秋泻方治疗小儿秋季腹泻临床观察

目的：通过对秋泻方治疗小儿秋季腹泻的研究,探寻治疗小儿秋季腹泻的有效方药。方法：对我院140例秋季腹泻的患儿应用秋泻方进行治疗。结果：治疗组总有效率为95．7％;对照组总有效率64．3％。治疗组疗效优于对照组。结论：本方疗效确切,值得推广应用。     

无血清培养的脐带间充质干细胞治疗乙型肝炎肝硬化的临床观察

目的观察无血清培养条件下收获的人脐带间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSC)治疗失代偿性乙型肝炎肝硬化的安全性和有效性。方法从人脐带中分离培养MSC,通过形态学观察、表面标记和分化能力分析,鉴定收获细胞。选择失代偿性乙型肝炎肝硬化患者13例,静脉输注人脐带MSC。每次剂量为5.0×107,每周1次,共4次。观察细胞输注后急性毒性反应,记录治疗前后患者的临床症状及肝功能变化。结果所获得的MSC呈纤维细胞样,均一表达CD44和CD73,不表达CD14、CD31和CD45,且具有体外成骨和成脂肪细胞分化能力。所有患者细胞输注24 h内均未发生发热、头痛等急性毒性反应,心电图监测未见异常。细胞治疗后部分患者临床症状改善,血清总胆红素明显下降(P<0.05),血清白蛋白浓度略升高,凝血酶原时间无显著变化。结论利用无血清培养体系获得的人脐带MSC治疗代偿性乙型肝炎肝硬化是安全的,部分患者有效,但其长期的安全性和有效性有待进一步研究证实。     

Ad-GFP修饰的间充质干细胞在肺气肿大鼠体内向肺部的定向迁移

背景:近些年来应用相关干细胞及生长因子促进肺再生修复肺气肿病变的研究逐渐成为热点,那么通过干细胞携带相关外源生长因子基因能否更好的修复肺气肿病变值得关注.目的:观察携带绿色荧光蛋白基因的腺病毒(adenovirus vecto rmediated green fluorescence protein,Ad-GFP)转染骨髓间充质干细胞的效率、对细胞增殖的影响,及携带目的基因的间充质于细胞尾静脉移植在肺气肿大鼠肺部的定居情况.方法:采用密度梯度离心结合贴壁培养法分离、培养间充质干细胞,流式细胞仪鉴定;在不同感染复数时,激光共聚焦显微镜检测转染效果及转染效率,MTT法检测转染48 h的细胞活性:Wistar大鼠16只,随机分为模型组和对照组,每组8只,采用单纯被动烟熏法制备肺气肿大鼠模型.通过尾静脉移植Ad-GFP修饰的间充质干细胞,于24 h后取大鼠肺组织做快速冰冻切片,在荧光显微镜下观察间充质干细胞在肺部的分布情况.结果与结论:实验成功获得大鼠间充质干细胞,Ad-GFP成功转染间充质干细胞,且在MOI=200时,转染效率达到88.42%.在不同MOI下,Ad-GFP转染间充质干细胞对细胞增殖无影响(P＞0.05).移植24 h后,模型组大鼠及对照组大鼠肺部可见到发绿色荧光的间充质干细胞,且模型组荧光强度明显强于对照组(P＜0.05).提示导入目的基因可能不会影响骨髓间充质干细胞增殖和归巢特性.     

Effect of icariside Ⅱ on the expression of osteoprotegerin in mouse osteoblasts

以17β-雌二醇为阳性对照组,观察不同浓度淫羊藿次甙Ⅱ对成骨细胞护骨素(OPG)表达的影响,结果发现20.ng/dl淫羊藿次甙Ⅱ上调成骨细胞OPGmRNA的表达,且优于阳性对照组(P<0.05),淫羊藿次甙Ⅱ也显著增加成骨细胞OPG分泌水平,20 ng/dl淫羊藿次甙Ⅱ组的促分泌活性显著优于阳性对照组,提示淫羊藿次甙Ⅱ作为淫羊藿甙在体内的主要代谢产物,在体外较低剂量即可显著促进成骨细胞OPG的表达,具有良好的抗骨质疏松作用.     

