全人源双特异性c⁃Met/PD⁃L1 scFv⁃Fc融合蛋白的优化、制备及生物学特性鉴定

目的：通过优化设计、构建c?Met/PD?L1 scFv?Fc融合蛋白,探究重轻链不同组合形式对c?Met/PD?L1 scFv?Fc融合蛋白与肿瘤抗原结合的亲和性和特异性的影响。方法：使用生物信息学分析、基因工程抗体技术设计、优化及制备重轻链不同组合的双特异性c?Met/PD?L1 scFv?Fc融合蛋白CP1、CP2、PC1、PC2;生物分子相互作用分析仪BLItz分析融合蛋白对重组c?Met蛋白和PD?L1蛋白的亲和力,ELISA法分析其抗原结合特异性。结果：成功制备双特异性c?Met/PD?L1 scFv?Fc融合蛋白,融合蛋白CP1与重组c?Met蛋白和PD?L1蛋白的亲和力和抗原结合特异性均优于CP2、PC1和PC2。结论：重轻链不同组合形式会影响c?Met/PD?L1 scFv?Fc融合蛋白与c?Met和PD?L1蛋白的亲和力和抗原结合的特异性,融合蛋白CP1的亲和力和抗原结合的特异性最高,其对应的重轻链组合形式可用于c?Met/PD?L1 CAR表达载体的构建。     

下颈椎前路椎弓根螺钉内固定技术的研究进展

与传统前路和后路手术相比,下颈椎前路椎弓根螺钉内固定技术（anterior transpedicular screw fixation．ATPS）具有较好的生物力学优势、相对安全等特点,仅通过一次前路手术可解决减压和重建两个问题。但是由于ATPS采用了较为特殊的解剖通道,临床上暂无专门用于前路椎弓根螺钉置钉的配套内固定系统,下颈椎ATPS技术的适应证相对较窄,尚不能替代传统前路和后路手术方法。如何精确置钉以及ATPS相关内固定器械的开发是目前研究的热点及未来发展方向。     

下颈椎经关节螺钉联合侧块或椎弓根螺钉固定的效果

Objective To discuss the effect of transarticular screws combined with lateral mass screws or pedicle screws through posterior approach in the lower cervical spine. Methods From February 2003 to October 2007, 22 patients were treated using transarticular screws internal fixation combined with lateral mass screws or pedicle screws in Axis plating system and Vertex system. There were cervical fracture and dislocation in 13 patients, ossification of the posterior longitudinal ligament in 4, cervical canal stenosis associated with dentoid process fracture in 1, and cervical disc herniation associated with cervical stenosis in 4 patients. Lamina or facet bone grafting were used to achieve a long-term stability, with decompression and anterior approach or not. The starting point for screw insertion was located 1 mm medial to the midpoint of the lateral mass and the direction of the screw was 40° caudally in the sagittal plane and 20° laterally in the axial plane. Results All screws insertion was successful. A total of 45 transarticular screws were inserted, with 2 in C4,5, 39 in C5,6 and 4 in C6,7. A total of 12 lateral mass screws were inserted, with 6 in C3 and 6 in C4. A total of 41 pedicle screws were inserted, with 4 in C2, 2 in C3 and 6 in C4, 21 in C7 and 8 in T1. There was no complication related to screw insertion, such as injury to the vertebral artery, nerve roots or spine cord. The follow-up period ranged from 10 months to 3 years and 8 months (mean 17 months). All cases got bone fusion. Only one instance of screw partial backout was identified, but fusion was achieved in all pa-tients. In the follow-up period, only one instance of screw partial backout was identified, but fusion was achieved in all patients. Conclusion The combined use of transarticular screws and lateral mass screws or pedicle screws fixation in the lower cervical spine can enlarge the advantages of strong stability,relatively simple, and reduce operating risk when performed appropriately.     

