体外转染Cyclin A2基因对原代大鼠心肌细胞增殖的影响

目的探讨体外转染细胞周期素A2(Cyclin A2)基因对原代大鼠心肌细胞增殖的影响,为心脏再生提供细胞学依据。方法 SD乳鼠12只,分离、培养、鉴定原代乳鼠心肌细胞并分为3组,实验组:转染带有强化绿色荧光蛋白(GFP)和Cyclin A2基因的重组腺病毒(Ad-Cyclin A2-GFP);空病毒组:转染不含目的基因带有GFP的重组腺病毒(Ad-Null-GFP);阴性对照组:未做转染处理,仅加入等量的培养基。利用GFP示踪技术,评估原代心肌细胞转染效率;转染后的细胞继续体外培养3~5d,利用免疫荧光技术分别检测Cyclin A2、磷酸化组蛋白H3(H3P)、心肌肌钙蛋白-T(c Tn T)。结果 1.荧光GFP示踪表明原代心肌细胞的转染效率高达(97±0.74)%;2.免疫荧光标记显示,空病毒组和对照组结果相似;心肌细胞特异性标记蛋白c Tn T分布于细胞质,原代心肌细胞纯度高达(95±0.62)%;心肌细胞Cyclin A2主要在胞核内聚集,少数分布于细胞质。H3P为核蛋白在细胞核内分布。3.转染Cyclin A2后,实验组H3P阳性率明显高于空病毒组和对照组,差异具有统计学意义(P0.05);实验组可见大量多核细胞,以双核为主,伴少量3核细胞。结论腺病毒作为转染载体对原代心肌细胞有很好的侵染效率;Cyclin A2超表达促进原代心肌细胞形成双核。     

小剂量盐酸右美托咪定在全身麻醉苏醒拔管期的疗效及安全性

目的探析小剂量盐酸右美托咪定在全麻苏醒拔管期的应用价值。方法 80例全麻手术患者随机分为两组(每组40例);治疗组,给予小剂量盐酸右美托咪定;对照组,给予生理盐水,比较两组疗效。结果两组在睁眼、拔管、抬颈5 s及自主呼吸上的时间比较差异无统计学意义(P0.05),在拔管时和拔管后5 min,治疗组血压、心率低于对照组(P0.05)。结论在全身麻醉患者中推行小剂量盐酸右美托咪定方案效果较好。     

杨宇飞教授舌癌的中医康复治疗与验案两则＊

舌癌患者手术及放化疗后会出现构音障碍、吞咽困难、口腔黏膜炎、口干、营养不良等并发症，使患者生存质量下降，甚至导致肿瘤的复发转移，影响生存期，单一方法往往顾此失彼。依托于中国中医科学院西苑医院肿瘤康复基地，杨宇飞教授在国内外调研考察基础上，结合中国国情，构建了一种“门诊多学科肿瘤康复模式”，在舌癌康复方面，以患者为中心，以中医肿瘤内科为主导，多学科共同参与，结合康复科、口腔科、营养科、药剂科等各科优势，形成全程个体化规范序贯康复方案，对患者及早进行康复，在放疗前进行预防性干预尤其重要，使患者能够快速缓解手术和放疗的不良反应，患者获益明显。现取两个典型案例总结其舌癌多学科康复的经验，以期为舌癌的康复提供借鉴。     

经胫骨隧道前交叉韧带双束八股解剖重建的临床研究

目的观察关节镜下采用自体腘绳肌腱经胫骨隧道前交叉韧带（anterior cruciate ligament, ACL）双束八股解剖重建的临床效果。方法随访上海交通大学附属第六人民医院运动医学科2018年12月—2020年1月收治的103例ACL断裂患者资料，其中男78例，女25例，年龄18~45岁，平均（26.8±5.86）岁；左侧47例，右侧56例，均采用关节镜下自体腘绳肌腱经胫骨隧道打股骨骨隧道，ACL双束八股解剖重建。按照Lysholm评分、国际膝关节评分委员会（IKDC）膝关节评分、Tegner膝关节评分标准和膝关节自我效能量表K-SES评价疗效。结果所有患者术后获随访12～42个月，平均（24±8.18）个月；手术前、末次随访评分比较，Lysholm评分分别为（48.41±4.44）分和（95.34±1.91）分，2组比较差异有统计学意义（P<0.001)；IKDC评分分别为（44.05±4.36）分和（95.66±1.89）分，2组比较差异有统计学意义（P<0.001)；Tegner评分分别为（2.84±0.95）分和（6.15±0.89）分，2组比较差异有统计学意义（P<0.001)；膝关节自我效能量表K-SES量表（3.10±0.83）分和（7.12±1.10）分，2组比较差异有统计学意义（P<0.001)。末次随访103例患者前抽屉试验阴性，轴移试验阴性。98例（95.1%）Lachman试验阴性，5例（4.9%）Lachman试验1°阳性。结论关节镜下采用自体腘绳肌腱经胫骨隧道双束八股解剖重建前交叉韧带是一种恢复膝关节稳定性，恢复伤前活动水平的有效方法。     

