血管内栓塞材料BaFe12O19微粒血液相容性研究

目的探讨钡铁氧化合物BaFe12O19微粒的血液相容性。方法对BaFe12O19微粒进行血液相容性实验，包括溶血实验、出血和凝血时间测定、凝血实验等。结果BaFe12O19微粒对出血和凝血时间无影响，不引起溶血和凝血。结论BaFe12O19微粒具有良好的血液相容性，且能在X线下显影，悬浮性能良好，不易堵塞微导管，其有可能成为一种全新的血管内栓塞材料。     

RGD高分子材料用于周围神经修复的生物学评价

采用自行设计研制的新型可降解仿生RGD高分子材料用于周围神经缺损的修复治疗,研究其促进神经修复的作用。为了了解复合材料的特性,本试验从体外和体内试验多方面进行了评价。研究结果显示,RGD高分子材料导管具有良好的生物相容性,是一种理想的周围神经修复材料。     

化学沉淀法制备纳米HAP-sol及其血液相容性研究

目的:研究改性后的纳米HAP粒子的血液相容性.方法:采用化学沉淀法制备纳米羟基磷灰石溶胶(HAP-sol),以聚丙烯酸纳(PAA-Na)为稳定剂.通过体外溶血试验和血淋巴细胞毒性试验(MTT法)来评价HAP-sol的血液相容性.结果:红细胞溶血率在0～3%之间,细胞毒性分级为0级或1级,纳米HAP-sol对血红细胞无溶血作用,也没有明显的细胞毒性效应.结论:以PAA-Na为稳定剂,纳米HAP-sol有良好的血液相容性,纳米HAP-sol用于静脉注射药物有一定的安全性.     

小鼠腹腔巨噬细胞的分离培养与鉴定

目的:建立一种简便的巨噬细胞分离与培养方法,为骨替代材料降解产物的研究提供巨噬细胞。方法:以无血清DMEM培养液灌洗小鼠腹腔,10min后吸出灌洗液于含10%胎牛血清的DMEM培养液中培养。采用HE染色和倒置显微镜观察细胞形态;酸性磷酸酶及非特异性酯酶染色测定细胞内酶的表达;墨汁颗粒吞噬实验检测其吞噬功能。结果:获得高纯度的巨噬细胞,具有巨噬细胞的形态特征,良好的吞噬功能,含水解酶类。结论:本法是一种简易而实用的体外分离培养腹腔巨噬细胞的方法。     

彩色多普勒超声对PRGD复合神经导管修复周围神经缺损的评价

目的探讨彩色多普勒超声（color Doppler ultrasound,CDUS）在神经导管桥接修复缺损神经再生临床评价的可行性。方法对10例周围神经缺损患者进行神经导管桥接修复术,并在术后采用超声连续动态观察缺失神经再生生长状况。结果术后每3个月超声检查,密切观察导管内缺失段神经变化;6个月后神经导管内壁上见神经纤维束细线状爬行生长显示明显;12个月后神经导管管壁逐渐模糊、断续,提示导管材料发生降解,导管内缺损处再生神经纤维束排列逐渐规则、尚均匀;同时观察导管内神经血流情况。结论超声在临床评价神经导管桥接修复缺损神经的方面具有潜在应用价值。     

RGD多肽接枝聚复合导管桥接神经缺损的实验研究

Objective To investigate the effect of RGD peptide conjugated poly[ LA-(Glc-Lys) ]/βTCP/PLA nerve conduit for bridging peripheral nerve regeneration defect. Methods Forty-five male Wister rots were randomly divided into 3 groups, with 15 rats each. A 10 mm defect was created in the right sciatic nerve. In group A the gap was bridged by PLA tube. In group B RGD peptide conjugated poly[ LA-(Glc-Lys) ]/β-TCP/PLA nerve conduit was used to repair the defect. Autologous nerve graft was done in group C which served as control. Twelve weeks postoperatively nerve regeneration was evaluated by gross observation,electrophysiology, muscle weight and muscle morphometry of triceps surae, and ultrastructure of the regenerating nerve. Results Twelve weeks after the operation, nerve conduction velocity and muscle weight recovery of group B were better than those of group A. The differences were statistically significant( P < 0.05). There was no significant difference between group B and group C ( P > 0. 05). The results of histology and ultrastructure showed that nerve regeneration in group B and group C was significantly superior to that in group A.Conclusion RGD peptide conjugated poly[LA-(Glc-Lys)]/β-TCP/PLA conduit can achieve similar results in repairing sciatic nerve defect to that of autogentic nerve graft. It may be an ideal material to repair nerve defect.     

RGD多肽接枝聚复合导管桥接神经缺损的实验研究

Objective To investigate the effect of RGD peptide conjugated poly[ LA-(Glc-Lys) ]/βTCP/PLA nerve conduit for bridging peripheral nerve regeneration defect. Methods Forty-five male Wister rots were randomly divided into 3 groups, with 15 rats each. A 10 mm defect was created in the right sciatic nerve. In group A the gap was bridged by PLA tube. In group B RGD peptide conjugated poly[ LA-(Glc-Lys) ]/β-TCP/PLA nerve conduit was used to repair the defect. Autologous nerve graft was done in group C which served as control. Twelve weeks postoperatively nerve regeneration was evaluated by gross observation,electrophysiology, muscle weight and muscle morphometry of triceps surae, and ultrastructure of the regenerating nerve. Results Twelve weeks after the operation, nerve conduction velocity and muscle weight recovery of group B were better than those of group A. The differences were statistically significant( P < 0.05). There was no significant difference between group B and group C ( P > 0. 05). The results of histology and ultrastructure showed that nerve regeneration in group B and group C was significantly superior to that in group A.Conclusion RGD peptide conjugated poly[LA-(Glc-Lys)]/β-TCP/PLA conduit can achieve similar results in repairing sciatic nerve defect to that of autogentic nerve graft. It may be an ideal material to repair nerve defect.     

