p27kip1及p53基因蛋白与恶性卵巢上皮性肿瘤预后的关系

目的　探讨 p2 7kip1和 p5 3基因蛋白在恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达及其与预后的关系。 方法　1992年 11月至 1999年 12月应用免疫组化检测 5 6例恶性卵巢上皮性肿瘤石蜡切片中 p2 7kip1和p5 3基因蛋白表达情况 ,并应用Kaplan -Mier法及多变量Cox比例风险回归模型分析患者预后。 结果　 5 6例恶性卵巢上皮性肿瘤患者的 p2 7kip1基因蛋白表达率为 4 1 1% ;p5 3基因蛋白表达率为 4 8 2 % ,两种基因蛋白表达比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。p2 7kip1及 p5 3基因蛋白表达与肿瘤的病理分级有关 ( P <0 0 5 ) ,与其他临床病理特征无关。单因素分析 :p2 7kip1及 p5 3基因蛋白表达与患者的中位生存时间、生存曲线各时点生存率密切相关。 结论　p2 7kip1基因蛋白表达对恶性卵巢上皮性肿瘤的预后有显著影响 ,而 p5 3基因蛋白表达与预后关系不显著     

外阴癌中HPV感染与p53、MDM2表达的关系

目的 :探讨HPV6/ 11、16/ 18在外阴癌组织中的感染情况及与p5 3、MDM2蛋白表达的关系。方法 :用原位杂交法 (ISH)检测HPV6/ 11、16/ 18在 30例外阴癌、2 1例外阴上皮内瘤变 (VIN)及 10例外阴正常皮肤组织中的表达。同时用免疫组化SP法检测p5 3、MDM2蛋白的表达。结果 :HPV6/ 11、16/ 18在外阴癌、VIN中的阳性表达率分别为 60 % (18/30 )、33.33% (10 / 30 ) ,4 2 .86% (9/ 2 1)、2 8.5 7% (6/ 2 1) ,正常对照组没有表达。p5 3、MDM2蛋白在外阴癌、VIN、正常对照组中的阳性表达率分别为 63.33% (19/ 30 )、4 0 .0 0 % (12 / 30 ) ,4 7.62 %(10 / 2 1)、5 2 .38% (11/ 2 1) ,0 % (0 / 10 )、0 % (0 / 10 )。HPV6/ 11的表达在外阴癌组、VIN组与正常组差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,外阴癌组HPV16/ 18表达与正常组差异有显著性 (P <0 .0 5 )。外阴病变各组p5 3、MDM2与正常组差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :HPV6/ 11、HPV16/ 18、p5 3、MDM2蛋白在外阴组织的不同病变中表达均差异有显著性 ,在外阴癌的发生发展中HPV感染、p5 3突变和MDM2表达可能起一定的作用     

子宫内膜癌中nm23和c-erbB-2蛋白的表达及其意义

目的　研究nm2 3和c -erbB - 2蛋白在子宫内膜癌中的表达及其临床意义。方法　用LSAB免疫组化法检测 4 2例子宫内膜癌中nm2 3和c -erbB - 2蛋白的表达。结果　nm2 3和c -erbB - 2在子宫内膜癌中的阳性表达率分别为 6 0 0 %、 4 7 6 % ,其阳性表达与年龄、不同组织学类型差异无显著 (P >0 0 5 ) ;nm2 3与病理分级呈负相关 (P <0 0 1 ) ,无淋巴结转移者阳性表达率明显高于淋巴结转移者 (71 9%和 2 0 0 % ,P <0 0 5 ) ;c -erbB - 2的表达与癌细胞的分化程度、临床分期有关 ,分化程度高及早期癌中c -erbB - 2表达强。结论　对子宫内膜癌组织进行nm2 3和c -erbB - 2蛋白的检测 ,有助于了解子宫内膜癌的临床病理特征和预后     

