一种口腔印模专用消毒剂对乙肝病毒活性及免疫原性的影响

摘要 目的 观察以一种主要成分为苄索氯铵和异丙醇的口腔印模专用消毒剂对口腔印模表面乙肝病毒活性及免疫原性的影响。方法 使用消毒液对HBV污染的口腔印模进行喷雾消毒,检测HBsAg含量和HBV-DNA含量,评价消毒效果;检测消毒前后HBV在体外诱导淋巴细胞分泌IFN-γ和IL-2含量,评价对HBV免疫能力的影响。结果 喷雾消毒3 min和15 min,对HBsAg和HBV-DNA的灭活效果明显高于消毒1 min组,灭活率分别为（98.8±1.2）%、（98.9±1.1）%和（99.3±1.1）%、（99.4±1.3）%。消毒3 min和15 min HBV诱导淋巴细胞IFN-γ相对表达量明显高于空白对照和未消毒组;与空白细胞组比较,未消毒组HBV诱导淋巴细胞IL-2相对表达量明显增加,而各消毒组的IL-2相对表达量未发生显著变化。结论 该消毒剂喷涂口腔印模时,对HBV的最佳消毒时间为3 min。此时HBV仍然保持较强的免疫原性,能够诱导淋巴细胞IFN-γ表达水平上调,对IL-2表达水平无影响。     

靶向CDC42基因小干扰RNA分子的制备

目的制备靶向CDC42基因的小于扰RNA分子（siRNA）并检测其对CDC42基因表达的抑制效果。方法针对CDC42基因的不同区域设计4条siRNA分子,体外转录法合成siRNA分子,将siRNA与CDC42基因真核表达载体共转染HEK293T细胞,Westemblot法测定cDc42蛋白含量。结果合成了siR1、siR2、siR3、siR4共4条siRNA分子,siR3对CDC42基因表达的抑制率为95％,siR1、siR2以及siR4对CDC42基因表达的抑制作用不明显。siR3对HEK293T细胞生长无明显影响。结论体外转录法制备的siR3分子能够高效特异地抑制CDC42基因表达。     

变形链球菌thrS基因生物信息学分析及同源重组质粒的构建

背景：变形链球菌是公认的主要致龋菌,细菌的黏附、生物膜形成、产酸、耐酸等各个表型都与细菌的致龋性相关。有研究结果提示,苏氨酰-tRNA合成酶基因(threonyl-tRNA synthetase, thrS)可能与变形链球菌的黏附、产酸、耐酸等致龋性表型相关。目的：对苏氨酰-tRNA合成酶基因进行保守性分析,构建用于变形链球菌苏氨酰-tRNA合成酶基因敲除的重组质粒。方法：首先通过生物信息学结合Southern Blot对苏氨酰-tRNA合成酶基因的保守性进行分析,再将变形链球菌苏氨酰-tRNA合成酶基因上下游序列分别克隆至自杀质粒pFW5上的多克隆位点,构建用于基因敲除的重组质粒。观察苏氨酰-tRNA合成酶基因的保守性及重组质粒的构建结果。结果与结论：苏氨酰-tRNA合成酶基因在实验中所列6种变形链球菌中保守存在;经过聚合酶链反应和酶切分析,重组质粒所插入片断无误。表明重组质粒pFW5-thrS构建成功。重组质粒pFW5-thrS的构建可用于今后变形链球菌苏氨酰-tRNA合成酶基因功能的研究。     

结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法建立

目的 探讨结核分枝杆菌实时定量检测方法并进行评价.方法针对结核杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)16S rDNA基因设计引物,应用SYBR Green I建立荧光定量PCR( FQ-PCR)反应体系;提取Mtb基因组DNA,PCR扩增16S rDNA片段,构建重组质粒pMD-TB16S;检测11份肺结核患者痰标本;以甲型链球菌、大肠杆菌等基因组DNA作对照,检验方法特异性,对同一份Mtb DNA模板进行批内和批间检测,计算变异系数(CV).结果靶向Mtb 16S rDNA基因引物能够特异扩增Mtb 16S rDNA基因,对照组细菌基因未见扩增,灵敏度为(Mtb基因组DNA) 1.2 pg/μL,即(38.9 +3.54)拷贝/μL的16S rDNA基因,批内和批间Ct值变异系数分别为0.27％和1.26％.结论以16S rDNA为靶基因的FQ-PCR技术,能够对Mtb进行快速、敏感而特异的定量检测.     

上颌第一前磨牙根管峡部的发生率及临床意义

目的研究离体上颌第一前磨牙单根牙根尖1mm～6mm区域根管峡部的发生率和位置的情况。方法收集离体单根上颌第一前磨牙50颗,自根尖开始,片切去除1mm牙根后,用美蓝染色根切面,在显微镜下观察并记录各横截面的根管峡部的类型。在距根尖2、3、4、5、6mm处分别重复以上操作。结果单根的上颌第一前磨牙双根管率是54.00%;根管峡部发生率在距根尖4mm～6mm区较高。结论上颌第一前磨牙的根管峡部发生率在距根尖4mm水平最高。使用手术显微镜可提高对根管峡部的辨认和处理能力。