抗生素对巨噬细胞中嗜肺军团菌的抑制作用

嗜肺军团菌是可在巨噬细胞和单核细胞内增殖的兼性胞内菌,这一特性被认为是嗜肺军团菌致病的主要机制。只有能渗入吞噬细胞中的抗生素才能起到有效的治疗作用。有些抗生素,特别是β—内酰胺类抗生素,由于难于渗入细胞内,抗菌效力与药物敏感试验结果不一致。评价药物对兼性胞内菌的抗菌效果应结合药物的抑菌活性及渗入细胞的情况。我们用对嗜肺军团菌易感的肺胞巨噬细胞,检测了10种抗生素对细胞内嗜肺军团菌的作用。 1 材料和方法     

华南地区质粒介导超广谱β-内酰胺酶的基因分型研究

目的：了解华南地区质粒介导超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）的发生率及基因型特征。方法：收集2001年4月－9月革兰阴性菌临床分离无重复株共1184株，采用NCCLS表型筛选和确认试验进行了ESBLs产酶的识别，E-test法检测各亚型ESBLs的MICs值，质粒接合及电转化实验，耐药质粒提取及酶切指纹分析，等电聚焦电泳，PCR通用引物扩增TEM、SHV、CTX－M、VEB、PER、SFO基因及其克隆测序进行ESBLs基因分型和质粒定位。结果：革兰阴性苗ESBLs的检出率为14．6％（173／1184）；获得产ESBLs接合子67株，电转化子11株，其中产CTX－M－14型ESBLs为33．3％（26／78）、CTX－M－3为23．1％（18／78）、CTX－M－9为14．1％（11／78）及SHV-2a为2．6％（2／78），未定型为5．1％（4／78）；29．5％（23／78）野生株伴广谱酶TEM－1或SHV－1型；各型ESBLs基因约定位在35－190kb大小的可接合性低执行者拷贝数天然质粒上；CTX－M型ESBLs以对头孢噻肟高水平高耐为特征。结论：华南地区质粒介导的ESBLs以CTX－M型衍生酶为主，其次是SHV型酶。     

MRSA PBP2a表达的影响因素及MecA基因的检测价值

【目的】探讨温度、pH、盐浓度对甲氧西林耐药金葡菌 (methicillin resistantstaphylococcusaureus,MRSA)青霉素结合蛋白2a(penicillin bindingprotein ,PBP)表达的影响 ,以及PBP2a编码基因MecA的检测价值。【方法】采用聚合酶链式反应(PCR)检测MRSA特异性MecA基因和美国临床实验室标准委员会 (NCCLS)推荐的琼脂板稀释法 (32℃ ,pH7 2 ,40g/LNaCl苯唑西林MIC≥ 4mg/L)筛选MRSA。检测 2 0株MRSA在不同温度、pH、盐浓度时对苯唑西林、头孢唑林和头孢他啶的体外药物敏感性 ,测定MIC范围 ,MIC50 和MIC90 ;SDS PAGE分析 10株MRSA膜青霉素结合蛋白 (PBP2a)在不同培养条件时表达数量的差异 ,并进行配对差值的t检验。【结果】 180株金葡菌检测出MecA基因阳性MRSA 5 6株 ,按琼脂板稀释法检出 5 2株MRSA ,4株未被检出 (苯唑西林MIC分别为 :2 ,2 ,1,0 5mg/L) ,37℃、pH 5 2和 9g/LNaCl分别与 32℃、pH 7 2和 40 g/LNaCl条件下诱导 10株MRSA ,所表达的PBP2a含量前后比较差值有显著性 (P∶0 .0 2～ 0 .0 5 ,0 .0 1～ 0 .0 0 5 ,0 .0 2～ 0 .0 5 )。【结论】不同温度、pH、盐浓度通过诱导耐药蛋白PBP2a的表达明显影响MRSA对苯唑西林、头孢唑林和头孢他啶耐药水平 ,而其MecA基因却不受培养条件的影响 ,可以快速检测MR     

E-test试条对异质性耐万古霉素葡萄球菌的检测

目的 探讨E—test对异质性耐万古霉素葡萄球菌的检测价值。方法 从连续接触万古霉素的脑心浸液琼脂(BHIA)平板上挑取万古霉素异质性耐药葡萄球菌苗株，应用万古霉素E—test试条、药敏纸片和琼脂平板对倍稀释法测定药敏结果。结果 E—test检测的对万古霉素异质性耐药葡萄球菌MRSHl09，MRSH2，MRSH13，MRSH31，MRSH60，MRSHl08，MRSH73，MRSH97，MRSH102的MIC依次为：16、24、48、48、16、32、24、24mg/L，其中耐药7株占77．8％(7/9)，中介2株占22．2％(2/9)；琼脂对倍稀释法的MIC为：16、32、64、32、16、32、32、16、32mg/L，耐药6株占66．7％(6/9)，中介3株占33．3％(3/9）；药敏纸片直径依次为：14、12、10、11、10、15、13、10，13mm，敏感率为11．1％(1/9)。结论 E—test可以便捷直观地鉴定对万古霉素异质性耐药葡萄球菌的药敏结果，与琼脂平板对倍稀释法接近，优于纸片法。     

