32P-磷酸铬-聚L乳酸粒子组织间植入对犬长期毒性研究

目的 探讨³²P-磷酸铬-聚L乳酸粒子(³²P-CP-PLLA)间质植入比格犬的安全性和毒性。方法 30只比格犬,随机分成不同药物(³²P-CP-PLLA和胶体³²P-CP)、剂量(185、370和740 MBq)和部位(肝脏和臀大肌)10组(n=3)。术后定期称体重,检测实验室指标,测量血液、排泄物放射性计数率值,动态γ显像和组织形态学观察。结果 γ显像示胶体肝脏组全肝显影,放射性不均匀分布,余组局部放射性持续浓聚,肝脏未见显影。肝内注射胶体³²P-CP 471.67 MBq/m²,全肝吸收剂量为31 Gy,无肝功能损伤;注射794.28 MBq/m²,全肝吸收剂量为56 Gy,有较强的肝毒性及全身毒副作用。肝内植入1588.89 MBq/m²的³²P-CP-PLLA粒子,植入区肝组织的吸收剂量为89.83~178.68 Gy,未见肝功能受损。肝脏胶体370 MBq组分别于23、29和45 d死亡肝纤维化5项全程均值明显高于其他各组。有效半减期:³²P-CP-PLLA平均为11.78 d;³²P-CP肝脏组为6.82 d,肌肉组为8.73 d。组织学表现:肝脏胶体370 MBq组4周内见肝细胞中、重度肝细胞损伤,4~6周出现肝细胞坏死及增生;其余各组4周内见轻~中度肝细胞水肿,8周后未见异常。肌肉给药各组主要表现为横纹肌细胞一过性水肿变性。 血液中放射性计数率值粒子组随时间呈现锯齿状缓慢递减,胶体组呈指数下降。结论 ³²P-CP-PLLA粒子具有在植入部位不迁移,可体内降解,无明显毒副作用等优良特性,适治于不同血供的实体肿瘤。比格犬肝脏能接受³²P-CP致死剂量2倍活度的放射性粒子的辐射。     

大肠肿瘤组织中人乳头状瘤病毒DNA的分子原位杂交研究

目的探讨ＨＰＶ１６和ＨＰＶ１８感染与大肠肿瘤发生的关系．方法采用地高辛标记的ＨＰＶ１６和ＨＰＶ１８ＤＮＡ探针分别在４０例大肠癌和３０例大肠腺瘤组织石蜡切片上进行原位杂交探测ＨＰＶＤＮＡ．结果受检大肠腺瘤组织ＨＰＶＤＮＡ阳性８例（２７％），其中ＨＰＶ１６ＤＮＡ５例，ＨＰＶ１８ＤＮＡ３例，主要见于管状绒毛状腺瘤和绒毛状腺瘤；大肠腺癌组织中ＨＰＶＤＮＡ阳性１９例（４８％），其中ＨＰＶ１６ＤＮＡ１４例，ＨＰＶ１８ＤＮＡ５例．ＨＰＶＤＮＡ主要见于肿瘤细胞核中，少部分见于胞质中．研究表明，大肠癌组织中ＨＰＶ１６，１８ＤＮＡ检出阳性率明显高于大肠腺瘤；且大肠绒毛状腺瘤中ＨＰＶＤＮＡ阳性率明显高于管状腺瘤，阳性率接近高分化腺癌．结论ＨＰＶ１６，１８型感染并整合至宿主细胞ＤＮＡ中与肠癌的发生有密切的关系     

胃肠癌患者外周血组织特异性mRNA的检测及其临床意义

目的 研究77例胃肠癌患者外周血中组织特异性mRNA（CK20、CK19及CEA）的表达,并探讨其意义.方法 RT-PCR技术检测77例胃肠癌患者术前外周血中CK20、CK19、CEA mRNA的表达.结果 77例胃肠癌患者外周血中,CK20、CK19及CEA的阳性表达率分别为44.2%、35.1%及54.5%;三基因同时检测时,至少一个基因检测结果为阳性的表达率为74.0%,与肿瘤的组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移及复发具有相关性.结论 分子生物学技术联合检测多种标志物检测肿瘤细胞的外周血微转移,可提高检测的敏感性及准确性,有助于指导临床治疗及预后判断.     

