HPLC测定市售青风藤中青藤碱和木兰花碱含量

目的:建立青风藤中青藤碱和木兰花碱的含量测定方法,并用于评价市售青风藤的质量。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Synergi Polar-RP苯基C18柱(250 mm×4. 6 mm,4"m),流动相为乙腈(B)-1%乙酸水溶液(A),梯度洗脱(0～15 min,10%→15%B; 15～17 min,15%→20%B; 17～22 min,20%→40%B; 22～30 min,40%→40%B),柱温为30℃;检测波长为280 nm,流速为1 m L·min-1。结果:本方法的精密度、准确度和重现性的RSD皆小于2%,青藤碱和木兰花碱在0. 01～0. 40 mg·m L-1线性关系良好;在测定的62批样品中,除了4批伪品之外,只有1批样品中青藤碱含量低于《中华人民共和国药典》要求,青藤碱和木兰花碱的含量分别为0. 236%～4. 735%和0. 256%～3. 682%。结论:本方法精密度、准确度和重现性良好,适用于青风藤中青藤碱和木兰花碱的含量测定;大多数市售青风藤的质量符合《中华人民共和国药典》要求,但主要成分青藤碱和木兰花碱的含量存在差异。     

HPLC法测定金莲花汤中绿原酸、咖啡酸、葛根素、牡荆素、迷迭香酸

目的 建立金莲花汤中绿原酸、咖啡酸、葛根素、牡荆素、迷迭香酸的HPLC含量测定方法,并对采用不同来源的药材制备的3批金莲花汤中的上述5种成分进行含量测定。方法 采用HPLC法,色谱柱为Synergi Polar-RP苯基C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,4 μm）;流动相为1%乙酸（A）～乙腈（B）;洗脱程序（0～30 min,5%～14% B;30～40 min,14%～14% B;40～42 min,14%～19% B;42～60 min,19%～25% B;60～63 min,25%～5% B;63～64 min,5%～5% B）;柱温35℃;检测波长286 nm;进样量10 μL。结果 测定3批金莲花汤中绿原酸、咖啡酸、葛根素、牡荆素、迷迭香酸含量分别为：0.34、0.08、9.73、0.93、0.32 mg/g;0.13、0.03、8.37、0.33、0.21 mg/g;0.37、0.07、8.36、0.12、0.26 mg/g。结论 该方法精密度、稳定性、重复性良好,适用于金莲花汤中上述5种成分的含量测定;用不同来源的药材制备的金莲花汤中上述5种成分的含量存在差异,其中葛根素的含量最高。     

基于分子对接技术的金莲花主要成分抗病毒和抗炎机制预测

目的利用分子对接技术预测金莲花中牡荆素、荭草素、牡荆素-2"-O-β-L-半乳糖苷、荭草素-2"-O-β-L-半乳糖苷、藜芦酸、金莲花碱的抗病毒和抗炎机制。方法运用Discovery Studio 2.5软件和药物化学数据库,将金莲花的6个活性成分与Toll样受体蛋白(TLRs)及神经氨酸酶(NA)靶点进行分子对接,通过模拟运算,分析对接结果及其功能区域的相互作用关系。结果牡荆素、荭草素、牡荆素-2"-O-β-L-半乳糖苷、藜芦酸、金莲花碱均作用于1种或多种TLR,而荭草素-2"-O-β-L-半乳糖苷与3种TLR均无相互作用;黄酮类化合物,即牡荆素、荭草素、牡荆素-2"-O-β-L-半乳糖苷、荭草素-2"-O-β-L-半乳糖苷均可与NA结合,而藜芦酸和金莲花碱与NA无相互作用。结论金莲花的6个活性成分中,5个成分可影响TLRs介导的信号通路,TLR3、4、7是其抗病毒抗炎作用的潜在靶点;4个黄酮类化合物可通过作用于NA而影响流感病毒活性。本研究可为探讨金莲花的抗病毒和抗炎有效成分及其进一步开发利用提供依据。     

一步一步做好全瓷修复体抛光

随着全瓷材料和微创修复理念的发展,全瓷修复体的临床应用日益广泛.全瓷修复体的抛光是影响修复长期稳定性的重要因素.良好的抛光不仅能为全瓷修复体提供光洁的表面和外观,还能降低对对牙体硬组织的磨损、减少修复体表面菌斑聚集、避免裂纹扩展、提高修复体强度和美观性.做好全瓷修复体的抛光需要3个重要的环节:抛光工具的合理选择、抛光...     