不同高浓度CO_2对2-细胞小鼠胚胎体外发育的影响

目的 :观察不同高浓度二氧化碳 ( CO2 )对 2 -细胞小鼠胚胎体外发育的影响。方法 :获取小鼠 2 -细胞胚胎 ,置于 CZB培养液微滴 ,覆盖经三蒸水处理的石蜡油 ,分别在 5 % CO2 (对照组 )、5 .7%CO2 、6.0 % CO2 和 1 5 % CO2 浓度下体外培养 ;在 1 5 % CO2 时 ,另设覆盖经磷酸盐缓冲液 ( PBS)处理的石蜡油或不覆盖石蜡油的实验组 ,观察胚胎发育情况。结果 :5个实验组的囊胚率均显著低于对照组 ( P<0 .0 1 ) ,5 .7% CO2 时仅为 4.3% ,其余 4组的均为 0。 CO2 浓度 5 .7%和 6.0 %时 ,胚胎大部分停滞在 2 -细胞和 4-细胞期 ,两者间无统计学差异 ( P>0 .0 5 )。CO2 浓度 1 5 %时 ,覆盖经三蒸水处理的石蜡油组 ,有 1 5 %的胚胎发育到 4-细胞阶段 ,但 4-细胞胚胎的卵裂球不规则 ,很快退化 ;覆盖经 PBS处理过的石蜡油组 ,有 2 .2 %的胚胎发育到 4-细胞 ,其余出现严重的退化。结论 :高浓度 CO2 对小鼠胚胎发育有强毒性效应 ,引致胚胎发育停滞和严重降解 ;高浓度 CO2 时 ,胚胎覆盖三蒸水处理石蜡油的效果优于经 PBS处理的石蜡油 ;严密监控 CO2 浓度对胚胎体外发育是重要的     

Anticancer Drug Resistance of HeLa Cells Transfected With Rat Glutathione S-transferase pi Gene

Objective To establish a cytologic expressing system of rat glutathione S-transferase pi (GST-pi) cDNA for detecting the resistance of HeLa cells to anticancer drugs. Methods The assessment was made with various anticancer drugs (adriamycin, mitomycin, cisplatinum and vincristine) that showed different cytotoxicities in transfectant HeLa cells with pSV-GT containing rat GST-pi cDNA (HeLa/pSV-GT) or control pSV-neo (HeLa/pSV-neo). Expression levels of GST-pi mRNA in HeLa/pSV-GT and HeLa/pSV-neo were measured by in situ hybridization using Digoxin-labelled cDNA probe. Results HeLa/pSV-GT expressed significantly high degree of GST-pi mRNA, whereas both HeLa/pSV-neo and HeLa cells had very low expression. Cytotoxicities of HeLa/pSV-GT and HeLa/pSV-neo with 4 anticancer drugs were measured by MTT assay. Drug concentrations for yielding 50% inhibition (IC50) in HeLa/pSV-GT by adriamycin, mitomycin and cisplatinum were 70.13μg/mL, 10.95μg/mL and 16.52μg/mE respectively. In contrast, IC50 in HeLa/pSV-neo was 10.34μg/mL, 7.48μg/mL and 13.70μg/mE respectively. The cytotoxicities of vincristine on both HeLa/pSV-GT and HeLa/pSV-neo were not significantly different. Conclusions Our findings suggest that HeLa/pSV-GT containing rat GST-pi cDNA is resistant to some anticancer drugs due to overexpression of GST-pi. Also, HeLa/pSV-GT cell line could serve as a useful cytogenetic model for further research.     