下呼吸道产AmpC酶细菌医院感染的危险因素分析

1对象和方法1．1对象 2003-01～2004-12我院符合2001年中华人民共和国卫生部下呼吸道医院感染诊断标准（试行），且病原菌为铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、大肠埃希菌的病例124例，根据细菌是否产AmpC酶分为产AmpC酶组与非产AmpC酶组。其中产AmpC酶组30例，非产AmpC酶组94例。     

喹诺酮耐药基因qnrA的协同耐药分子机制研究

目的探讨喹诺酮类药物耐药基因qnrA介导的耐药性及其协同耐药分子机制。方法采用引物特异性PCR结合测序检测qnrA阳性株及gyraseA和parC基因变异情况,Phe-Aag-β-Naphthylamine(PAβN)抑制试验识别外排机制介导的耐药性,琼脂稀释法测定qnrA阳性株对喹诺酮类抗菌药的MIC值。结果QnrA阳性株对喹诺酮类抗菌药的耐药水平存在明显差异,gyraseA、parC基因变异或AcrAB-TolC外排泵等协同耐药机制存在与否与其关系密切。结论qnrA基因介导的耐药性存在协同机制,并加剧了qnrA阳性株的耐药性,给临床抗感染治疗带来严峻挑战。     

20例院内感染SARS患者中西医结合诊治分析

目的：总结院内医务人员感染严重急性呼吸综合征(SARS)的流行病学、临床特征、诊断、治疗和预防等特点。方法：对我院2003年2-5月收治的20例患SARS医护人员的临床资料进行回顾性分析。结果：本组人员均有与SARS患者接触史，潜伏期2～7d，首发症状为发热，有明显的呼吸道症状，部分出现呼吸加速，外周血白细胞不高；X线胸片改变以斑片状肺部浸润影多见；综合治疗措施疗效较好，严格的隔离措施能有效防止SARS的继续传播。结论：医护人员感染SARS诊断相对容易；短期应用糖皮质激素是安全的；中西医结合治疗对改善症状有益。     

医院感染铜绿假单胞菌脉冲场凝胶电泳分析

目的确定铜绿假单胞菌不同基因型与抗菌谱的联系,以追踪院内感染中铜绿假单胞菌菌株在分子水平上的相关性。方法对2002年1月～2004年12月自该院住院患者各种标本中分离获得216株铜绿假单胞菌,用脉冲场凝胶电泳分析耐亚胺培南铜绿假单胞菌的同源性;液体稀释法测定携带blaIMP基因铜绿假单胞菌菌株的最小抑菌浓度,纸片扩散法检测亚胺培南敏感株和耐药株对10种常用抗菌药物的耐药性。结果分离的铜绿假单胞菌主要来自呼吸道标本,对常用抗菌药物的耐药率高,多重耐药现象严重。携带blaIMP基因与不携带blaIMP基因的铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性差异有显著性,未携带blaIMP基因的铜绿假单胞菌菌株在PFGE上表现出不同的分型,而携带blaIMP基因的10株中9株具有相同的PFGE分型。结论blaIMP基因在铜绿假单胞菌的耐药机制中起主要作用,了解铜绿假单胞菌的耐药现状,有利于为临床合理用药提供依据,抗生素的合理使用可减少细菌耐药性的产生,降低医院感染的发病率。     

头孢丙烯治疗下呼吸道细菌性感染的临床评价

目的：评价头孢丙烯治疗下呼吸道细菌性感染的有效性和安全性。方法：采用随机对照开放试验方法。选用头孢呋辛片为对照药，共治疗下呼吸道细菌感染81例，头孢丙烯组40例，500mg；头孢呋辛组41例，500mg，均为每日两次，疗程7－14d。结果：头孢丙烯组及头孢呋辛组有效率分别为90．0％和80．5％，细菌阳性病例有效率分别为82．1％，和72．4％，本试验共分离致病菌57析，细菌清除率分别为82．1％和75．9％，安全性评价分别为41例和43例，不良反应发生率分别为7．3％和9．3％，经统计学处理差异无显著性（P＞0．05），结论：采用头孢丙烯治疗急性下呼吸道细菌感染安全，有效。