TGF-β1通过miR-21d-5p调控BMP7表达诱导肾小管上皮细胞增殖及迁移

目的:探讨转化生长因子-β₁(TGF-β₁)可能通过微小RNA-21d-5p(miR-21d-5p)对骨形态发生蛋白7(BMP7)的调控,从而对肾小管上皮细胞的增殖以及迁移的影响及可能机制。方法:观察TGF-β₁处理的肾小管上皮细胞HK-2并检测miR-21d-5p的表达,在HK-2细胞中分组转染miR-21d-5p或anti-miR-21d-5p,再使用TGF-β₁处理,观察过度表达或抑制表达miR-21d-5p对TGF-β₁诱导肾小管上皮细胞的细胞活性及迁移的影响。分析TGF-β₁、miR-21d-5p与BMP7的靶向关系。共转染miR-21d-5p和pcDNA3.1-BMP7,或anti-miR-21d-5p和si-BMP7,使用TGF-β₁处理,评估TGF-β₁、miR-21d-5p与BMP7的在肾小管上皮细胞的增殖以及迁移的相互关系。结果:TGF-β₁处理HK-2细胞后,miR-2...     

全胸腔镜肺癌根治术淋巴结清扫的探讨

目的探讨全胸腔镜下肺叶切除治疗临床Ⅰ期非小细胞肺癌淋巴结清扫的安全性和可行性。方法 2006年1月～2008年12月,160例临床Ⅰ期非小细胞肺癌接受全腔镜下肺叶切除术、纵隔淋巴结清扫,采用不撑开肋骨三孔法,并与同期247例接受常规开放手术的Ⅰ期非小细胞肺癌进行比较。结果胸腔镜组淋巴结清扫组数(2.4±1.5)组与开胸组(2.6±1.6)组无显著差异(t=1.262,P=0.208),胸腔镜组清扫淋巴结(9.8±6.2)枚,与开胸组(9.9±5.9)枚无统计学差异(t=-0.160,P=0.873)。开胸组并发症发生率11.7%(29/247)和围手术期死亡率2.8%(7/247)与胸腔镜组并发症发生率9.4%(15/160)和围手术期死亡率0.6%(1/160)无显著差异(χ2=0.564,P=0.453;χ2=1.446,P=0.229)。胸腔镜组生存情况优于开胸组(χ2=5.373,P=0.020)。结论全胸腔镜肺叶切除术治疗临床Ⅰ期非小细胞肺癌在技术上是安全可行的,其淋巴结清扫可达到开放手术的范围,远期疗效不亚于开放手术。     

腹腔镜和开腹结直肠癌手术器官损伤的Meta分析

目的 探讨结直肠癌腹腔镜手术和开腹手术中器官损伤发生率的差异.方法 收集1970年1月至2011年7月Cochrane数据中心、MEDLINE、EMBASE和CNKI数据库,公开发表的临床随机对照研究以及相关的科学会议文摘文献,用Meta分析方法评价腹腔镜和开腹结直肠癌根治术中肠损伤、实质器官损伤的发生率.结果 全部数据在9个临床随机对照研究中获取.4410例患者被纳入研究,2331例是腹腔镜手术组,2079例是开腹手术组.在腹腔镜组中术中肠损伤发生率比开腹组高(OR=1.84,P=0.03).术中实质器官的损伤在两组中差异无统计学意义(OR=0.79,P=0.52).结论 腹腔镜结直肠癌根治术肠损伤的发生率比开腹手术高.     

革兰阴性病原菌耐药性变化的分析

目的：了解革兰阴性病原菌耐药水平的变化趋势。方法：对我院1998～2004年从各类临床标本分离出的革兰阴性病原菌的药敏试验结果进行统计分析。结果：病原菌对亚胺培南的总体敏感率始终保持在较高水平,以下依次为头孢他啶(69%)、阿米卡星(66%)和环丙沙星(66%),但是铜绿假单胞菌和不动杆菌对常用抗生素的敏感率呈下降趋势。大肠杆菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌对亚胺培南的敏感率始终维持很高水平,但对其它各类药物的敏感率大多呈现明显的下降趋势,或维持在较低水平。结论：革兰阴性病原菌耐药水平有增高的趋势。亚胺培南可作为重症患者经验用药的首选药物之一,慎重使用第3代头孢菌素,并尽量避免经验用药。     