高效液相色谱法测定奥硝唑栓的含量

目的　建立HPLC法测定奥硝唑栓中奥硝唑含量的方法。方法　以HypersilODS 2 50mm× 4mm为分析柱 ,甲醇 水 (34∶66)为流动相 ,检测波长为 31 2nm。结果　线性范围为 1～ 9μg·ml- 1 ,r=0 9978;平均回收率为 1 0 2 8% ,RSD为 1 98%。结论　本法简便、快捷、灵敏 ,可用于该制剂的质量检验     

尼莫地平对氧化型低密度脂蛋白培养的内皮细胞不对称二甲精氨酸的影响

目的：探讨氧化型—低密度脂蛋白(ox—LDL)对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)培养液中内源性一氧化氮合酶抑制剂一不对称二甲精氨酸(ADMA)的影响及尼莫地平的干预作用。方法：采用改良的Jaffe法原代培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)，取3-6代HUVECs用于实验。用Cu^ 引发脂质过氧化过程，制备氧化型低密度脂蛋白。按实验要求加入不同浓度的ox—LDL和尼莫地平，与内皮细胞共同孵育(37℃，5％CO^2)24h后，收集细胞及培养液。高效液相色谱法(HPLC)测定ADMA、L—arg的浓度。流式细胞仪测定细胞内Ca^ 含量，同时测定培养液NO、ET含量。结果：与空白对照组比较，ox—LDL使HUVECs产生ADMA的量呈浓度依赖性增加，ET及细胞内Ca^ 量显著升高；而合成NO的量减少。尼莫地乎能显著减少ox—LDL诱导的ADMA增加，增加N0的合成，同时细胞内Ca^ 含量及CT降低，而合成N0的底物L-arg无明显变化。结论：ox—LDL增加内源性NOS抑制剂—ADMA的产生，导致内皮细胞的功能障碍。尼莫地平能减少ox—LDL诱导的ADMA增加，从而减轻ox—LDL诱导的内皮细胞代谢功能障碍。     

HPLC法测定VE霜的含量

目的　用HPLC法测定VE霜的含量。方法　将VE霜制成供试品溶液 ,经C1 8色谱柱 ,以甲醇为流动相 ,用紫外检测器在2 85nm处检测。结果　VE可与霜剂基质中的成分很好地分离 ,VE的线性范围为 0 .2～ 1.0mg ml,平均回收率为 98.82 % ,RSD为 1.92 %。结论　所建立的方法准确、可靠 ,适用于VE霜的含量测定。     

cppB基因PCR检测淋病奈瑟菌稳定L型的评价

目的 对淋病奈瑟菌隐蔽性质粒B（cryptic plasmidB,cppB)基因用于淋病奈瑟菌稳定L型基因诊断的评价。方法 用非高渗液体培养基培养青霉素诱导形成和自发形成的淋病奈瑟菌稳定L型，获得纯培养物以特异性cppB基因引物进行聚合酶链反应（PCR）检测。结果 淋病奈瑟菌细菌型可检出cppB基因，但不论诱导形成还是自发形成的稳定L型传5代后纯培养物cppB基因检测均为阴性反应。结论 细胞壁缺陷可导致淋病奈瑟菌cppB基因丢失。导致cppB基因鉴定淋病奈瑟菌的假阴性或诊断淋病的漏诊和误诊。     

NHL中HCV感染与P53表达的相关性

目的探讨非霍奇金淋巴瘤 (NHL)中丙型肝炎病毒 (HCV)的感染与P5 3表达的相关性及其意义。方法应用免疫组织化学S P法对 133例NHL和 2 5例良性淋巴组织病变 (BLPC)进行P5 3及HCVTORDJI 2 2蛋白的检测 ,对其中 5 8例NHL和全部BLPC进行HCVRNA的原位RT PCR检测。结果HCV感染阳性共 17例 (TORDJI 2 2阳性 9例 ,HCVRNA阳性 11例 ,双阳性 4例 ) ,感染阳性率为 12 8% (17/ 133) ,BLPC中HCV感染阴性 ,两组比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。NHL中P5 3阳性 71例 (5 3 4 % ) ,BLPC中P5 3均为阴性。 17例HCV阳性NHL中P5 3阳性 13例 (P <0 0 5 )。结论 (1)HCV感染与NHL之间有相关性 ;(2 )HCV可能通过调控P5 3的表达而参与NHL的发生。