间充质干细胞来源的细胞外囊泡:免疫相关疾病的理想细胞替代疗法

间充质干细胞(mesenchymal stem cell, MSC)作为一种具有多向分化潜能的非造血干细胞,已被应用于多种组织损伤与免疫相关疾病的治疗。MSC获得如此广泛应用的原因与其强大的促进受损组织再生和免疫调控功能密不可分。近年来,MSC的免疫调控功能已在多种免疫相关疾病的治疗中得到广泛验证。研究表明,MSC免疫调节作用的发挥主要通过旁分泌,其中,MSC分泌的细胞外囊泡(extracellular vesicle, EV)发挥着重要作用。EV可以复制MSC的多种免疫调节功能,但是,MSC-EV在MSC的免疫调节中具体发挥哪些作用,MSC-EV能否替代MSC用于免疫相关疾病的治疗?文章结合以上问题,对近年来MSC与MSC-EV的免疫调控功能进行综述。     

血液循环中存在内皮细胞的前体细胞

为证明出生后血液循环中存在内皮细胞的前体细胞,从G-CSF动员的成人外周血及脐带血中分离CD34+细胞,将之接种于纤连蛋白与明胶铺板的培养皿上,培养体系中加入重组人内皮细胞生长因子(rhVEGF)和重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF).用von Willibrand因子(vWF)表达及Ⅰ型凝集素(UEA-I)结合能力鉴定内皮细胞.结果表明,上述体系经5-6周培养后,接种CD34+细胞的皿出现一层致密的贴壁细胞,而接种CD34-细胞的皿则未形成贴壁层.免疫细胞化学和流式细胞术的结果显示,几乎所有贴壁细胞为vWF阳性,且约90%的细胞具有UEA-I结合能力.实验结果证明人出生后阶段血循环中存在有成血管细胞(angioblast),因此在成人中也可发生血管系形成过程.     

血液循环中存在内皮细胞接受体细胞

为证明出生后血液循 环中存在内皮细胞的前体细胞,从G-CSF动员的成人外周血及脐带血中分离CD34^ 细胞,将之接种于纤连蛋白与明胶铺板的培养皿上,培养体系中加入重组人内皮细胞生长因子（rhVEGF)和重组人碱必成纤维细胞生长因子（rhbFGF)。用vonWillirand因子（vWF)表达及I型凝集素（UEA-I）结合能力鉴定内皮细胞,结果表明,上述体系经5-6周培养后,接种CD34^ 细胞的皿出现一层致密的贴壁细胞,而接种CD34^-细胞的皿则未形成贴壁层,免疫细胞化学和流式细胞术的结果显示,几乎所有贴壁细胞为vWF阳性,且约90%的细胞具有UEA-I结合能力,实验结果证明人出生后阶段血循环中存在有成血管细胞（angioblast),因此在成人中也可发生血管系形成过程。     

新型逆转录病毒载体介导的人多药耐药基因转移小鼠造血干／祖细胞

为探讨逆转录病毒介导的外源基因转导对骨髓造血重建的影响,我们以人多药耐药基因(mdr-1)为报告基因,采用包含Friend脾灶形成病毒(spleen focus-forming vims)和鼠胚胎干细胞病毒序列的新型逆转录病毒载体SF-MDR,以病毒包装细胞与小鼠造血细胞体外共培养法进行基因转染,并对基因转导后造血细胞的体外耐药能力及体内造血重建能力进行了观测。结果表明,该载体可有效地介导mdr-1基因转导,明显提高小鼠骨髓造血细胞对秋水仙素及紫杉醇的耐受能力,对细胞体内造血重建能力没有影响,体内移植8个月后经紫杉醇体内筛选,7/7的小鼠可于外周血细胞基因组DNA中检出外源mdr-1基因的存在。     

骨髓间充质干细胞的生物学特性

从人骨髓中分离人间充质干细胞（ＭＳＣｓ）,台盼蓝拒染法测定细胞增殖状态,ＭＴＴ实验检测不同细胞因子对细胞增殖的影响。应用流式细胞学技术测定细胞周期及细胞表面抗原特征并观察细胞组织化学特点。结果：ＭＳＣｃ具有独特的表征,即ＣＤ２９,ＣＤ４４,ＣＤ１６６阳性,ＣＤ３４,ＣＤ４５,ＨＬＡ－ＤＲ和荆豆素阴性。细胞化学结果显示,几乎所有细胞酸性萘酚醋酸酯酶（ＡＮＡＥ）及糖原（ＰＡＳ反应）阳性,酸性磷酸酶（Ａ     

释放膜微粒：间充质干细胞治疗的新机制

间充质干细胞（Mesenchymalstemcells,MSC）是一类具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞,具有取材方便、体外扩增能力强和免疫原性低等特点,已成为细胞治疗和组织工程的重要种子细胞。MSC治疗已经进入临床试验阶段,部分疾病已经完成Ⅲ期临床试验,证实了这种新型疗法的安全性和有效性。然而．关于MSC治疗的机制并未阐明。近几年的研究发现,间充质干细胞的分化及其旁分泌作用,可能不是其组织修复及治疗多种疾病的主要原因．而来源于间充质干细胞的膜微粒,可能是治疗过程中的主要参与者。本文就MSC膜微粒的生物学特性、作用机制及临床应用的可能性等问题进行综述。