电穿孔转染酸性成纤维细胞生长因子基因对骨骼肌卫星细胞的影响

背景：课题组早期研究表明体外一定剂量酸性成纤维细胞生长因子对骨骼肌卫星细胞增殖有促进作用。 目的：进一步验证电穿孔转染酸性成纤维细胞生长因子基因对骨骼肌卫星细胞生长、增殖及分化的影响。 方法：原代培养、纯化骨骼肌卫星细胞,将带有酸性成纤维细胞生长因子基因的质粒pSectag-GFP-aFGF通过电转染的方法转染大鼠骨骼肌卫星细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况并计算转染率,以流式细胞仪分析转染后细胞周期,绘制细胞生长曲线,观察转染后肌管形成情况,Western Bloting检测酸性成纤维细胞生长因子基因的表达。 结果与结论：①免疫细胞化学检测：骨骼肌肌动蛋白呈阳性表达。②转染效率：pSectag-aFGF质粒电转染12 h后即可看见散在发绿色荧光的卫星细胞,72-96 h达高峰,阳性表达率约90%。③细胞周期检测：电转染后S期所占的百分比明显多于未转染对照组(P < 0.05)。④细胞生长曲线检测：电转染细胞接种后第3天进入对数生长期,第5天后开始减少。⑤分化能力观察：电转染组肌管较未转染对照组明显减少,老化细胞较少。⑥Western-blot：酸性成纤维细胞生长因子基因在转染骨骼肌卫星细胞中表达。结果表明,通过电穿孔法可以将酸性成纤维细胞生长因子基因转染进骨骼肌卫星细胞并获得高效持久的表达,并有促进骨骼肌卫星细胞增殖及抑制分化为肌管的作用。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

噻唑烷二酮类药物对GK大鼠胰岛B细胞凋亡的影响

目的选择GK大鼠为2型糖尿病模型,研究噻唑烷二酮类药物(TZDs)罗格列酮和吡格列酮对胰岛B细胞保护作用的机制。方法以雄性GK大鼠和正常对照雄性Wistar大鼠为研究对象,随机分为4组:Wistar正常对照组13只(W组),GK+罗格列酮组10只(R组),GK+吡格列酮组10只(P组)和GK未治疗组10只(G组)。其中罗格列酮组给予罗格列酮钠2mg.kg-1.d-1灌胃,吡格列酮组给予吡格列酮3mg.kg-1.d-1灌胃,GK未治疗组不予药物干预,实验为期6周。实验结束后,取胰腺标本固定并进行电镜观察。同时采用免疫组化法检测胰岛细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达,并采用TUNEL法检测胰腺B细胞凋亡情况。结果电镜下,G组大鼠胰岛B细胞出现核皱缩,核仁消失,染色质边集,呈现凋亡早期改变;其他3组胰岛未见凋亡改变(P<0.01)。R组和P组的Bcl-2表达显著高于G组(P<0.01);W组与G组相比差异无统计学意义。R组、P组和W组的Bax表达低于G组(P<0.05);R组和P组间差异无统计学意义。结论 GK大鼠胰岛B细胞存在细胞凋亡,可能与其发生糖尿病有关。罗格列酮和吡格列酮可以减少GK大鼠胰岛B细胞凋亡,且与B...     

中医药治疗股骨头坏死研究进展

股骨头缺血性坏死（avascular necrosis of femoral head,ANFH）是由于不同病因破坏了股骨头的血液供应所造成的以不定区域的骨小梁骨髓坏死为特征的临床常见病。中医药治疗ANFH疗效独特,已积累了大量的临床经验。中药以其使用方便,毒副作用小,能解除临床症状而被人们所接受,现就近年来的治疗现状综述如下。     

宝鸡市城区0~14岁儿童哮喘危险因素调查

目的 探讨宝鸡市区儿童哮喘的危险因素,为临床治疗提供参考。方法 采取两阶段分层整群随机抽样调查方法,抽取宝鸡市金台区、渭滨区、陈仓区1 029名0~14岁儿童进行哮喘危险因素调查,利用χ²检验,多因素非条件二分类Logistic回归分析儿童哮喘影响因素。结果 经单因素分析个人药物过敏史、家族过敏史、剖宫产、房间装修等27个因素有统计学意义(P＜0.05);多因素非条件Logistic回归分析显示,在未感冒或流感的情况下,有打喷嚏、流涕、鼻塞、鼻痒或眼痒现象,反复的皮肤瘙痒或关节屈侧皮疹、过敏性鼻炎、进食某些食物后出现过敏症状或类似过敏情况、剖腹产、6个月内添加蛋白质辅食、使用抗生素、房间墙面使用油漆、塑钢门窗、夏天采用自然通风制冷、蚕砂枕头是独立危险因素(P＜0.05);冬天采暖使用暖气、夏天通风或制冷使用电风扇、羽绒被褥是保护因素(P＜0.05)。结论 儿童哮喘危险因素较多,尽量避免暴露危险因素,建议婴儿6月内实行母乳喂养,对预防和控制儿童哮喘具有重要意义。     