齿科铸造用纯钛制作义齿支架的临床效果评价

目的：评价一种新的齿科铸造用纯钛制作总义齿基托及可摘义齿金属支架的临床效果。方法：选择就诊于北京大学口腔医学院修复科的牙列缺损或牙列缺失患者共60例,随机分为实验组和对照组（各30例）,分别采用齿科铸造用纯钛（日进株式会社,日本）与Wironit钴铬合金（BEGO公司,德国）铸造局部义齿支架或总义齿基托,于义齿戴用后1周、1个月和3个月进行复诊,检查患者佩戴义齿的临床效果,评价义齿的安全性、强度、适合性。结果：采用的齿科铸造用纯钛或钴铬合金制作总义齿基托或者可摘局部义齿支架,两种材料在安全性、强度和适合性方面无显著差异。结论：所采用的齿科铸造用纯钛可以用于临床制作总义齿基托及可摘局部义齿支架。     

新型大气压冷等离子体射流处理对牙本质胶原纤维交联化的影响

目的: 研究新型大气压射频辉光放电(radio-frequency atmospheric-pressure glow discharge,RF-APGD)等离子体处理对牙本质胶原纤维交联化的影响。方法: (1)收集20颗新鲜拔除的、完整的第三磨牙,采用低速水冷精密切割机制备平行于牙合面的中层牙本质片,厚度为(1.5±0.1) mm,浸泡于10%(质量分数)H₃PO₄溶液中16 h获得全脱矿牙本质胶原纤维。将20个牙本质胶原纤维片随机分为5组,对照组无处理,4个实验组采用气体温度为4 ℃的等离子体处理不同时间(20 s、30 s、40 s、50 s)。采用衰减全反射傅里叶变换红外光谱仪测定牙本质胶原纤维结构及交联度,采用扫描电镜观察牙本质胶原纤维表面形貌,采用透射电镜观察牙本质胶原纤维微观结构。(2)收集完整第三磨牙40颗,制备精细牙本质粉5 g,10%H₃PO₄溶液中完全脱矿,将牙本质胶原纤维粉平均分为5组。对照组无处理,实验组分别采用等离子体处理20 s、30 s、40 s、50 s,采用茚三酮比色法测定各组交联度。(3)收集40颗完整第三磨牙,制备中层牙本质条。将牙本质胶原纤维条随机均分为5组,对照组无处理,实验组采用等离子体处理牙本质胶原纤维条各个轴面20 s、30 s、40 s、50 s,采用万能力学机测定牙本质极限拉伸强度。结果: (1)扫描电镜观察脱矿牙本质表面形貌显示,等离子体处理20 s、 30 s及40 s,脱矿牙本质表面胶原纤维网状结构均能维持蓬松;等离子体处理50 s会出现部分微结构的破坏;透射电镜结果显示等离子体处理20 s、30 s及40 s后,纤维结构蓬松,可见天然Ⅰ型胶原纤维典型的周期性横纹;红外光谱结果显示,等离子体处理后,胶原纤维的二级构象与对照组一致,且处理30 s及40 s后酰胺带强度明显增加。(2)茚三酮交联度测试结果显示等离子体处理30 s组及40 s组交联度最高,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)牙本质极限拉伸强度结果显示,对照组为(1.67±0.24) MPa,等离子体处理20 s、30 s、40 s、50 s组分别为(4.21±0.15) MPa、(7.06±0.30) MPa、(7.32±0.27) MPa、(6.87±0.17) MPa,与对照组差异有统计学意义(P<0.05)。结论: 新型RF-APGD等离子体处理可以促进脱矿牙本质胶原纤维交联,同时明显增强了牙本质胶原纤维的机械性能。     

下颌固定夹板用于牙周病修复治疗的三维有限元模型的建立

目的：建立带有完整牙列的下颌骨及固定牙周夹板的三维有限元模型,为牙周病修复治疗的生物力学研究提供基础。方法：采用螺旋CT扫描,分别应用Mimics8．1、Geomagicstudi08．0、Imageware11．0及MSC．MarcMentat2005等软件建立带有完整牙列的下颌骨几何模型及固定牙周夹板的三维有限元模型,并对所建模型进行可行性分析验证。结果：建成后的固定牙周夹板模型与临床实体组织具有高度的几何相似性、力学相似性,网格质量较好,共包含145493个节点和567790个单元,加载后牙周膜内应力得到重新分布,由牙根颈部至根尖部应力值逐渐降低,呈现明显的梯度变化,应力分布较为合理,反映出该有限元模型的有效性。结论：利用CT扫描技术与数字图像技术和三维有限元的方法相结合,建立的固定牙周夹板的三维有限元模型较真实地模拟了临床实际情况,从而为后续不同种类牙周夹板及其基牙和牙周组织的生物力学研究提供有效平台。     

金莲花不同花部提取物的抗炎活性

目的:研究金莲花花萼、花冠、花蕊群、子房、花柄5个花部提取物的抗炎活性,探讨抗炎活性与其总黄酮含量的相关性。方法:通过LPS诱导的RAW264.7细胞体外炎症模型,采用Griess试剂法测定细胞的NO释放量,考察不同花部提取物的抗炎活性;采用硝酸铝比色法测定各花部提取物的总黄酮含量。结果:金莲花各花部提取物均能抑制LPS诱导的RAW264.7细胞分泌NO,抑制率顺序为子房和花蕊群花萼和花柄花冠;各花部提取物的总黄酮含量顺序为花柄花萼花冠子房花蕊群。结论:金莲花各花部提取物均有抗炎作用,且抗炎活性的强弱与其总黄酮含量不成正比。     

