Piers—Harris儿童自我意识量表在注意缺陷多动障碍与品行障碍儿童中的应用

采用Piers—Harris儿童自我意识量表为工具,对来自于社会人口的344例ADHD、21例CD及52例ADHD CD患儿进行自我意识水平评价。结果显示,与正常儿童相比,ADHD儿童自我评价普遍性降低,CD儿童的自我评价及对行为的评价低,ADHD CD儿童的自我评价最低。     

在生活的间隙中“深呼吸”

想想看:你最近是不是常常无缘无故感到疲劳,而这种疲劳休息也无济于事?你是不是会经常感冒,只要办公室有一个同事感冒,你就会马上"跟进"?还有,你是不是会不规律地头疼,从一间办公室匆匆忙忙走到另一间办公室,却忘了自己要去干什么?你失眠吗?你会无端烦恼,精神不振吗?     

小学生中抑郁症状现况调查

目的：初步了解儿童中抑郁障碍的患病现况，探讨儿童抑郁的常见表现。方法：使用儿童抑郁自评量表(DSRSC)调查长沙市某小学二年级到六年级的565名小学生，并对量表总分≥划界分的学生进行面谈。结果：在565名小学生(男生290名，女生275名)中，量表总分≥划界分的有97名，占总人数的17．17％。使用CCMD-3成人抑郁发作的诊断标准对量表总分≥划界分的93名进行了面谈(面谈率为95．90h，)，发现符合抑郁发作的症状学标准的有38名(其中男生28名，女生10名)，占面谈者的40．9％，无一名达到病程标准和严重程度标准。结论：在儿童中抑郁症状存在较普遍，但真正构成抑郁症临床诊断的极少。     

过继转输胚胎抗原耐受T细胞诱导自然流产孕鼠母胎免疫耐受

探讨过继转输胚胎抗原耐受T细胞对小鼠自然流产模型妊娠预后及宿主孕鼠免疫细胞对父系抗原免疫耐受状态的影响。以CBA/J×BALB/c为正常妊娠模型 ,CBA/J×DBA/ 2为自然流产模型 ,将自然流产模型CBA/J孕鼠于孕 4d (着床期 )分别腹腔注射大鼠抗小鼠CD80和CD86mAb或大鼠同型IgG。于孕 9d ,应用免疫磁珠阴性分选三组孕鼠的脾脏T细胞 ,并将三组T细胞分别转输至孕 4d的CBA/J×DBA/ 2孕鼠。于宿主孕鼠孕第 9天 ,采用单向混合淋巴细胞反应分析宿主孕鼠脾脏免疫细胞对父系抗原的增殖能力 ,并用流式细胞术分析经父系抗原刺激的宿主孕鼠脾脏T细胞内IL 2表达水平。于孕 1 4d分别观察宿主孕鼠的胚胎吸收率。结果显示 ,过继转输胚胎抗原耐受T细胞和转输正常妊娠模型孕鼠的T细胞均可诱导宿主孕鼠脾脏免疫细胞对父系抗原的增殖能力及IL 2的表达显著下降 (P <0 0 5 ) ,孕 1 4d胚胎吸收率也显著下降 (P <0 0 5 )。这些结果表明 ,于孕早期过继转输胚胎抗原耐受T细胞和转输正常妊娠模型孕鼠的T细胞能诱导宿主孕鼠母 胎免疫耐受 ,防止母体对胚胎的免疫排斥 ,从而使自然流产模型的妊娠预后达到正常妊娠水平。     

人TH基因重组腺病毒的构建及生物学活性研究

将人酪氨酸羟化酶cDNA表达盒克隆于质粒型腺病毒载体p△Elsp1A，得到重组质粒pAd－TH。随后用脂质体法将重组质粒pAd－TH和拯救型腺病毒质粒pBHG11一起共转染293细胞，通过体内同源重组生成重组腺病毒AdCMVth，THcDNA重组进入腺病毒E1区并受CMV启动子控制。采用形态学、病毒核酸酶切和PCR／RT－PCR等方法进行鉴定正确。重组腺病毒滴度达到1010pfu／ml。初步结果表明，该重组腺病毒感染MN9D细胞后可使细胞内多巴胺水平增加1倍，显示出明显的TH生物学活性。提示TH重组腺病毒AdCMVth可作为高效的基因转移载体用于帕金森氏病基因治疗。     

