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人共刺激分子B7-H3表达载体的构建及表达检测 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:B7-H3作为B7家族的最新成员,其受体在活化的T细胞表面可被诱导表达,B7-H3对CD4+和CD8+细胞的生成均具有增加作用,并可选择性增加IFN-γ的生成。为将B7-H3基因转染入舌鳞癌细胞Tea8113中制备瘤苗。克隆人共刺激分子B7-H3基因,构建其真核表达载体,并检测B7-H3基因在Tea8113中的表达。方法:从淋巴细胞中提取RNA,用RT—PCR方法将B7-H3的编码序列cDNA扩增。然后将该基因的编码序列插入真核荧光蛋白载体pEGFP—C1中,构建成最终的表达载体pEGFP—C1-B7-H3。运用脂质体方法将pEGFP—C1-B7-H3转染Tea8113细胞.转染24h后.荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,RT—PCR检测B7-H3在该细胞中的表达。结果:从淋巴细胞中提取的RNA质量较好,经RT—PCR扩增出目的基因B7-H3,其全长大小为951bp。测序鉴定,该序列与GenBank中序列相同。转染pEGFP—C1-B7-H3载体的靶细胞Tea8113中,荧光显微镜下可见其表达绿色荧光蛋白,RT—PCR方法检测到目的基因B7-H3的-个215bp大小的eDNA扩增产物。结论:酶切及RT—PCR证实成功构建人B7-H3的真核表达载体pEGFP—C1-B7-H3,将该载体转染到Tea8113中,RT—PCR鉴定B7-H3基因在该细胞中表达。 相似文献
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目的 制备负载单宁酸的双层壳聚糖膜(CS@TA),测试其活性氧(ROS)清除能力、生物相容性及抗菌性能,研究其作为引导骨再生屏障膜的可行性。方法 采用自蒸发技术先制备出致密的单层壳聚糖(CS)膜,随后采用蒸发干燥、取向冷冻和冷冻干燥技术在单层CS膜上制备出多孔的CS层,从而得到双层CS膜,利用扫描电镜观察其微观结构。将制备好的CS双层膜先接枝4-羧基苯硼酸形成中间体,按不同比例接枝单宁酸(TA),使用傅里叶红外光谱仪(FITR)分析TA与CS双层膜的相互作用。通过1,1-二苯基-2苦基肼(DPPH)测试ROS清除能力,选取负载TA后ROS清除效率在90%以上的双层膜进行后续体外细胞实验,利用CCK-8及活死细胞染色测试其生物相容性,利用扫描电镜观察MC3T3-E1细胞在双层膜多孔面上的黏附情况,通过菌落计数测试其对金黄色葡萄球菌(E.coli)和大肠埃希菌(S.aureus)的抗菌性能。结果 CS@TA双层膜一面光滑致密,另一面粗糙疏松多孔,截面呈垂直薄膜方向的有序多孔结构,随着TA的加入,双层膜的ROS清除能力先迅速增加后缓慢稳定,CCK-8及活死细胞染色结果显示加入过多的TA会明显... 相似文献
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新冠(COVID-19)疫情自2019年底爆发以来,已经席卷全球,造成巨大人员伤亡及财产损失.随着各国防控措施有力的执行及各种COVID-19疫苗的面世,COVID-19疫情获得了有效控制.但由于COVID-19病毒的变异及欧美部分国家防控不力,疫情处于起伏状态,短期内很难完全消除病毒,这给口腔临床教学和实习带来一定挑... 相似文献
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上颌窦区域种植已经成为常规的口腔种植修复治疗方式,但由于医源性或病源性因素会发生术后各种并发症,其中比较罕见但后果较严重的一种并发症为种植体脱入上颌窦。目前国内外尚缺乏对此类并发症管理的指南或共识,因此中华口腔医学会口腔种植专业委员会组织了国内各大院校的专家从发病因素、临床表现、处理方案及预防等方面,讨论起草了本共识,旨在为临床医师提供切实可行的针对上颌窦区域种植体脱入上颌窦这一并发症的预防和诊疗措施。 相似文献
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翼板区种植技术是将种植体由牙槽嵴植入位点靠近上颌窦后壁经过上颌结节、腭骨锥突,最终植入蝶骨翼突区的倾斜种植体应用技术.翼板区种植体植入角度为30°~50°的倾斜植入式,位于上颌种植修复的最远端,消除了种植修复体远中悬臂,且腭骨锥突及蝶骨翼突联合区以45°倾斜植入,平均可获得8~9 mm的硬质骨支持,初始稳定性良好,为即... 相似文献
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目的 体外研究检测miR-21诱导拉布拉多犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的作用.方法 构建LentimiR-21-Luciferase与Lenti-LacZ-Luciferase慢病毒载体,分别转染犬BMSCs,将研究分为miR-21组与LacZ组.利用体外细胞划痕实验来比较转染后BMSCs的爬行迁移能力.在转染后的第0、1、4、7、14天分别提取miR-21组与LacZ组BM-SCs的mRNAs和蛋白.通过Real time-PCR技术和Westernblot检测成骨分化关键因子骨钙素(OCN)和骨桥蛋白(OPN)的表达.结果 Lenti-miR-21-Luciferase与Lenti-LacZ-Luciferase慢病毒载体成功转入BMSCs后,miR-21组的BMSCs细胞爬行迁移能力显著增强(P<0.001);Real time-PCR和Western blot结果显示,miR-21可以显著上调BMSCs成骨分化关键因子OCN和OPN的表达(P<0.05).结论 miR-21可以显著促进BMSCs的成骨分化,为进一步的体内实验奠定基础. 相似文献
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上颌窦瘘是由于多种因素造成的异常口腔-上颌窦交通,是口腔颌面外科较为常见的一种疾病。传统上对于上颌窦的修补为基于各种软组织瓣的转移修复,在修补上颌窦瘘的同时,缺少骨组织的同期修复。基于袋状可吸收生物膜技术,单纯利用生物医用材料,在不用自体骨的情况下可完成上颌窦瘘区域软、硬组织的同期修复与再生。该治疗技术具有创伤小、手术难度适中,临床效果可靠,易于推广等特点,越来越受到医师和患者的青睐。但由于口腔医师临床技术水平参差不齐,为规范该技术临床操作标准、保障治疗效果、降低术后并发症,在此提出上颌窦瘘软、硬组织同期修补术的临床应用及操作规范,旨在为广大口腔医师在应用该项技术时提供参考。 相似文献