感染性阴道疾病3种病原体单克隆抗体的制备

目的研发感染性阴道疾病(细菌性阴道炎、滴虫性阴道炎和霉菌性阴道炎)的特异性单克隆抗体。方法分析感染性阴道疾病病原体的基因谱,扩增特异蛋白的基因序列,基因工程重组抗原AP33,免疫Balb/c小鼠,运用杂交瘤技术得到特异性单克隆抗体;采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)进行抗血清效价测定及抗体的亚类及轻链型鉴定;采用BCA法、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法分析纯品抗体的蛋白浓度、纯度和相对分子质量。结果杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体纯度均达到了90%以上,抗体浓度2.41～5.68mg/mL,抗体效价在1∶105～1∶107之间;抗体类别均为IgG1,κ型。结论本研究获得了3种感染性阴道疾病纯度高、特异性强的单克隆抗体,将为药理学、诊断学及相关学科提供研究材料,具有广阔的市场前景和巨大的经济效益。     

小鼠BTLA慢病毒表达载体的构建及鉴定

目的 构建小鼠BTLA慢病毒表达载体,并对表达产物进行鉴定.方法 以pET-28a-mBTLA质粒为模板,通过PCR技术构建pMD18-T-mBTLA质粒,将小鼠BTLA基因全长编码序列克隆到慢病毒转移载体,通过脂质体转染293T细胞包装成小鼠BTLA慢病毒颗粒.PCR技术和基因测序对重组质粒进行鉴定.荧光显微镜观察重组慢病毒感染293T细胞形态学变化.RT-PCR和Western blot法鉴定BTLA在重组慢病毒感染293T细胞中的表达.50％组织培养感染剂量法(TCID5o法)检测重组慢病毒滴度.结果 成功构建的pMD18-T-mBTLA质粒和pSL6-mBTLA质粒,经双酶切电泳后均出现大小约为1 kb的条带与mBTLA编码序列的大小相符.基因测序并比对分析进一步证实mBTLA编码序列成功整合到质粒载体.病毒上清PCR扩增和293T细胞形态学观察证实Lenti-mBTLA慢病毒包装成功.TCID50法测定Lenti-mBTLA慢病毒滴度为1.3×108 pfu/mL.RT-PCR和Western blot法证实Lenti-mBTLA慢病毒能有效表达mBTLA mRNA和蛋白质.结论 成功构建了表达小鼠BTLA的慢病毒.     

针吸型肌肉活检联合免疫荧光在假肥大型肌营养不良诊断中的应用

目的 探讨应用针吸型肌肉活检结合免疫荧光染色诊断假肥大型肌营养不良症的应用价值及意义。方法 应用针吸型活检术取533例假肥大型肌营养不良症患者(415例DMD, 118例BMD)的肌组织,采用HE染色观察肌细胞形态,免疫荧光染色技术检测抗肌营养不良蛋白, 以2 例正常人的肌细胞作为对照。结果 正常人肌细胞膜上抗肌萎缩蛋白染色阳性,可见沿肌细胞膜分布完整的荧光条带; DMD 患者肌膜染色阴性,肌细胞膜完全不显色; BM D患者染色弱阳性, 可见沿肌细胞膜分布的间断斑片状荧光带。结论 应用针吸型活检术联合免疫荧光染色可以有效的检测抗肌营养不良蛋白的表达, 有助于DMD 和BMD 的确诊及鉴别诊断。     

布替萘芬乳膏治疗浅部真菌病临床疗效观察

我们应用1％盐酸布替萘芬乳膏(商品名迈可抒，成都鹤鸣山制药有限责任公司产品)，对80例门诊确诊的体癣、股癣及手足癣患者进行了临床试验，以硝酸咪康唑作为对照，现报告如下。     

宫腔内人工授精患者的心理干预

目的 探讨了女性不孕症患者和正常女性的心理状况,为心理干预和综合治疗不孕症提供依据.方法 采用焦虑自评测量表(SAS)、抑郁自评测量表(SDS)作为测评工具,对40例女性不孕症患者和40例正常已婚生育女性进行对照测评.结果 不孕症女性焦虑自评测量表和抑郁自测评量表均显著高于正常对照组(P＜0.01).结论 不孕女性的总体心理健康程度较差,她们承受着巨大的身体痛苦和心理压力,尤其是年轻患者,在承受医疗带来的痛苦的同时,还承受着家庭及社会和工作压力,建议应重视不孕症患者的心理变化,采取心理疏导纳入医学治疗过程的综合手段进行治疗,使患者得到家庭和社会的关怀,减缓心理压力,提高治疗效果.     

