全反式维甲酸及其衍生物对乳腺癌细胞株MDA-MB-231凋亡的影响

目的：研究全反式维甲酸( ATRA)及其衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯( ATPR)对人乳腺癌细胞MDA-MB-231体外凋亡的影响。方法不同浓度ATRA及其衍生物ATPR分别处理MDA-MB-231细胞48 h后,Hoechst染色及流式细胞术检测细胞凋亡的变化,RT-PCR检测凋亡蛋白Caspase-3 mRNA水平的变化, Western blot法检测相关凋亡蛋白表达水平的变化。结果与ATRA相比,相同浓度的ATPR能明显促进MDA-MB-231细胞的凋亡,随着浓度的增加,凋亡作用越加显著( P<0．05)。 RT-PCR显示 ATPR作用后Caspase-3 mRNA 水平显著上调( P <0．05)。 Western blot法显示ATPR能下调抗凋亡蛋白Bcl-2、NF-κB、survivin的表达( P<0．05) ,上调促凋亡蛋白Bax、Grim-19、Caspase-3的表达(P<0．05)。结论 ATPR比ATRA更明显地促进人乳腺癌细胞MDA-MB-231的凋亡。     

褪黑素通过p38/MAPK信号通路调控oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞MLCK的表达

目的 探讨褪黑素(MLT)通过p38/MAPK信号通路调控oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的表达.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HU-VEC),分空白对照组、DMSO对照组、DMSO oxLDL组、DM-SO oxLDL SB203580组、DMSO oxLDL MLT组、DMSO oxLDL MLT SB203580组.RT-PCR、Western blot、γ-32>P-ATP掺入法分别检测各组HUVEC MLCK转录、表达和活性及MLT对p38磷酸化的影响.结果 RT-PCR显示oxLDL组MLCK转录增强,MLT组与SB203580组均抑制MLCK的转录;Western blot结果 表明oxLDL组MLCK表达、p38磷酸化增强,MLT组与SB203580组均抑制MLCK的表达及p38磷酸化;γ-32P-ATP掺入法检测MLCK活性提示oxLDL组MLCK活性增强,MLT与SB203580降低MLCK活性.结论 MLT可能通过p38/MAPK通路调控MLCK的转录、表达和活性.     

动脉粥样硬化兔模型血液中乳酸脱氢酶和肌酸激酶的动态分析

目的分析实验性动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)大耳白兔血液中乳酸脱氢酶和肌酸激酶的变化规律.方法建立兔动脉粥样硬化模型,检测模型各阶段血液中各种脂质、AST、ALT、LDH、CK、Bun、Cre等生化指标.结果成功地建立了动脉粥样硬化兔模型;大白兔在喂食高胆固醇饲料4周或12周时,血液中总胆固醇(CHO)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-ch)浓度升高(P<0.05);AST、ALT的活性和Bun、Cre的含量变化差异无显著性(P>0.05);而LDH和CK的活性随着动脉粥样硬化的进程而逐渐升高,变化差异有显著性(P<0.05﹚,ASa组和ASb组的LDH活性分别比对照组升高2.2倍和3.5倍,CK的活性则分别增加2.4倍和7.5倍.VitE组与ASb组比较,LDH和CK的活性都显著下降(P<0.05).结论提示血清LDH和CK的活性升高与动脉粥样硬化的进程相关;VitE可能对血管内皮细胞和平滑肌细胞具有保护作用.     

鸡肌球蛋白轻链激酶在大肠杆菌中的表达

目的建立鸡肌球蛋白轻链激酶（ｍｙｏｓｉｎｌｉｇｈｔｃｈａｉｎｋｉｎａｓｅ，ＭＬＣＫ）ｃＤＮＡ表达克隆。方法将ＭＬＣＫ功能区（自动抑制区、钙调蛋白识别区和活性催化区）的ｃＤＮＡ插入质粒ｐＢＫｒｓｖ中，重组质粒（ｐＢＫｒｓｖ－ＭＬＣＫ）转化入大肠杆菌中并获得表达。结果Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹试验表明表达产物的分子量与插入片段ｃＤＮＡ所含信息相一致。结论所获重组克隆在体外表达，表达蛋白具有使多肽底物磷酸化的活性     

热休克蛋白70在高脂血症大鼠肾脏中表达及意义

目的探讨高脂血症大鼠肾脏内热休克蛋白70(HSP70)的表达变化。方法 10只健康大鼠适应性喂养一周后随机分成正常组和高脂血症组。12周后取血,检测血脂;取肾组织分别进行HE染色和HSP70免疫组织化学染色,应用计算机图像分析系统检测HSP70的平均光密度变化。结果血脂检测结果显示:正常组TG、TC和HDL-C与高脂血症组存在差异。HE染色结果显示:高脂血症组部分肾小管上皮细胞破碎,核固缩,胞浆轻微肿胀变性,细胞排列紊乱。肾小囊周围有少量炎性细胞浸润,肾小囊内细胞有空泡形成。免疫组化结果显示:高脂血症组肾小管HSO70表达强于正常组。图像分析结果显示:与正常组HSP70的平均光密度值(0.1185±0.0078)比较,高脂血症组HSP70平均光密度值(0.3106±0.0484)增高,有统计学差异(P0.05)。结论高脂血症可导致大鼠肾组织内HSP70表达增高,高脂血症大鼠肾组织形态学损伤与HSP70含量的增高具有一致性。     

N-(3-三氟甲基苯基)维甲酰胺对人肺腺癌A549细胞分化和骨桥蛋白表达的影响

目的 分析新合成的全反式维甲酸(ATRA)衍生物N-(3-三氟甲基苯基)维甲酰胺(NTFMP)对人肺腺癌细胞株A549体外增殖、分化及骨桥蛋白表达的影响.方法 以人肺腺癌细胞株A549为研究对象,分别给予不同浓度的ATRA及NTFMP进行干预,应用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法测定A549细胞的增殖情况;酶动力学法检测...