后对靶基因mRNA和蛋白表达的影响;CCK-8、Transwell侵袭小室和划痕实验检测过表达miRNA-20a后T24细胞体外增殖、迁移和侵袭能力的改变。  结果  miRNA-20a在膀胱癌组织中高表达,且与肿瘤的病理分级、临床分期、转移以及复发密切相关（P＜0.001）;双荧光素酶报告基因实验证实miRNA-20a与人源性长寿保障基因2（Homo sapiens longevity assurance homologue 2,LASS2）的3'-UTR直接靶向结合;转染miRNA-20a模拟物可显著下调膀胱癌细胞中LASS2 mRNA和蛋白的表达（P＜0.01）,增强膀胱癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力（P＜0.01）。  结论  miRNA-20a在膀胱癌组织中高表达,且miRNA-20a可通过靶向抑制LASS2促进膀胱癌细胞的增殖、侵袭和迁移,与膀胱癌的发生发展相关。      

低分子肝素治疗老年慢性阻塞性肺疾病合并肺心病急性发作期效果

目的分析低分子肝素治疗老年慢阻肺合并肺心病急性发作期临床疗效。方法选取我院2012年8月-2013年8月90例接受治疗的老年慢阻肺合并肺心病患者,随机分为对照组和观察组,每组45例。对照组患者均进行常规治疗;观察组患者则在其基础上加以低分子肝素注射治疗;两组均治疗7天。观察两组患者治疗前后血气分析以及疗效的差异。结果观察组患者的血气分析和治疗总有效率明显优于对照组,结果有统计学差异(P0.05)。结论低分子肝素治疗老年慢阻肺合并肺心病急性发作期,在临床中具有积极有效的治疗作用。     

米非司酮和孕三烯酮对子宫内膜间质细胞生长增殖的影响

目的:研究米非司酮和孕三烯酮对体外培养的异位的和正常的子宫内膜间质细胞生长增殖的影响。方法:用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测米非司酮或孕三烯酮处理异位子宫内膜间质细胞0~60小时细胞抑制情况,并绘制细胞生长曲线;采用流式细胞仪检测药物作用36小时异位的和正常的子宫内膜间质细胞的细胞周期及凋亡率变化。结果:米非司酮和孕三烯酮呈时间和剂量方式抑制细胞的生长增殖,且相同浓度后者作用更强。药物作用36小时,各组细胞均发生从G1期到S期的抑制,且各组细胞凋亡率明显升高。结论:①米非司酮和孕三烯酮均抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,但后者作用更强。②米非司酮和孕三烯酮对正常子宫内膜间质细胞的抑制作用明显不如对异位细胞的作用强。     

原位尿流改道的现状及我院15年经验回顾

膀胱癌根治术目前仍然是治疗浸润性膀胱癌最有效的方法，在根治肿瘤的同时，如何重建储尿、排尿功能更接近生理状态的下尿路和保护肾功能是泌尿学者一直探索的问题。近50年来，利用肠道进行尿流改道主要有非可控皮肤尿流改道、可控皮肤尿流改道和原位尿流改道3种，而在过去近20年中，原位尿流改道在全世界许多医学中心的应用已达到膀胱全切患者术后尿流改道的（60％～70％）。     

自噬在膀胱癌中的研究进展

自噬是一种广泛存在于真核生物中高度保守的分解代谢和能量生成过程,通过促进细胞内物质或受损细胞器的降解,为细胞提供可再循环利用的单体物质,用以合成新的成分并产生能量.自噬异常与多种疾病,尤其是癌症的发生、发展密切相关.自噬可以在正常情况下预防癌症的发展,而一旦发展为癌症,自噬又通常会促进肿瘤细胞的存活和生长.大量研究表明...     

凋亡素体外抗膀胱癌效应观察及应用前景分析

目的:观察凋亡素诱导不同膀胱癌细胞株凋亡的效果并结合文献评价其临床应用前景.方法:采用凋亡素原核表达载体pBV220/Apoptin、真核表达载体PCDNA3、人膀胱移行细胞癌细胞株BIU-87及EJ、RT-PCR试剂盒以及质粒提取试剂盒.将原核表达载体中的Apoptin基因克隆入真核表达载体PCDNA3,经双酶切及基因测序鉴定无误后,利用脂质体转染法将真核表达质粒PCDNA3/Apoptin转染膀胱癌细胞株BIU-87及EJ.然后于转染后24h利用RT-PCR观察基因表达情况,并分别于转染后24、48、72h利用透射电镜检测肿瘤细胞超微结构变化、MTT法检测细胞存活率、流式细胞仪TUNAL法检测各组细胞的凋亡率,并对结果行统计学分析.结果:成功构建真核表达载体PCDNA3/Apoptin并转染膀胱癌细胞株BIU-87及EJ.转染24h后,通过RT-PCR法可见凋亡素基因在细胞内表达,并于转染后不同时段观察到实验组细胞发生高效凋亡,并随时间的延长而逐步升高,转染后72h,两种细胞株的凋亡率约为65%,而MTT法所测细胞存活率约为25%.与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).同时通过透射电镜可观察到实验组多数细胞出现凋亡的超微结构变化,如核边集、核碎裂及凋亡小体等.结论:凋亡素可诱导不同的膀胱癌细胞株发生高效的凋亡.考虑到其具有与小分子化疗药物不同的作用机制,我们认为凋亡素有可能成为克服膀胱癌细胞多药耐药性的新途径之一.     