两种方法检测HLA-B27的结果分析

HLA-B27与强直性脊椎炎(AS)、Reiter病、急性前葡萄膜炎等疾病相关,我国强直性脊椎炎患中,91％带有HLA-B27抗原,而正常人群带有HLA-B27抗原的只占6％,对于临床上怀疑为AS的患,检查HLA-B2,有诊断及鉴别诊断的价值。过去检测HLA-B27只能依赖血清学方法,我们引进了PCR方法．对27例标本同时采用两种方法进行了检测,现将结果报告如下。     

艾地苯醌改善血管性痴呆大鼠认知功能及其对海马区生长相关蛋白-43和突触素P38表达的影响

目的:探讨艾地苯醌对血管性痴呆(VD)大鼠认知功能的作用,并初步探讨其机制。方法:SD大鼠60只随机均分为3组:假手术组、模型组和艾地苯醌组,各20只。采用改良双血管阻断(2-VO)法建立大鼠VD模型,艾地苯醌组大鼠腹腔注射艾地苯醌,10 mg/kg,1次/d,连续给药30 d;模型组及假手术组腹腔注射等量生理盐水。采用水迷宫评价各组大鼠学习、记忆能力;免疫组化测定海马生长相关蛋白-43(GAP-43)、突触素P38表达;透射电镜观察突触超微结构的改变。结果:模型组逃避潜伏期长于假手术组和艾地苯醌组(P<0.05),穿越原平台次数少于假手术组和艾地苯醌组(P<0.05);艾地苯醌组逃避潜伏期和穿越原平台次数与假手术组差异无统计学意义(P>0.05)。模型组GAP-43和触素P38蛋白的表达水平均低于其他2组(P<0.05);艾地苯醌组GAP-43和触素P38蛋白的表达水平均高于其他2组(P<0.05)。电镜下可见模型组大鼠海马区突触结构受损,艾地苯醌组大鼠海马组织区突触数量丰富,结构基本完整。结论:艾地苯醌可改善VD大鼠的学习和记忆功能,其机制可能与增强突触相关蛋白GAP-43和突触素P38的表达有关。     

广泛性焦虑障碍心理治疗研究进展

总结广泛性焦虑症(generalized anxiety disorder,GAD)心理治疗方法,分析不同心理治疗的疗效及研究进展,为今后多角度、整合式运用各种心理疗法治疗GAD提供新思路.     

健脾解毒活血法对脾胃湿热型幽门螺杆菌性胃炎小鼠胃部炎症的影响研究

目的:探讨健脾解毒活血法组方对脾胃湿热型幽门螺杆菌(Hp)相关性胃炎模型小鼠胃部炎症的影响。方法:以40只SPF级昆明种小鼠为实验对象,随机取10只作为空白组,剩余30只采用Hp菌液灌胃法建立脾胃湿热型Hp相关性胃炎小鼠模型,造模成功后,将其分为模型组、奥美拉唑钠组和中药组各10只。奥美拉唑钠组灌胃奥美拉唑钠混悬液10mg/kg体质量,中药组灌胃健脾解毒活血方药液18g/kg体质量,模型组灌胃同等量的0.9%氯化钠注射液,均每天1次,连续给药14d。观察各组血清白介素-1β(IL-1β)、胃泌素(GAS)以及胃组织Hp的感染情况。结果:模型组小鼠血清IL-1β、GAS的含量较空白组明显升高(P0.01,P0.05);与模型组比较,中药组和奥美拉唑钠组血清IL-1β显著降低(P0.05),但GAS则无明显差异。模型组小鼠胃组织Hp感染数较空白组明显增加;与模型组比较,中药组和奥美拉唑钠组胃组织Hp感染数显著降低(P0.05)。结论:健脾解毒活血方对IL-1β及Hp感染数有明显改善作用,但对GAS则没有明显影响。     

热毒宁注射液抗菌及调节免疫活性作用研究＊

目的：探讨热毒宁注射液抗菌及提高免疫力作用。方法：将小鼠随机分为正常组、模型组、双黄连组（7.8 mL·kg-1）和热毒宁注射液高、中、低剂量组（20.30 g·kg-1、10.15 g·kg-1、5.08 g·kg-1）,采用体内抗菌实验观察其对细菌感染的小鼠死亡保护作用;将小鼠随机分为正常组、模型组、香菇多糖组（0.19 mg·kg-1）和热毒宁注射液高、中、低剂量组（20.30 g·kg-1、10.15 g·kg-1、5.08 g·kg-1）,采用2,4-二硝基氯苯所致小鼠迟发型超敏反应、小鼠血清溶血素方法及碳粒廓清实验观察其免疫调节作用。结果：热毒宁注射液高、中剂量组具有抗菌作用,可降低小鼠死亡率;热毒宁注射液高、中、低剂量组可增强免疫低下小鼠巨噬细胞的吞噬能力,能增加小鼠溶血素的生成,增强免疫低下小鼠迟发型的超敏反应。结论：热毒宁注射液具有抗菌,增强小鼠非特异性免疫、体液免疫和细胞免疫作用等免疫调节作用。