消化过程中的火力控制对奶粉蛋白质测定的影响

目的分析和探讨消化过程中的规范操作对奶粉蛋白质测定的重要意义。方法对比分析69份奶粉样品经两次不同火力控制的消化处理后其蛋白质的测定结果。结果消化过程中对火力控制的不规范操作可导致平均9.21 g/100g的蛋白质损失。结论消化过程的火力控制对奶粉蛋白质测定影响很大;开展岗位实际操作培训具有重要意义。     

新装修居室内空气中苯系物污染状况调查

目的通过对新装修居室内苯及苯系物含量检测调查,了解苯及苯系物对新装修居室的污染状况,为有关部门完善室内空气卫生质量标准中目前尚缺的甲苯和二甲苯提供依据。方法室内空气中苯系物经活性碳吸附管采集后,用气相色谱FID检测器进行分析。结果苯含量均值为0.035mg/m^3,甲苯含量均值为0.362mg/m^3,二甲苯含量均值为0.211mg/m^3。结论苯检出率为73.7%,超标率6.5%;甲苯检出率85.2%;二甲苯检出率62.3%,苯的污染存在,但不严重,甲苯、二甲苯污染水平较高。     

ROCK通路在DLC-工基因调控人结肠癌HT29细胞侵袭中的作用

目的 观察肝癌缺失基因1(DLC-1)对HT-29细胞侵袭能力的影响.方法 用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-DLC-1转染HT-29细胞;应用Rho激酶(ROCK)特异性抑制剂Y27632处理HT-29细胞;Western blot检测p-MLC蛋白表达;Transwell小室实验检测细胞侵袭能力.结果 野生型HT-29细胞DLC-1基因表达呈阴性,经转染获得DLC-1稳定表达细胞系;与对照组及空载组HT-29细胞相比,转染组和ROCK抑制剂组p-MLC蛋白表达均下调,细胞侵袭能力受到抑制(P<0.05).结论 转染DLC-1基因可能通过抑制ROCK活性,从而抑制HT-29细胞的侵袭能力.     

神经胶质瘤细胞株H MGA1基因沉默对吉西他滨化疗敏感性的影响

目的探讨神经胶质瘤细胞株SHG-44高迁移率族蛋白A1(HMGA1)基因表达下调后对吉西他滨化疗敏感性的影响。方法用HMGA1 siRNA慢病毒载体及阴性siRNA慢病毒载体分别转染SHG-44细胞。稳定转染HMGA1 siRNA的细胞为阳性组、稳定转染不含HMGA1的细胞为阴性组,未转染的细胞为对照组。RT-PCR和Western blot检测HMGA1 mRNA和蛋白的表达,MTT法和克隆集落形成实验检测吉西他滨对细胞生长、增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果阳性组HMGA1 mRNA和蛋白的表达水平明显低于阴性组和对照组(P<0.05)。经吉西他滨处理后,MTT表明阳性组细胞生长抑制率显著高于阴性组,阳性组IC50为(0.279±0.013)μg/ml,明显低于阴性组的(0.746±0.020)μg/ml(P<0.05)。克隆形成实验表明阳性组克隆形成率显著低于阴性组(P<0.05),而细胞凋亡率显著高于阴性组(P<0.05)。结论神经胶质瘤细胞SHG-44中HMGA1基因沉默后,显著增强SHG-44细胞对吉西他滨的化疗敏感性。     

