多药耐药基因MDR1在Ph(+)急性淋巴细胞白血病伊马替尼耐药细胞株SUP-B15/RI耐药形成中的作用

目的研究多药耐药基因MDR1在Ph(+)急性淋巴细胞白血病〔Ph(+)ALL〕伊马替尼(IM)耐药细胞株SUP-B15/RI耐药机制中的作用。方法 RT-PCR技术检测敏感细胞株SUP-B15和IM耐药细胞株SUP-B15/RI MDR1mRNA表达,改良MTT法测定IM、柔红霉素(DNR)、长春新碱(VCR)、依托泊甙(VP-16)单药及联合维拉帕米作用于SUP-B15细胞和SUP-B15/RI细胞72h后增殖活性的改变,计算抑制率为50%时的药物浓度(IC50),DNR药物外排实验检测MDR1表达产物P-gp功能。结果 MDR1基因在SUP-B15/RI中的表达是敏感细胞SUP-B15的(2.02±0.04)倍(P<0.05)。IM、DNR、VCR、VP-16单药作用于SUP-B15/RI细胞的IC50值较SUP-B15细胞增高(P<0.05),相对耐药倍数(RF)分别为(20.52±2.34)、(10.33±1.88)、(9.78±1.27)、(3.84±0.69)倍。IM、DNR、VCR、VP-16与维拉帕米联合作用于SUP-B15/RI细胞后IC50值较单药时降低(P<0.05),耐药逆转倍数分别为(1.44±0.43)、(3.20±0.17)、(1.44±0.12)、(1.33±0.14)。P-gp蛋白功能在SUP-B15/RI细胞强于SUP-B15细胞,DNR泵出率分别为10.27%、3.43%。结论 MDR1基因在SUP-B15/RI细胞中表达增加,其表达产物P-gp功能增强,P-gp抑制剂维拉帕米可以部分逆转IM耐药。说明MDR1参与SUP-B15/RI细胞IM耐药机制的形成。     

炉甘石炮制工艺初探

炉甘石炮制工艺初探覃葆(广西半宙制药集团公司钦州535000)陈国佩龚玉萍李杏梅韦雪茜(广西中医学院南宁530001)炉甘石解毒明目退翳,收湿止痒敛疮,为临床常用外用药。历代强调入药须煅淬。又因淬液不同而有多种炮制方法。三黄汤制甘石源于清代的《医宗金鉴》,现各省市炮制规范多有收载,然方法上却出现差异,1种是用三黄汤拌已经煅淬(以水为淬液)水飞后的炉甘石细粉,干燥即得(以下简称拌品)。另1种是用三黄汤作淬液煅炉甘石,水飞后....     

实施家属与患者同步健康教育在肥胖2型糖尿病患者的相关性研究

目的探讨对肥胖2型糖尿病患者及其家属进行同步健康教育的效果。方法选择60例肥胖2型糖尿病患者,随机分成实验组（30例）和对照组（30例）,同时配对选择实验组患者的家属30例。2组均接受常规治疗并接受健康教育,并对实验组的家属进行同步健康教育。测定患者健康教育前后体重指数、血脂、血糖及糖化血红蛋白等指标。结果实验组各项指标与对照组比较,差异均有统计学意义（P〉0.05）。结论对肥胖2型糖尿病患者及其家属进行同步健康教育,效果优于仅对患者进行健康教育。     

人胚胎干细胞HuES17向造血干细胞的分化

背景：人类胚胎干细胞是来源于着床前囊胚的内细胞团,能在长期培养中无限增殖并保持未分化状态,且具有分化成人体组织各种细胞类型能力的细胞。 目的：进一步验证人胚胎干细胞HuES17细胞株向造血干细胞分化的能力。 方法：人胚胎干细胞HuES17采用与人包皮成纤维细胞二维共培养的方式培养,采用人胚胎干细胞与小鼠骨髓基质细胞(OP9) 二维共培养的方法诱导胚胎干细胞向造血干细胞分化。 结果与结论：人胚胎干细胞与小鼠骨髓基质细胞(OP9) 二维共培养诱导造血分化的第四五天即开始出现OP9细胞逐渐老化,很快死亡;可以观察到人胚胎干细胞分化,然而,随着OP9细胞死亡,分化的人胚胎干细胞亦死亡,不能诱导人胚胎干细胞向造血干细胞分化。提示人胚胎干细胞HuES17细胞株可能不能向造血干细胞分化,或向造血干细胞分化的能力较低。     

丹参酮ⅡA对白血病细胞株K562增殖抑制及机制研究

目的 探讨丹参酮ⅡA(TAT)对人白血病细胞株K562的生长抑制作用及其可能机制。 方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测TAT（终浓度1、10、15、30、50 μmol/L)对K562细胞的增殖抑制作用,光学显微镜观察TAT (30 μmol/L)作用24 h后K562细胞的形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测凋亡蛋白BCL-2、BAX的表达和蛋白激酶AKT/mTOR信号通路的变化。 结果 终浓度为10~50 μmol/L的TAT对K562细胞的生长具有抑制作用,与对照组比较差异具有统计学意义（P50）值为（7.75±2.47） μmol/L。30 μmol/L TAT作用K562细胞24 h后显微镜下显示细胞破坏明显,部分细胞裂解成碎片。流式细胞仪检测发现30 μmol/L TAT作用组凋亡细胞明显增多（P<0.05）。Western blot结果提示,30 μmol/L TAT作用K562细胞后AKT、mTOR、p70S6K、4-EBP1等信号通路关键点蛋白磷酸化表达水平减低,凋亡抑制蛋白BCL-2下调,而促凋亡蛋白BAX上调。 结论 TAT通过抑制AKT/m-TOR信号通路,下调BCL-2和上调BAX的表达,促进细胞凋亡,抑制白血病细胞株K562的生长。     