血清细胞黏附分子对脓毒症急性肾损伤的预测价值研究

背景　细胞黏附分子是急性重症脓毒症造成器官功能障碍（例如肾损伤）的生物标志物,但目前尚不明确血清细胞黏附分子是否对脓毒症急性肾损伤（AKI）的预测有临床价值。　目的　研究血清细胞黏附分子对脓毒症AKI的预测价值。方法　选择2016年1月—2017年12月南通大学附属医院急诊重症监护室（EICU）的84例脓毒症患者为研究对象,根据AKI的诊断标准将患者分为AKI组和非AKI组。入院后24 h内收集患者的临床资料,计算患者急性生理学和慢性健康状况（APACHE）Ⅱ评分、序贯器官衰竭评估（SOFA）评分、查尔森共病指数（CCI）评分,检测患者炎性指标〔C反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）、乳酸（LAC）〕及血清细胞黏附分子〔细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）、血小板选择素（P-selectin）、内皮选择素（E-selectin）〕表达水平。采用Pearson相关分析探讨炎性指标、血清细胞黏附分子与AKI严重程度的关系,采用受试者工作特征（ROC）曲线下面积（AUC）评价炎性指标、血清细胞黏附分子对脓毒症AKI的预测价值。结果　AKI组患者入院后24 h内出现休克、需要机械通气治疗的比例、APACHE Ⅱ评分、SOFA评分、血清肌酐（Scr）、LAC、ICAM-1、VCAM-1、E-selectin水平高于非AKI组（P<0.05）。Pearson相关分析结果显示,E-selectin与Scr呈正相关（r=0.223,P=0.041）。CRP、PCT、LAC、ICAM-1、VCAM-1和E-selectin预测脓毒症AKI的AUC分别为0.523〔95%CI（0.421,0.687）〕、0.637〔95%CI（0.435,0.618）〕、0.609〔95%CI（0.529,0.781）〕、0.702〔95%CI（0.619,0.846）〕,0.661〔95%CI（0.503,0.794）〕、0.774〔95%CI（0.623,0.871）〕,其中,E-selectin的诊断效能最高,其预测脓毒症AKI的最佳截断值为117.2 μg/L（灵敏度79.8%,特异度71.0%）。结论　脓毒症AKI的患者病死率高于脓毒症患者,而E-selectin与AKI的严重程度相关,是预测脓毒症AKI的重要临床标志物。     

苦参素对脂多糖诱导的海马神经元凋亡的保护作用

目的 探讨苦参素(OMT)对脂多糖(LPS)诱导的海马神经元凋亡的影响及其可能机制。 方法 根据海马神经元乳酸脱氢酶(LDH)释放率选择OMT的浓度进行实验分组。分为7组:正常对照组;脂多糖组;阿司匹林+脂多糖组;苦参素组;苦参素低剂量+脂多糖组;苦参素中剂量+脂多糖组;苦参素高剂量+脂多糖组。流式细胞仪检测细胞凋亡率;免疫荧光观察NF-κB/P65核易位情况;酶联免疫吸附(ELISA)技术测定海马神经元培养上清中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的水平。 结果 LPS组海马神经元凋亡率显著高于正常对照组(P<0.01),OMT预处理可以显著减少LPS刺激引起的海马神经元凋亡率(P<0.05)。LPS可以促进海马神经元NF-κB/P65由胞浆转位到胞核,提高海马神经元培养上清中TNF-α和IL-1β水平;而OMT预处理能显著减少LPS对海马神经元NF-κB/P65核易位作用及降低TNF-α和IL-1β的水平(P<0.05)。 结论 LPS诱导海马神经元NF-κB/P65核易位,导致炎症因子TNF-α和IL-1β的含量增加;OMT预处理可以抑制海马神经元NF-κB/P65核易位,减少TNF-α和IL-1β的分泌,从而抑制海马神经元的凋亡。      

高效液相色谱法测定复合鱼肝油制剂中维生素A的含量

目的:建立复合鱼肝油制剂中维生素A的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法测定,色谱柱为Kromasil ODS C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为:甲醇-水(98:2),流速1 ml/min,检测波长为328 nm.结果:维生素A进样量在22.068～110.340 mg/L范围内呈良好的线性关系,r=0.999 8,平均回收率为98.99%.结论:所建立的方法简便、准确、重现性好,可作为该制剂的质量控制方法.