乙型肝炎病毒X基因在肝细胞肝癌及慢性乙型肝炎肝细胞染色体上整合情况的对照研究

目的:应用染色体制备和生物素原位杂交技术,研究乙型肝炎病毒X(HBx)基因在肝细胞肝癌(HCC)细胞染色体上的整合,并与慢性乙型肝炎(CHB)进行对比分析,了解HBx基因在肝细胞染色体上的整合与HCC发生的相关性.同时探讨在HCC与CHB患者中乙肝血清标志物差异及HBx整合与乙肝血清标志物之间的相关性.方法:HCC患者19例,CHB患者14例,分别获取手术或肝穿刺标本并制备成染色体载玻片,以生物素标记的HBx基因探针进行原位杂交,同时统计分析其乙肝血清标志物资料.结果:①19例HCC中有13例患者的肝细胞分裂期染色体上可观察到杂交信号,占68.24%,明显高于CHB组,差别有统计学意义(χ2=5.12,P＜0.05),肝癌患者肝细胞染色体上HBx整合位点数为3.80±1.36,而CHB患者肝细胞染色体上整合位点数为1.30±0.36,二者差别具有极显著性(t=3.5,P＜0.01).②乙型肝炎e抗原(HBeAg)在CHB患者中阳性率为80.0%,明显高于HCC组(10.53%),差别有统计学意义(χ2=6.33,P＜0.01).③HCC及CHB患者HBx整合与否与患者乙肝血清标志物未见明显相关性.结论:①HBx基因在HCC细胞染色体上的整合明显高于CHB;②CHB患者乙肝病毒复制较HCC患者活跃;③HBx基因整合与否与HCC及CHB乙肝血清标志物未见明显关系.     

食管癌患者外周血CK20、CK19、CEA mRNA的表达及其临床病理意义

目的：研究89例食管癌患者外周血中CK20、CK19及CEA mRNA的表达,并探讨其临床病理意义。方法：巢式RT—PCR技术检测89例食管癌患者术前外周血中CK20、CK19、CEA mRNA的表达。结果：89例食管癌患者外周血中CK20、CK19及CEA的阳性表达率分别为49．44％、34．83％及52．81％;三基因同时检测时,至少1个基因检测结果为阳性的表达率为71．91％,与食管癌的淋巴结转移和（或）远处转移具有相关性。结论：CK20、CEA可作为检测食管癌患者外周血微转移的生物学标志,RT—PCR联合检测多种标志物可为了解肿瘤的恶性生物学行为、指导临床治疗方案的选择、判断预后及监测疗效提供依据。     

反义DLC-1基因对结直肠癌LoVo细胞增殖和细胞周期的影响

目的 应用核糖核酸干扰(RNAi)技术,通过对大肠癌细胞株LoVo中DLC-1基因mRNA表达的抑制,初步探讨DLC-1基因对大肠癌细胞株的生物学行为影响.方法 构建DCL-1的RNAi重组体pGCsiDLC,转染大肠癌LoVo细胞株.采用RT-PCR观察转染前后细胞株中DLC-1 mRNA以及 Bax、Bcl-2基因表达的改变,MTT比色法检测转染前后细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期.结果 成功构建发卡siRNA真核表达载体pGCsiDLC;pGCsiDLC转染LoVo细胞后,电泳显示DLC-1 mRNA表达水平明显下降;LoVo细胞生长曲线增长幅度亦随时间的增加而逐渐增高,在48h最为明显,RNAi组细胞比脂质体组及空白对照组细胞增殖明显增高(P＜0.05);干扰后的LoVo细胞株G0/G1期发生阻滞,而G2/M 期细胞数量分布减少.而Bax和bcl-2基因表达在干扰前后未见明显改变.结论 成功构建载体介导的DLC-1靶向RNAi重组体可有效抑制LoVo细胞DLC-1 mRNA表达;DLC-1基因可抑制结直肠癌细胞增殖并且对细胞周期重新分布,其可能与结直肠癌的发生发展有一定关系,可能是一个新的抑癌基因.