膀胱癌EJ细胞的CD44异常糖基化及其单抗KMP1的生物学功能研究

研究EJ细胞单抗KMP1的结合抗原CD44的变化和KMP1对EJ细胞生物学功能的影响。方法：采用人膀胱癌EJ细胞株免疫BALB/c小鼠,获得单抗KMP1,免疫荧光检测KMP1的亲和性、结合部位及效价。流式细胞检测KMP1对膀胱癌细胞的特异性。免疫组化检测对膀胱癌组织的特异性。亲和层析分离纯化特异性抗原,检测抗原的氨基酸序列。糖基转化酶抑制剂和过碘酸氧化后分析抗原决定簇的理化性质改变。软琼脂培养克隆形成实验和细胞划痕实验检测KMP1对EJ细胞株的增殖和迁移功能的影响。结果：获得的单抗KMP1是IgG1,能与EJ、BIU-87、T24膀胱癌细胞和膀胱癌组织特异性结合,而与Lovo、HeLa、K562、HepG2、Jurkat、293、HCV29、人的红细胞和白细胞无结合性,也不能结合正常膀胱黏膜。其结合EJ细胞的抗原是异常糖基化的CD44,糖基转化酶抑制剂BG作用EJ细胞7d,KMP1对EJ细胞结合性降低,过碘酸氧化后Western blot显示KMP1对CD44结合性降低,软琼脂培养克隆形成实验和细胞划痕实验结果示KMP1还能减弱EJ细胞的增殖和迁移功能。结论：膀胱癌的高复发性、易转移可能与出现异常糖基化的CD44高表达具有一定的相关性,KMP1可结合异常糖基化的CD44,并抑制EJ细胞的增殖和迁移。     

改良型TAT-凋亡素体外抗人膀胱肿瘤活性的研究

目的：探讨改良型TAT-凋亡素 （TAT-VP3） 融合基因在不同人膀胱癌细胞中的表达及诱导凋亡的效应。方法： 利用改良型TAT-VP3原核表达载体pGEX-6p-1-TAT-VP3构建真核表达载体PcDNA3-TAT-VP3, 经BamHⅠ/XhoⅠ双酶切鉴定和基因测序无误后采用脂质体介导的基因转染法转染人膀胱癌BIU-87及EJ细胞, 利用RT-PCR技术检测改良型TAT-VP3基因在细胞中的表达状况。通过透射电镜扫描观察转染后不同时段肿瘤细胞的超微结构变化, MTT法检测转染重组质粒后对人膀胱癌细胞的增殖活性的影响, 流式细胞术TUNAL法检测转染重组质粒24、 48、 72h后BIU-87及EJ细胞的凋亡率, 对实验结果进行统计学分析。结果： 成功构建重组质粒PcDNA3-TAT-VP3并经测序无误, 转染人膀胱癌细胞后的RT-PCR结果证实改良型TAT-VP3基因在人膀胱癌细胞中获得表达。透射电镜观察到BIU-87及EJ细胞凋亡早期染色质聚集, 线粒体固缩, 凋亡中晚期核固缩及凋亡小体等超微形态学改变。MTT法检测结果显示转染重组质粒PcDNA3-TAT-VP3后的BIU-87及EJ细胞增殖活性明显下降 （P<0.01）。流式细胞术TUNAL法检测显示BIU-87及EJ细胞发生早期凋亡, 其凋亡率随时间的推移呈逐渐上升趋势, 转染72 h后BIU-87和EJ细胞的凋亡率分别为 （30.44±1.47） %、（42.27±2.66） %, 与对照组比较差异有统计学意义 （P<0.01）。结论： 改良型TAT-VP3基因的表达能早期、 高效地诱导不同人膀胱癌细胞发生凋亡, 为纯化改良型TAT-VP3融合蛋白以及将其应用于膀胱灌注治疗膀胱转移肿瘤的研究奠定实验基础。