伊马替尼、柔红霉素和硼替佐咪对两种Ph(+)白血病细胞株抗肿瘤效应的比较研究

目的 比较研究化疗药物伊马替尼、柔红霉素和硼替佐咪对两种Ph(+)白血病细胞株K562(髓系白血病细胞株,表达P210蛋白)和SUP-B15(急性淋巴细胞白血病细胞株,表达P190蛋白)的抗肿瘤效应.方法 采用MTT法测定不同浓度的伊马替尼、柔红霉素与硼替佐咪分别作用72 h后两种细胞株的增殖活性,并计算3种化疗药物对两种细胞株作用的半数抑制浓度(IC50);RT-PCR法检测不同浓度伊马替尼作用48 h后两种细胞株bcr-abl基因表达的改变.结果 ①不同浓度伊马替尼、柔红霉素与硼替佐咪分别作用K562和SUP-B15细胞株72h,其对细胞株的IC50值分别为(0.286±0.060)μmol/L、(0.303±0.009)μmol/L、(22.127±3.592)nmol/L和(1.387±0.180)μmol/L、(0.117±0.017)μmol/L、(12.35±0.740)nmol/L,提示伊马替尼对K562细胞敏感性明显高于SUP-B15细胞,而柔红霉素对SUP-B15更敏感,硼替佐咪对两种细胞的敏感性无差异;②伊马替尼0、0.35、1.0μmol/L作用48 h后,两株细胞bcr-abl基因表达均无明显变化.结论 伊马替尼、柔红霉素、硼替佐咪对Ph(+)细胞株K562和SUP-B15均有较好的抗肿瘤效应,伊马替尼对K562更敏感,而柔红霉素和硼替佐咪对SUP-B15均有较好的抑制作用,短时间伊马替尼作用后不影响bcr-abl基因的表达.     

丹参酮ⅡA成功治疗一例ATRA和ATO维持治疗复发的APL

目的 观察丹参酮ⅡA(Tanshinone ⅡA,Tan ⅡA)治疗耐全反式维甲酸(ATRA)和亚砷酸(ATO)的急性早幼粒细胞白血病(APL)的疗效.方法 给1例经ATRA和ATO诱导和维持治疗复发的APL患者静脉滴注Tan ⅡA 80 mg/d,直至缓解,并定期检查患者血象和骨髓象,记录该药相关的不良反应.结果 该例经ATRA与ATO诱导缓解、化疗巩固,并用ATRA、ATO、6-巯基嘌呤(6-MP)和甲氨蝶呤(MTX)维持治疗1年而复发的APL患者,先经ATRA与ATO 20 d再诱导无效并致头痛,改用Tan Ⅱ A 80 mg/d静脉滴注54 d达血液学完全缓解,且未见明显不良反应.结论 Tan ⅡA治疗耐ATRA和ATO的APL有效,为耐ATRA和ATO的APL的治疗提示了新的治疗途径.     

原始自然杀伤细胞白血病一例

患,男,77岁.因反复皮肤红斑3个月,于2002年5月6日入院.入院前3个月出现颜面、躯干圆形鲜红色斑,无光敏、脱屑,抗过敏治疗无效.入院查体：全身紫红色皮疹,以胸、腹、背部为主,大小不等（直径0.5～4.0 cm）,略高出皮面.     

人胚胎干细胞Pten基因表达及PI3K/Akt/mTOR信号通路下游蛋白的磷酸化

背景:各种磷酸化蛋白质表达水平对人胚胎干细胞维持未分化状态或定向分化的影响逐渐成为人胚胎干细胞的研究热点,研究发现磷酸化蛋白质表达水平可能决定着人胚胎干细胞的命运。目的:对PI3K/Akt途径下游的关键蛋白磷酸化水平进行检测,寻找PI3K/Akt途径中能够维持人胚胎干细胞未分化状态的下游蛋白。方法:用胎鼠成纤维细胞作为饲养层,二维培养的方法培养人胚胎干细胞,胶原酶消化后待测;以饲养层细胞、K562细胞株为对照。观察人胚胎干细胞生长状态;RT-PCR检测Pten基因表达;WesternBlot检测p-PTEN、p-mTOR、p-P70S6Kp-4E-BP14种蛋白的表达。结果与结论:人胚胎干细胞在未分化状态时PtenmRNA表达高于肿瘤细胞K562,而且Pten抑制的mTOR信号通路中关键蛋白表达均明显低于K562,尤其以p-4E-BP1表达最低。提示PI3K/Akt/mTOR信号通路下游磷酸化蛋白在人胚胎干细胞活性较低,如果抑制负调节蛋白PTEN或直接激活该通路正调节关键蛋白,可能会加快人胚胎干细胞增殖、减少凋亡,进而为定向分化、再生医学提供更多的细胞来源。     

环孢霉素A逆转Pgp多药耐药机理的研究

目的　探讨环孢霉素 A (Cs A)逆转糖蛋白 Pgp耐药细胞株 K5 6 2 /ADR耐药的机理。方法　采用RT- PCR、荧光法、MTT和共聚焦激光扫描显微镜等方法 ,研究 Cs A对柔红霉素 (DNR)在 Pgp耐药细胞株 K5 6 2 /ADR蓄积、毒性及分布的影响。结果　 Cs A可明显增加 DNR在耐药细胞内的蓄积 ,恢复 DNR在耐药细胞核、浆的弥漫分布 ,提高耐药细胞对 DNR的敏感性。结论　 Cs A通过增加耐药细胞内化疗药物含量和逆转化疗药物异常分布的作用 ,恢复耐药细胞对化疗药物的敏感性。