不同机制症状性颅内动脉粥样硬化性疾病的高分辨率磁共振特征

目的 探究不同机制大动脉粥样硬化型卒中患者颅内动脉粥样硬化斑块的特征是否存在差别。 方法 依据中国缺血性卒中亚型（Chinese Ischemic Stroke Subclassification,CISS）分型标准连续收录症 状性颅内动脉粥样硬化性疾病（symptomatic intracranial atherosclerotic stenosis,sICAS）患者作为研究 对象,并依据梗死机制将sICAS患者分组,无症状性ICAS患者作为对照组。对所有入组患者的责任动 脉管壁行高分辨率磁共振（high-resolution magnetic resonance imaging,HR MRI）扫描,比较不同机制 sICAS患者动脉粥样硬化斑块的特征。 结果 共有56例sICAS患者、9例无症状性ICAS患者纳入本研究。与无症状性ICAS患者比较,sICAS患者 颅内动脉粥样硬化斑块的特征表现为：病变局部正性重构率高、负性重构率低;动脉粥样硬化斑块 更多位于穿支动脉开口处。但不同机制sICAS患者颅内动脉粥样硬化斑块特征未发现明显差别。入组 患者中10例经经颅多普勒（transcranial Doppler,TCD）/磁共振血管成像（magnetic resonance angiography, MRA）检查未发现颅内动脉狭窄,经HR MRI检查发现存在粥样硬化斑块。 结论 HR MRI有助于发现sICAS患者不稳定斑块的存在,但不同机制sICAS患者颅内动脉粥样硬化斑 块的HR MRI特征差异无显著性。     

HPLC法测定颈腰康片中士的宁的含量

目的建立以HPLC法检测颈腰康片中士的宁的含量测定。方法色谱柱：依利特C18（4.6×250mm,5μm）;流动相：乙腈-0.01mol/L庚烷磺酸钠与0.02mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液（用10%磷酸调节pH值2.8）（23∶77）;流速：1.0ml/min;柱温：室温;检测波长：254nm;以士的宁为对照品,采用外标法定量。结果士的宁线性范围为0.0247-0.2223μg（r=1.0000）,平均回收率为99.80%,RSD为1.29%。结论本法简便,结果准确,重现性好,可用于该药品的质量控制。     

综合护理干预在支气管哮喘患者中的应用效果研究

目的 :探讨综合护理干预在支气管哮喘患者中的应用效果.方法 :将本院收治的56例支气管哮喘患者随机分为对照组和观察组各28例,对照组给予常规护理,观察组给予综合护理干预,比较两组患者的治疗有效率、哮喘发作次数、平均住院时间及护理满意度.结果 :观察组患者的治疗有效率、哮喘发作次数、平均住院时间及护理满意度等指标均明显优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 :综合护理干预可以提高支气管哮喘患者的治疗有效率和护理满意度,减少哮喘发作次数和住院时间,有利于患者康复,具有积极的临床意义.     

抗链球菌溶血素O与小儿急性呼吸道感染关系的多中心研究

目的探讨宝鸡地区抗链球菌溶血素O与小儿急性呼吸道感染（ARI）的关系,对儿科临床医师诊治小儿急性上呼吸道感染和经验选用抗生素提供指导。方法对宝鸡市5家医院儿科2010-08/2011-07小儿急性呼吸道感染病原学多中心调查时收集到的抗链球菌溶血素O检测结果进行汇总,结合已发表的宝鸡地区小儿急性呼吸道感染病原学多中心研究论文的相关摘要和其他临床资料进行分析。结果 848例小儿急性上呼吸道感染（AURI）住院儿咽拭子细菌培养结果阳性率24.9%。6324例小儿急性下呼吸道感染（ALRI）住院患儿痰细菌培养阳性率29.31%。5家医院共检测6591例急性呼吸道感染住院患儿血清中ASO的含量,阳性率为3.39%。儿童ALRI痰培养G＋病原菌药敏试验结果显示,溶血性链球菌对儿科常规使用的青霉素、阿莫西林/克拉维酸、头孢唑啉等杀菌剂高度敏感。结论多中心、多方法联合检测结果,对指导本地区儿科临床医师诊治小儿急性上呼吸道感染和经验选用抗菌药物有重要的指导意义。     

PCYT1A基因多态性与精神分裂症的关系

目的：探讨3号染色体PCYT1A基因多态性与中国北方汉族人群精神分裂症的关系。方法：以115个由精神分裂症患者及其健康父母双亲组成的核心家系为研究对象,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）的方法对以上样品进行PCYT1A基因型检测,应用遗传统计方法进行传递不平衡检验（TDT）及基于单体型的单体型相对风险分析(HHRR)。结果：患者组和父母组中PCYT1A基因rs3772108位点基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律（P>0.05）;HHRR分析结果显示,父母传递和未传递给患者的等位基因C、T的频数分布差异无显著性（χ²=0.011,P>0.05）;TDT分析结果表明,杂合子父母双亲的两个不同等位基因传递概率没有偏离50%（χ²=0.010, P>0.05)。结论：3号染色体上的PCYT1A基因rs3772108位点基因多态性与精神分裂症无关联。     

放线菌素D诱导人离体HL7702肝细胞株凋亡及其作用机理

目的 探讨放线菌素D（ActD）诱导正常人HL7702肝细胞凋亡及PI3K／Akt信号通路对此过程的作用。方法 采用HL7702正常人肝细胞株，MTT法检测ActD对其存活力的影响；Hoechst33342形态学染色；流式细胞仪检测细胞凋亡情况；Western blot方法检测细胞总Akt（丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶）及p-Akt蛋白表达。结果 ActD可诱导HL7702肝细胞凋亡，其浓度在0．25～8μg／ml范围内呈现剂量效应关系；PI3K／Akt特异性抑制剂wortmannin能够增强ActD诱导的肝细胞凋亡。结论 ActD可诱导肝细胞凋亡，其机理可能是抑制PI3K／Akt信号通路。