人睾丸精子结合蛋白-His6融合蛋白在真核细胞中的表达及亲和纯化

目的:构建含有人睾丸精子结合蛋白基因(testisspermbindingprotein,tsbp)的真核表达载体pcDNA3.1/mycHis(-)B/tsbp,并进行表达和纯化。方法:以克隆有tsbp全长cDNA序列的原核表达载体pGEX5X1/tsbp为模板,用PCR扩增tsbp,并通过DNA重组构建真核表达载体pcDNA3.1/mycHis(-)B/tsbp。以重组体稳定转染HEK293细胞后,应用RTPCR、Westernblot和细胞免疫荧光技术检测His6tsbp融合蛋白的表达。选择高表达量的细胞克隆,扩增并用Ni2 NTA金属亲和层析柱(IMAC)从细胞裂解液中纯化融合蛋白His6tsbp,纯化产物的纯度用SDSPAGE和Westernblot进行鉴定。结果:成功地构建了真核表达载体pcDNA3.1/mycHis(-)B/tsbp。以重组体转染HEK293细胞后,用RTPCR检测到tsbpmRNA的表达。细胞免疫荧光染色呈阳性反应,Westernblot检测到培养细胞中有融合蛋白His6tsbp的表达。经Ni2 NTA金属亲和层析柱分离纯化,得到纯化的重组蛋白His6tsbp。结论:构建了pcDNA3.1/mycHis(-)B/tsbp真核表达载体,并在HEK293细胞中表达和亲和层析纯化,为下一步的研究奠定了基础。     

12城市儿童焦虑的结构及性别年龄特征

目的:探讨我国城市儿童的焦虑特点.方法:用儿童焦虑性情绪障碍筛查表对全国12个城市1559名少年儿童进行筛查(男774,女785;年龄8-16岁,平均12±2岁)并进行比较分析.结果:女性较男性报告有较高的广泛性焦虑(女3.8±3.1,男3.5±3.3)、分离性焦虑(3.6±2.8/3.1±2.7)、社交恐怖(4.0±3.0/3.6±2.9)和焦虑总分(15.6±10.0/14.4±10.5)(K-Wx2=5.4-16.5,P＜0.05或0.001);各年龄组躯体化/惊恐、广泛性焦虑、分离性焦虑、社交恐怖、学校恐怖、焦虑总分有显著差异(K-Wx2=17.1-45.3,P＜0.05或0.001),各焦虑因子和总分随年龄呈规律性变化,其中焦虑总分从8～12岁逐渐下降,12-16岁又呈上升趋势(从17.1±8.6到13.5±8.8到17.8±11.4),分离性焦虑随年龄的增大得分越来越小(从4.9±2.7到2.9±2.5),广泛性焦虑(从3.2±2.4到5.3±3.6)和社交恐怖(从3.6±2.5到4.3±3.4)随年龄增长评分有增加趋势.学校恐怖评分8-11岁低而平稳,而后随年龄增长而上升(从0.9±0.9到1.4±1.5).SCARED在本调查中的结构效度不理想(NFI=0.78,NNFI=0.81,CFI=0.83),根据探索性因素分析建构的三因素模型有很好的拟和指标(x2/df=3.7,NFI=0.90,NNFI=0.91,CFI=0.92,GFI=0.96,RMSEA=0.042).结论:我国城市儿童焦虑有显著的性别和年龄差异;广泛性焦虑/惊恐、社交恐怖和分离性焦虑是焦虑的主要因素,学校恐怖与躯体化症状未形成独立的焦虑因子.     

人λ-干扰素在BHK-21中的表达及生物学活性的研究

目的:研究HuIFN-λ1和HuIFN-λ2真核细胞重组表达及其生物学活性.方法:用水疱性口炎病毒(VSV)刺激人宫颈癌HeLa细胞, 用RT-PCR克隆HuIFN-λ1和HuIFN-λ2基因, 与PCAGG-EGFP真核表达载体连接, 构建重组体PCAGG-HuIFN-λ1和PCAGG-HuIFN-λ2并进行鉴定, 后在BHK-21细胞进行表达, 采用VSV*GFP于人肺腺癌A549上进行表达产物抗病毒活性测定;并通过已构建的MDBK-Mxp-Luc细胞系对HuIFN-λ1和HuIFN-λ2诱导MxA抗病毒蛋白产生的特性进行研究.结果:HuIFN-λ1-PMD18-T Vector和HuIFN-λ2-PMD18-T Vector的SacⅠ、XhoⅠ和SacⅠ和SalⅠ双酶切鉴定, 均出现610 bp大小的带, 测序示与GenBank上报道的序列完全一致.PCAGG-HuIFN-λ1活性104 IU/mL, PCAGG-HuIFN-λ2活性为102 IU/mL, 且PCAGG-HuIFN-λ1诱导Mx抗病毒蛋白的表达一定时间内随时间延长表达不断增强, 9～12 h达高峰, 24 h后消失(P＜0.05).结论:成功构建了PCAGG-HuIFN-λ1PCAGG-HuIFN-λ2 的真核表达载体并在BHK-21细胞中得到表达, 其抗病毒活性与诱导Mx抗病毒蛋白密切相关.     