聚乳酸/海藻酸钠/壳聚糖复合材料的体外降解性能

背景：聚乳酸由于其疏水性以及在降解过程中的酸致效应,使其在应用中受到限制。通过静电组装技术在聚乳酸表面引入海藻酸钠/壳聚糖,可望克服上述缺点和不足。目的：观察聚乳酸/海藻酸钠/壳聚糖可降解复合材料的体外降解性能。设计、时间及地点：观察实验,于2007-09/2008-06在武汉理工大学生物中心实验室完成。材料：采用1,6-乙二胺对聚乳酸表面进行胺解反应,形成胺化层,在其表面引入带正电的自由氨基,由静电作用依次组装上聚阴离子海藻酸钠和聚阳离子壳聚糖,获得聚乳酸/海藻酸钠/壳聚糖多层复合材料。方法：将制备好的组装层数为5,10,15,20双层聚乳酸/海藻酸钠/壳聚糖复合材料置于37℃恒温的磷酸缓冲溶液中进行体外降解实验。主要观察指标：定期测定并记录不同组装层数复合材料的pH值变化、失重及相对分子质量变化,用扫描电镜观察材料降解的形貌变化。结果：聚乳酸/海藻酸钠/壳聚糖复合材料降解的pH值基本稳定在7.0左右;通过控制组装层数（5～15层）可有效调节材料降解过程中的pH值,pH值随层数的增加而增加。扫描电镜观察,复合材料降解7周后,材料已明显降解。结论：聚乳酸/海藻酸钠/壳聚糖复合材料具有良好的降解性能。     

体外原代培养成年大鼠许旺细胞的实验方法：组织块反复种植＋低浓度酶消化＋差速贴壁

目的:探讨获得高纯度成年SD大鼠许旺细胞的有效方法。方法:实验于2006-12在武汉理工大学完成。①许旺细胞原代培养:无菌条件下暴露SD大鼠左侧坐骨神经,切断神经,结扎后缝合臀大肌及皮肤。7d后处死大鼠,切取左侧预变性坐骨神经,并取右侧正常坐骨神经做对照,显微镜下尽量去除神经外膜及黏连组织,将神经剪成1mm3的组织块,植入培养瓶中进行培养,组织块间距以1cm为宜。②许旺细胞传代及纯化:培养7d后,将组织转移到新的培养板中继续培养,继之依次应用低浓度酶消化法、差速贴壁分离法去除成纤维细胞,纯化许旺细胞。③许旺细胞的观察和计数:在倒置相差显微镜下观察许旺细胞的形态和增殖情况,定期随机采集细胞图像,并用MTT法测试其增殖能力。④许旺细胞的鉴定:对纯化的许旺细胞进行S-100蛋白酶联免疫细胞化学染色鉴定。结果:①许旺细胞的分离培养和纯化:预变性组许旺细胞密度高于正常对照组,培养7d后两组的密度差别尤为显著。②许旺细胞的形态学观察:许旺细胞为典型的长梭状,具有双极或多级,两端突起较长,汇合成片并交织呈网状。正常对照组细胞密度较低,生长较慢,胞体较长,细胞多呈三角形或多角形。MTT生长曲线显示:预变性组许旺细胞倍增时间为3d,正常为4d。③许旺细胞的免疫化学鉴定:许旺细胞胞体及突起呈棕褐色,而成纤维细胞为扁平状且未着色,呈透明状。预变性组许旺细胞纯度为95%,正常对照组为86%。结论:本实验所采用的组织块反复种植 低浓度酶消化 差速贴壁法分离纯化许旺细胞切实可行,可有效获得大量高纯度许旺细胞。     

新型神经导管复合材料与骨髓间充质干细胞的相容性

背景：理想的神经修复材料要有良好的生物相容性、生物可降解性、可塑性以及一定的机械强度. 目的：观察自行研制的精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸多肽接枝聚（羟基乙酸-L-赖氨酸-乳酸）/聚乳酸/β-磷酸三钙/神经生长因子复合材料与大鼠骨髓间充质干细胞的细胞相容性. 方法：将从SD大鼠骨髓中分离纯化的第3代骨髓间充质干细胞与精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸多肽接枝聚（羟基乙酸-L-赖氨酸-乳酸）/聚乳酸/β-磷酸三钙/神经生长因子复合材料或浸提液共同培养作为实验组,并以含体积分数10%胎牛血清的培养液培养骨髓间充质干细胞作为对照组.观察细胞在复合材料上的生长、存活及凋亡情况. 结果与结论：MTT检测结果显示,共培养5,7 d,实验组吸光度值高于对照组（P〈0.05）;流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染法结果显示,实验组细胞凋亡率显著低于对照组（P〈0.05）;扫描电镜观察见骨髓间充质干细胞在精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸多肽接枝聚（羟基乙酸-L-赖氨酸-乳酸）/聚乳酸/β-磷酸三钙/神经生长因子复合材料表面生长良好,胞体发出多个突起,并交织成网状,呈典型的神经元样细胞表现.可见精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸多肽接枝聚（羟基乙酸-L-赖氨酸-乳酸）/聚乳酸/β-磷酸三钙/神经生长因子复合材料与骨髓间充质干细胞具有良好的细胞相容性,可作为优良的载体用于构建人工仿生神经.