流感疫苗病毒株在MDCK细胞中的培养条件

 目的   研究4价流感疫苗所用病毒株在MDCK细胞中的扩增条件。方法 在6孔细胞培养板中以不同感染复数（multiplicity of infection,MOI）（0.100 0、0.010 0、0.001 0、0.000 1）和对甲苯磺酰-L-苯丙氨酸氯甲基酮（TPCK）-胰蛋白酶（胰酶）浓度（0、2、4、8 μg/ml）进行病毒接种和扩增,感染后72 h收获细胞上清液,检测病毒血凝素效价,确定病毒最佳扩增条件。随后,在搅拌瓶中进行MDCK细胞微载体悬浮培养,研究不同起始细胞接种密度（1.5×10⁵、2.0×10⁵、3.0×10⁵ 个/ml）和微载体浓度（3、5、10 g/L）对MDCK细胞生长的影响,确定细胞最佳扩增条件。根据确定的最佳扩增条件,在搅拌瓶培养体系中扩增4种病毒。结果 6孔板中4种流感病毒的最佳接种条件分别是,A/Michigan/45/2015(H1N1) pdm09：MOI 0.010 0、TPCK-胰酶浓度2 μg/ml;A/Hongkong/4801/2014(H3N2)：MOI 0.010 0、TPCK-胰酶浓度4 μg/ml;B/Brisbane/60/2008：MOI 0.001 0、TPCK-胰酶浓度4 μg/ml;B/Phuket/3073/2013：MOI 0.010 0、TPCK-胰酶浓度4 μg/ml。在搅拌瓶中以3.0×10⁵ 个/ml初始细胞密度接种,3 g/L微载体浓度培养,MDCK细胞能够实现较好的扩增,最高密度可达2.1×10⁶ 个/ml;搅拌瓶悬浮培养,以最佳接种条件接种后,4种病毒的血凝素效价为：6.75~8.42log₂ 血凝素单位/50 μl。结论   通过摸索病毒接种最佳MOI、TPCK-胰酶浓度及优化MDCK细胞微载体悬浮培养条件,能够在MDCK细胞微载体悬浮培养体系中有效扩增4价流感疫苗用病毒株,为后期工艺放大研究奠定基础。     

肝癌致下腔静脉梗阻的内支架治疗

目的 评价肝脏肿瘤引起的下腔静脉梗阻内支架介入治疗的疗效.方法 对156例下腔静脉梗阻患者采用Z形自膨式金属内支架治疗.放置支架前后分别行下腔静脉造影,对下腔静脉狭窄或梗阻段长度、直径、压差进行分析.结果 156例患者置入179枚支架.下腔静脉狭窄或闭塞长度为(6.1±2.2)cm,狭窄段压力差由(2.1±0.5)kPa降为(0.5±0.11)kPa.狭窄段直径由(0.33±0.11)cm扩张至(1.6±0.4)cm.术后患者症状迅速改善,随访2～24个月,支架通畅率为86.7%.结论 置放Z形自膨式金属内支架,是对肝脏肿瘤引起的下腔静脉梗阻行姑息性治疗的一种有效方法.     

G9a特异性siRNA表达载体的构建及在QBC939细胞中对G9a基因表达的影响

目的构建特异性组蛋白甲基转移酶G9a基因的siRNA表达载体并检测QBC939细胞对G9a表达的抑制作用。方法设计、合成G9a特异性的短链寡核苷酸,经退火形成双链DNA片段.克隆到pSilencer neo^TM2.1-U6载体中,构建G9a特异性siRNA的表达载体。EcoRⅠ＋BamHⅠ和EcoRⅠ＋HindⅢ双酶切及测序鉴定重组体,并转染QBC_（939）细胞,G418筛选出稳定表达细胞株,半定量RT-PCR方法和Western印迹法检测G9a mRNA和蛋白的表达水平。结果双酶切与测序鉴定证实成功构建了G9a-siRNA表达载体,转染人胆管癌细胞株QBC939后,在mRNA和蛋白表达水平对G9a的抑制率分别为55.2%和54.8%。结论运用pSileneer neo^TM2.1-U6载体构建的G9a-siRNA表达载体可有效抑制G9a在胆管癌细胞株QBC939中的表达。     

