精子染色质扩散试验及末端转移酶标记法检测精子脱氧核糖核酸完整性

目的 比较精子染色质扩散试验(SCD)和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测精子DNA完整性.方法 对20名已生育的成年健康男性和32例不育患者的精液用上游法筛选得到活动精子,同时进行SCD和TUNEL.结果 不育组和生育组DNA损伤精子百分率的SCD检测结果分别为(12.8±5.8)%和(7.6±3.3)%,2组比较差异有统计学意义(t=3.576,P=0.001);TUNEL检测结果分别为(11.1±5.1)%和(6.8±2.8)%,2组比较差异有统计学意义(t=3.467,P=0.001).SCD与TUNEL检测结果在不育组(r=0.841,P=0.000)和生育组(r=0.823,P=0.000)均具有明显的线性相关关系.生育组SCD检测结果与TUNEL检测结果比较差异无统计学意义(t=1.996,P=0.060),而不育组SCD检测结果明显高于TUNEL检测结果,差异有统计学意义(t=3.023,P=0.005).结论 精子DNA损伤与男性不育有关.与TUNEL比较,SCD是一种更为准确、简单、廉价的检测精子DNA完整性的方法.     

Dishevelled2 和Vangl2表达与过量维甲酸致昆明小鼠神经管畸形的相关性

目的 探讨Dishevelled2和Vangl 2蛋白与过量维甲酸致昆明小鼠神经管畸形发生的关系。 方法 50只昆明孕小鼠随机分为对照组和实验组。孕775d时,实验组一次性胃饲30mg/kg致畸量维甲酸（RA）,对照组胃饲等量溶剂,服药后4h、18h、42h、66h及90h分别取胚胎,常规石蜡切片,采用原位杂交和免疫组织化学技术,分别检测胚胎神经管组织中Dishevelled2蛋白和Vangl2 mRNA及蛋白的表达水平变化。 结果 两种蛋白均存在于对照组及实验组不同发育阶段的小鼠神经管上皮,且两者的表达变化趋势有所不同。与对照组相比,实验组Dishevelled2蛋白在RA处理18h、42h时表达水平明显降低(P≤0.05),66h时表达升高(P≤0.05),90h时两组表达水平无明显差异;Vangl2 mRNA在灌服RA 4h、18h时表达水平明显低于对照组(P≤0.05),42h时两组表达水平无明显差异,66h时表达显著高于对照组(P≤0.05)。Vangl2蛋白在RA处理18h、42h时表达显著降低(P≤0.05),66h时两组表达水平无明显差异,90h时表达显著高于对照组(P≤0.05)。 结论 过量RA可能通过调节Dishevelled2和Vangl2表达干扰正常胚胎神经管的闭合过程。     

先天性双侧输精管缺如不育患者附睾精子功能及妊娠率的研究

目的了解先天性双侧输精管缺如(CBAVD)不育患者附睾精子功能及经皮穿刺附睾吸精后,子宫腔内人工授精(IUI)和卵浆内单精子显微注射(ICSI)的效果。方法对78例CBAVD不育患者进行经皮穿刺附睾吸精子(PESA),对吸出的精子进行精子低渗膨胀实验(HOST)、IUI、ICSI。结果附睾头部PESA精子活率、畸形率、密度、总精子数及HOST膨胀率分别为(18．4±11．2)%、(56．1±21．3)%、(26．0±14．0)×10~6/ml、(18．3±11．1)×10~6及38%±18%,而附睾尾部PESA精子各项指标分别为(8．3±7．2)%、(78．2±32．0)%、(9．0±12．0)×10~6/ml、(10．2±10．8)×10~6及(16．0±14．0)%,PESA附睾尾部的精子活率、密度、总精子数及HOST膨胀率都明显低于附睾头部的精子(P＜0．01),畸形精子比率明显高于附睾头部的精子(P＜0．01)。PESA-IUI及PESA-ICSI-IVF-ET分别有2例和6例妊娠,周期妊娠率分别为3．8%和33．3%。结论(1)CBAVD患者附睾尾部精子质量明显低于附睾头部精子；(2)PESA-IUI及PESA-ICSI-IVF-ET是CBAVD不育患者治疗较为有效的方法。     

90例少精子症及无精子症患者染色体核型分析

目的研究男性少精子症及无精子症患者与染色体核型异常的关系。方法对90例经精液常规检测,临床诊断为少精子症或无精子症的患者,抽取外周血进行淋巴细胞培养、制片、核型分析。结果 90例少精子症及无精子症患者的细胞遗传学分析中检出异常核型20例,异常检出率为22.2%。结论染色体异常是造成男性少精子症及无精子症的重要因素,对临床上少精子及无精子患者进行染色体检查非常必要。     