不同温度新型大气压冷等离子体处理对牙本质粘接强度的影响

目的:研究不同温度条件下新型大气压冷等离子体(radio-frequency atmospheric-pressure glow discharge,RF-APGD)处理对牙本质粘接强度的影响。方法:(1)收集新鲜拔除的、无龋坏的、完整的第三磨牙52颗,采用精密低速切割机制备平行于牙合中层牙本质薄片,每颗离体牙制备1片 [(900±100) μm]。将52个中层牙本质薄片随机分为对照组和实验组,其中对照组4片,无处理;实验组48片,按新型RF-APGD等离子体不同处理温度(4 ℃、10 ℃、20 ℃、30 ℃)平均分为4组,每大组12片。每大组按照不同处理时间(10 s,20 s,30 s)平均分为3个小组,每小组4片。采用扫描电镜观察脱矿牙本质表面形貌。(2)收集20颗完整第三磨牙随机分为对照组和4个实验组,每组4颗。对照组,无处理;4 ℃、10 ℃、20 ℃和 30 ℃ 4个实验组,每组采用新型RF-APGD等离子体处理20 s。实验组及对照组采用低速水冷精密切割机垂直于牙长轴去除牙合面牙釉质,暴露中层牙本质;采用32%磷酸酸蚀剂对牙本质表面进行酸蚀;采用牙本质粘接剂和树脂进行牙本质-树脂粘接,采用万能力学机进行牙本质-树脂粘接试件即刻微拉伸强度测定,观察不同温度新型RF-APGD等离子体处理对牙本质-树脂即刻粘接性能的影响。结果:(1)扫描电镜观察脱矿牙本质表面形貌显示,30 ℃和20 ℃新型 RF-APGD 等离子体处理组,脱矿牙本质胶原纤维表面经新型RF-APGD等离子体处理10 s即会出现微结构的破坏;10 ℃新型RF-APGD等离子体处理脱矿牙本质表面 20 s,即会出现牙本质胶原纤维之间间隙变小、表面结构坍塌等现象;4 ℃新型RF-APGD等离子体处理10 s、20 s及30 s,脱矿牙本质表面胶原纤维网状结构均能维持蓬松结构。(2)牙本质-树脂即刻微拉伸强度结果显示,对照组为(47.4±0.5) MPa,4 ℃、10 ℃、20 ℃和30 ℃新型RF-APGD等离子体处理组分别为(57.8±0.7) MPa、(51.9±0.7) MPa、(29.7±1.0) MPa和(22.2±1.5) MPa,其中4 ℃新型RF-APGD等离子体处理组所获得的微拉伸强度最高,与其他各组相比,差异具有统计学意义(P<0.05), 4 ℃和10 ℃新型RF-APGD等离子体处理组和对照组相比,牙本质-树脂微拉伸粘接强度分别提高了21.9%和9.5%。结论:4 ℃新型RF-APGD等离子体对脱矿牙本质胶原纤维的处理,较更高温度的新型RF-APGD等离子体更有利于提高牙本质-树脂的即刻粘接性能。     

人肠道微生物中抗菌活性菌株的筛选及其代谢产物研究

目的:从肠道菌群中筛选抗菌活性菌株,明确其抗菌活性物质,为认识肠道微生物之间的相互作用乃至与宿主健康的关系奠定基础。方法:对肠道混合菌群进行体外培养,以抗菌活性为指标筛选活性单菌株;采用生化鉴定法和16S rDNA鉴定法对菌株进行鉴定;通过活性追踪手段,运用各种色谱分离技术对菌株的代谢产物进行分离纯化,并利用光谱技术鉴定其结构;采用微量孔板法测定各化合物的最低抑菌浓度(MIC)。结果:筛选得到具有抗菌作用的普通变形杆菌Proteus vulgaris HA-3151菌株;从其发酵液中分离得到13个化合物:D-3-苯基乳酸、环(丙-苯丙)二肽、环(酪-酪)二肽、环(酪-亮)二肽、环(酪-异亮)二肽、丁香酸、黄豆黄苷、大豆苷、大豆苷元、染料木苷、5-甲氧基大豆苷元、3-甲氧基没食子酸和染料木黄酮;其中,D-3-苯基乳酸、大豆苷元、染料木苷、染料木黄酮以及环(丙-苯丙)二肽、环(酪-酪)二肽具有抑菌作用。结论:首次得到了有抗菌活性的普通变形杆菌Proteus vulgaris菌株并证明其可产生有机酸、黄酮和二肽类抗菌活性物质,这些物质有助于其形成定植优势,进而对人体健康产生各种影响。