贝伐珠单抗联合埃克替尼治疗中晚期非小细胞肺癌的临床研究

目的探讨贝伐珠单抗注射液联合盐酸埃克替尼片治疗中晚期非小细胞肺癌的临床疗效。方法选取2014年1月—2016年1月武警特色医学中心门诊收治的82例中晚期非小细胞肺癌患者作为研究对象,根据随机区组设计法将患者分为对照组(41例)和治疗组(41例)。对照组口服盐酸埃克替尼片,125 mg/次,3次/d,直到病情进展或出现不可耐受的不良反应时停止。治疗组在对照组治疗的基础上第1天静脉滴注贝伐珠单抗注射液,7.5 mg/kg用0.9%氯化钠100 mL稀释。以21 d为1个化疗周期,两组患者治疗2个化疗周期。观察两组患者的近期疗效,同时比较两组FACT-L 4.0评分、肿瘤标志物水平、毒副作用发生情况和生存情况。结果治疗后,治疗组的客观缓解率(ORR)和疾病控制率(DCR)分别为41.5%、82.9%,显著高于对照组的29.3%、63.4%,两组近期疗效比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组生理状况评分、社交/家庭状况评分、情感状况评分、功能状况评分、肺癌附加关注评分和总分均显著升高,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P0.05);且治疗后治疗组评分显著高于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、糖类抗原125(CA125)、血管内皮生长因子(VEGF)水平均显著降低,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P0.05);且治疗后治疗组肿瘤标志物水平均显著低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,治疗组中位无进展时间(PFS)、中位生存时间(OS)、1年生存率、2年生存率均显著高于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论贝伐珠单抗注射液联合盐酸埃克替尼片治疗中晚期非小细胞肺癌疗效显著,可有效提高患者生存率和生活质量,降低血清肿瘤标志物,安全可靠,具有一定的临床推广应用价值。     

基于神经氨酸酶的流感疫苗研究进展

当前广泛使用的季节性流感疫苗的主要抗原成分包括2个重要的流感病毒表面糖蛋白,血凝素和神经氨酸酶(neuraminidase,NA).研究表明NA抑制性抗体虽然不能防止流感病毒感染,但能有效抑制病毒扩散,因此基于NA设计的疫苗开始受到重视.NA的相对保守性也使此类疫苗有潜力成为广谱流感疫苗.目前基于NA的多种形式流感疫苗,包括DNA疫苗、病毒样颗粒疫苗、重组载体疫苗、重组亚单位疫苗以及联合其他流感病毒蛋白的疫苗等,在动物模型中均表现出诱导交叉保护的能力.此文综述了近年来发表的有关基于NA的流感病毒疫苗的研究.     

中医治疗痔疮的方法及临床效果探析

目的:分析中医治疗痔疮的方法及临床效果.方法:研究对象选取该院2015年6月至2016年5月收治的94例痔疮患者,随机将患者分为实验组与参比组各47例.参比组使用高锰酸钾、马应龙痔疮膏等进行治疗;实验组患者使用采取中医干预.对两组患者的临床疗效进行分析对比.结果:实验组患者的临床总有效率较对照组更高,二者差异明显(P＜0.05);实验组患者治疗后的肛门疼痛、便血、肛门瘙瘁等症状积分对比对照组明显更低,组间差异同样显著(P＜0.05).结论:中医治疗痔疮的效果可靠,对于改善肛门疼痛、瘙瘁等症状的作用明显.     

腹腔镜胆囊切除患者血液流变性的变化

我们对 40例腹腔镜胆囊切除术(ＬＣ)患者气腹前、气腹中及气腹后血液流变性进行了检测 ,探讨腹腔镜胆囊切除术患者血液流变性的变化。一、对象与方法1 .研究对象 :研究对象为被实施ＬＣ的胆囊结石患者 ,无心、脑、肺、肾、血液系统疾患和血管疾患共 40例 ,其中男 2 0例 ,女 2 0例 ,最大年龄 72岁 ,最小年龄2 8岁 ,平均年龄 (43 .4± 1 .2 )岁。气腹最长时间 80ｍｉｎ ,最短时间 40ｍｉｎ ,平均时间 (52± 5)ｍｉｎ ,气腹压力控制在 1 2ｍｍＨｇ(1ｍｍＨｇ =0 .1 33ｋＰａ)。2 .观察指标与测试的方法 :每位受检者手术麻醉成功后 ,气腹前、气…     

微血管吻合术行全头皮撕脱再植成功一例

微血管吻合术行全头皮撕脱再植成功一例⒇龙剑虹杨兴华罗剑雷少榕张丕红（附属湘雅医院烧伤整形科长沙４１０００８）关键词血管外科手术；头皮；再植术；病例报告中图号Ｒ６１６．２头皮撕脱伤常见于留长发的年轻女工，采用原位缝合或游离植皮等方法治疗，结果导致伤者终...     

平片无张力疝修补术与充填式无张力疝修补术在腹股沟疝气患者中的疗效对比

目的对比在腹股沟疝气中应用平片无张力疝修补术与充填式无张力疝修补术的疗效。方法回顾性分析2017年5月至2018年5月收治的85例腹股沟疝患者的临床资料,其中43例采用平片无张力疝修补术治疗为甲组,42例采用充填式无张力疝修补术治疗为乙组,对比两组患者手术相关指标和术后恢复指标,并对比两组住院期间的并发症发生率。结果甲组的手术时长、术中失血量、术后下床活动时间、住院天数与乙组比较无显著差异(P 0.05),两组并发症发生率比较甲组更少(P0.05)。结论在腹股沟疝气患者中应用平片无张力疝修补术与充填式无张力疝修补术治疗的效果相当,但平片无张力疝修补术的并发症更少,可作为临床的首选。