特发性男性不育症的遗传学分析

不孕症指夫妇同居生活两年、未避孕而未怀孕者。大约15%育龄夫妇患不孕症,其中男性因素占一半。造成男性不育的因素很多,比如内分泌、感染、生殖器畸形、免疫、遗传等原因,然而多半男性不育症患者找不到明确原因,我们称之为特发性男性不育症。生精障碍是男性不育的主要原因,多数男性不育症患者最初通过精液常规检查被确诊。精液常规检查可发现多种异常,比如无精子症、少精子症、弱精子症、畸精子症、死精症以及脓精症等,大约30%前来遗传咨询的男性不育患者患有特发性无精子或少精子症。已确定与特发性无精子症或少精子症有关的遗传异常包括染色体异常、精子mtDNA突变、单基因遗传病、多基因遗传病以及遗传因素引起的内分泌异常等,本文就特发性男性不育症的以上遗传学因素作一综述。     

山东地区非综合征性唇腭裂患者MTHFR基因C677T的多态性研究

目的探讨山东地区亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因C677T的多态性与非综合征性唇腭裂（NSCL/P）的关系。方法运用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性分析技术（PCR-RFLP）,对2006年8月至2008年8月曾在齐鲁医院治疗的来自山东地区NSCL/P患儿35例和健康查体的正常儿童51例MTHFR基因的C677T基因型检测分析。结果患者组与对照组的基因型构成比有统计学意义（χ^2=8.770,P=0.0121）。对T分析,计算得到携带T等位基因的儿童患非综合征性唇腭裂的危险性是不携带T等位基因儿童的2.568倍（OR=2.568,95%CI：1.324-4.979）。TT突变纯合子患非综合征性唇腭裂的危险性是非TT纯合子的3.095倍（OR=6.088,95%CI：1.240-7.722）。结论 MTHFRC677T的T等位基因可能是山东地区非综合征性唇腭裂的遗传风险因子。     

山东地区413例不孕不育和自然流产患者细胞遗传学分析

目的统计不孕不育和自然流产患者中异常核型的比例,探讨不同异常核型与生殖异常等临床效应之间的关系。方法按常规技术方法制备外周血染色体,经G显带对413例不孕不育和自然流产患者染色体核型进行分析。结果413例病例中28例染色体核型异常,异常检出率为6.78%。其中,相互易位6例;罗伯逊易位1例;染色体多态14例;其它异常7例。结论染色体核型异常是造成流产、死胎、不孕不育以及畸胎的重要因素,对不孕不育和自然流产患者进行细胞遗传学检查具有重要意义。     

Klinefelter综合征患者Y染色体AZF微缺失分析

目的观察Klinefelter综合征患者Y染色体AZF微缺失发生情况。方法12例Klinefelter综合征患者ICSI/IVF等辅助受孕前进行睾丸细针穿刺吸液细胞学检查及Y染色体AZF微缺失分析。确定8个实验用序列标签位点（STS）,分别是：sY84、sY86、sY127、sY134、sY152、sY153、sY254、sY255,并以X/Y连锁锌指蛋白基因（ZFX/Y）为内对照进行多重PCR筛查AZF微缺失。结果睾丸细针穿刺吸液细胞学检查显示,3例（25.0%,3/12）可见到极少量形态较完整的精子及各级生精细胞、精子细胞,7例（58.3%,7/12）仅见少量生精细胞及精子细胞,2例（16.7%,2/12）仅见支持细胞,未见生精细胞及精子。12例Klinefelter综合征患者共检测出AZF微缺失2例分别为AZFa＋AZFc区缺失和AZFb＋AZFc区缺失;对照组32例样本未检出AZF基因微缺失。KS患者AZF微缺失检出率与对照组比较有显著差异（χ^2=5.587,P=0.018）。结论Klinefelter综合征患者存在Y染色体长臂AZF微缺失,缺失率为16.7%。     

先天性双侧输精管缺如不育患者睾丸生精功能的研究

目的 通过对先天性双侧输精管缺如(CBAVD)不育患者睾丸细针穿刺吸液(FNA)细胞学检查,了解睾丸生精功能。方法 对78例CBAVD不育患者进行FNA细胞学检查。结果 78例中56例涂片可见较多生精细胞、精子细胞及精子,提示睾丸生精功能正常,占71.8%(56/78);生精功能异常22例(28.3%),其中6例(6/78,7.7%)仅见支持细胞,8例(8/78,10.3%)见各级生精细胞及大量精子细胞,未见精子,8例(8/78,10.3%)涂片见较少精子(<2个/HP)。结论 部分CBAVD不育患者的睾丸生精功能有不同程度的损伤。