皮肤涂抹雌三醇对裸鼠甲状腺功能和肿瘤影响的效果观察

目的研究经皮涂抹外源性雌三醇(E₃)对裸鼠甲状腺功能及甲状腺移植瘤的影响。方法使用123只4周龄裸鼠,按体质量采用随机数字表法分为9组:①对照组、②低E₃组、③高E₃组、④乳头状甲状腺癌组(PTC组)、⑤乳头状甲状腺癌+高E₃组(PTC+高E₃组)、⑥滤泡状甲状腺癌组(FTC组)、⑦滤泡状甲状腺癌+高E₃组(FTC+高E₃组)、⑧未分化型甲状腺癌组(ATC组)和⑨未分化型甲状腺癌+高E₃组(ATC+高E₃组),均正常饮食饮水。除对照组、PTC组、FTC组和ATC组外,其余5组每日给予皮肤涂抹雌三醇乳膏,低E₃浓度为市售化妆品人均每日使用量中雌三醇含量的25倍、高剂量为100倍。40天后,收集各组裸鼠的24h尿样;尿碘采用砷铈催化分光光度法测定,尿E₃、血清E₃、血清甲状腺激素[游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺素(TSH)]和甲状腺抗体[甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TpoAb)],采用酶联免疫吸附实验[ELISA]测定。在接种肿瘤后的第4日起,每3 d测量肿瘤大小。结果①各组裸鼠血清E₃和尿E₃水平比较差异有统计学意义;其中FTC+高E₃组和ATC+高E₃组的血清E(310.22、14.18 pmol/L)和尿E(36.40、8.18 pmol/L)水平均分别显著低于FTC组和ATC组的血清E(326.52、22.80 pmol/L)和尿E(38.91、11.49 pmol/L)水平;而PTC+高E₃组仅血清E₃水平(12.17 pmol/L)显著低于PTC组(23.05 pmol/L);高E₃组的尿E₃水平显著低于低E₃组(6.92、8.94 pmol/L);低E₃组的尿E₃水平显著高于对照组(8.94、7.17 pmol/L),PTC组、FTC组和ATC组的血清E₃水平显著高于对照组和高E₃组(23.05、26.52、22.80比13.23、14.46 pmol/L)。②各组血清FT3水平比较差异没有统计学意义。各组血清FT4和TSH水平与对照组比较,差异均有统计学意义,其中各实验组的FT4水平均显著低于对照组,TSH水平均显著高于对照组,但PTC组与PTC组+高E₃组、FTC组与FTC+高E₃组、ATC组与ATC+高E₃组分别进行两两比较,FT4和TSH水平并差异无统计学意义。③各组裸鼠血清TgAb和TpoAb水平比较差异均有统计学意义。其中低E₃组、高E₃组、PTC+高E₃组、FTC组、ATC组和ATC+高E₃组的TgAb水平均显著高于对照组;各实验组的TpoAb水平均显著高于对照组。④各组裸鼠尿碘水平比较差异没有统计学意义。⑤各组裸鼠肿瘤体积大小比较差异均有统计学意义,PTC+高E₃组与PTC组比较,在接种肿瘤后的第7 d、16 d、25 d、28 d和37 d,肿瘤体积发生显著性差异(71.54、226.05、730.26、893.34、1242.12比49.87、325.50、551.28、664.38、967.78 mm³);FTC+高E₃组与FTC组比较,在接种肿瘤后的第25 d、28 d、37 d和40 d,肿瘤体积发生显著性差异(392.60、475.70、794.68、943.51比214.82、238.32、422.19、490.00 mm³);ATC+高E₃组与ATC组比较,在接种肿瘤后的第37 d和40 d,肿瘤体积发生显著性差异(217.53、432.10比577.19、1146.66 mm³)。结论外源性雌三醇能够诱导裸鼠发生甲状腺功能减退和抗体水平增高,同时对乳头状甲状腺癌和滤泡状甲状腺癌的生长有着促进作用,对未分化甲状腺癌的生长有抑制作用。     

基于GLP-1R/cAMP/PKA/CREB的泽泻汤促进白色脂肪棕色化/激活棕色脂肪作用机制研究

基于GLP-1R/cAMP/PKA/CREB探讨泽泻汤(Zexie Decoction, ZXD)体内外促进白色脂肪棕色化/激活棕色脂肪的作用机制。西式饮食(western diet, WD)诱导高脂血症小鼠模型,设置对照组,WD组(模型组),ZXD低、中、高剂量组;体外诱导3T3-L1细胞成脂分化模型,以毛喉素(forskolin, FSK)作为阳性对照,设置ZXD低、中、高剂量组。免疫组化与免疫荧光结果提示,与WD组相比,泽泻汤促进白色和棕色脂肪组织中UCP1表达;同时泽泻汤上调了细胞中UCP1、CPT1β、PPARα等基因;Western blot检测PGC-1α、UCP1、PPARα的蛋白表达也表现出随泽泻汤剂量依赖性升高,表明泽泻汤促进白色脂肪棕色化/激活棕色脂肪。苏木素-伊红(HE)染色结果显示,相较于WD组,泽泻汤处理后,白色和棕色脂肪细胞明显缩小,ATGL、HSL、MGL、PLIN1的mRNA表达显著上调;油红O染色和生化试剂盒检测细胞TC、TG水平均提示泽泻汤改善脂质蓄积,促进脂肪分解。p-CREB免疫组化和免疫荧光发现,泽泻汤处理逆转了WD导致的p-CREB表达降低...