Biomarkers on patient T cells diagnose active tuberculosis and monitor treatment response

BACKGROUND. The identification and treatment of individuals with tuberculosis (TB) is a global public health priority. Accurate diagnosis of pulmonary active TB (ATB) disease remains challenging and relies on extensive medical evaluation and detection of Mycobacterium tuberculosis (Mtb) in the patient’s sputum. Further, the response to treatment is monitored by sputum culture conversion, which takes several weeks for results. Here, we sought to identify blood-based host biomarkers associated with ATB and hypothesized that immune activation markers on Mtb-specific CD4⁺ T cells would be associated with Mtb load in vivo and could thus provide a gauge of Mtb infection.METHODS. Using polychromatic flow cytometry, we evaluated the expression of immune activation markers on Mtb-specific CD4⁺ T cells from individuals with asymptomatic latent Mtb infection (LTBI) and ATB as well as from ATB patients undergoing anti-TB treatment.RESULTS. Frequencies of Mtb-specific IFN-γ⁺CD4⁺ T cells that expressed immune activation markers CD38 and HLA-DR as well as intracellular proliferation marker Ki-67 were substantially higher in subjects with ATB compared with those with LTBI. These markers accurately classified ATB and LTBI status, with cutoff values of 18%, 60%, and 5% for CD38⁺IFN-γ⁺, HLA-DR⁺IFN-γ⁺, and Ki-67⁺IFN-γ⁺, respectively, with 100% specificity and greater than 96% sensitivity. These markers also distinguished individuals with untreated ATB from those who had successfully completed anti-TB treatment and correlated with decreasing mycobacterial loads during treatment.CONCLUSION. We have identified host blood-based biomarkers on Mtb-specific CD4⁺ T cells that discriminate between ATB and LTBI and provide a set of tools for monitoring treatment response and cure.TRIAL REGISTRATION. Registration is not required for observational studies.FUNDING. This study was funded by Emory University, the NIH, and the Yerkes National Primate Center.     

替考拉宁在中国成人患者中的群体药动学研究

目的建立中国成年患者的替考拉宁(teicoplanin,TEC)群体药动学(population pharmacokinetics,PPK)模型,考察TEC药动学参数的影响因素。方法前瞻性收集139例革兰阳性球菌感染患者静脉注射TEC后的222份常规监测血药浓度和相关信息,采用一级消除的一室模型进行数据拟合,并应用非线性混合效应模型(nonlinear mixed effect model,NONMEM)程序建立PPK模型。采用Bootstrap、正态预测分布误差法(normalized predictive distribution error,NPDE)进行最终模型评价。利用蒙特卡洛模拟法对给药方案进行优化。结果确定了肌酐清除率(creatinine clearance,CLcr)、白蛋白(albumin,ALB)为影响TEC清除率的主要因素。最终模型为:CL(L·h^-1)=1.24×(CLcr/77)0.564×31/ALB;V(L)=69.2。验证表明,模型稳定、有效,且有较好的预测效能。对于不同ALB和CLcr的多数患者起始负荷剂量400 mg/q12h,iv,3次,维持剂量400~800 mg·d^-1的给药方案可达有效治疗谷浓度。严重感染者需调整负荷剂量至800 mg/q12h,iv,3次,维持剂量400~800 mg·d^-1的给药方案来确保血药浓度达到15 mg·L^-1以上。结论本实验报道了CLcr、ALB对TEC清除率有显著影响,所建模型对TEC在中国成人患者中实现个体化给药具有重要应用价值。